自体成骨细胞加同种异体骨复合移植的研究

目的：选择较理想的骨移植替代物。方法：抽取实验组家兔骨髓2mL分离出间质细胞，在特殊培养液中进行体外诱导．增殖成成骨细胞种植于同种异体骨表面进行培养4周后，将细胞和同种异体骨复合移植物植入实验兔节段性尺骨缺损中。另取12只家兔单纯植入同种异体骨作为对照组，观察16周。结果：经碱性磷酸酶染色阳性，Chfα1免疫组织化学染色阳性，Von Kossa染色显示骨小结，表明骨髓间质细胞在体外成功诱导成成骨细胞。动物实验表明植入体周同无炎性细胞浸润．伤口Ⅰ期愈合，术后7周开始出现骨痂，11周出现桥梁骨痂，术后16周达到骨性愈合。明显优于对照组。结论：此复合移植物生物相容性好，有较强的骨诱导作用，是比较理想的骨移植替代物。     

源于脾干细胞的破骨细胞诱导生成及培养

目的建立一种可以获得大量破骨细胞或破骨样细胞的方法，以便进行原发性骨质疏松有关破骨细胞的研究。方法C57雌性小鼠经尾静脉注射5-氟脲嘧啶后，取脾细胞悬液在含有rmIL-3，rhIL-6和胎牛血清(FCS)以及牛血清白蛋白(BSA)的α-MEM-琼脂半固体培养7d左右，获得脾脏造血干细胞集落；此集落再以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)诱导生成破骨样细胞。结果经活体观察、酒石酸-抗酸性磷酸酶(TRAP)染色、扫描电镜检查，证实所得细胞为破骨细胞。结论建立了一种获得大量破骨细胞或破骨样细胞方法，即源于脾干细胞的破骨样细胞的诱导生成及其培养。     

细胞凋亡信息分子Fas、FasL和NF-κB在氟化物作用后破骨样细胞凋亡过程中的表达

目的研究氟化物作用后破骨细胞样细胞凋亡过程中细胞凋亡配体Fas、FasLFasLigand和核因子NF-κB的表达变化。方法在培养基中分别加入不同浓度的氟化钠培养破骨样细胞,以免疫组织化学染色方法观察细胞的Fas、FasL和NF-κB表达。结果Fas、FasL在破骨样细胞表达量随培养基中氟化钠浓度增高而增高;NF-κB的表达量随培养基中氟化钠浓度增高而降低,两者均具有剂量依赖关系。结论在氟化钠所致的破骨细胞凋亡过程中,Fas,Fas-L的表达随氟化物浓度增高而加强;而核因子NF-κB的表达随氟化物浓度增高而减弱,两者都具有剂量依赖关系。     

破骨细胞对成骨细胞作用的研究

目的：探讨破骨细胞及其亚细胞结构对成骨细胞生长和功能的影响。方法：在获取大量破骨细胞的基础上，以细胞生物学方法探讨破骨细胞及其产生骨吸收后，破骨细胞、细胞培养基和亚细胞结构对成骨细胞生长和功能、成骨细胞核结合因子Cbfα1表这的影响。结果：破骨细胞及破骨细胞产生骨吸收后，破骨细胞、细胞培养基和亚细胞成分对成骨细胞的生长和功能均有促进作用，可使成骨细胞的Cbfα1mRNA的表达明显增强。     

对消化性溃疡病认识的革命——2005年诺贝尔生理医学奖评述

2005年诺贝尔生理医学奖授予澳大利亚学者病理学家，沃伦（Robin Warren）和内科医生马歇尔（Barry Marshall），表彰他们发现胃和十二指肠幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，HP）感染是消化性溃疡病（胃炎和胃和十二指肠溃疡）的病因，以及使这种疾病从原先的病因不明、难以治愈的慢性病，变成了一种采用短疗程的抗生素和胃酸分泌抑制剂就可治愈的疾病．马歇尔和沃伦的发现，革命性地改变了人们对胃病的认识，大幅度提高了胃溃疡等患者获得彻底治愈的机会，为改善人类生活质量做出了贡献．本文回顾了上个世纪八十年代以前，医学界对胃炎和消化性溃疡病的模糊认识，介绍沃伦和马歇尔的重大发现及其意义．     

成年大鼠破骨细胞体外培养及细胞凋亡的观察

目的　为研究骨重建过程中破骨细胞的关键作用,建立成年大鼠（１２ ～５０ 周龄） 破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。方法　大鼠处死后,在无菌条件下取出股骨,剪去两骺端,以αＭＥＭ 将骨髓细胞冲洗出, 并离心洗细胞２ 次,置于αＭＥＭ 培养液,内含αＭＥＭ,体积分数为１０％ 的胎牛血清（ＦＣＳ） 和１α,２５（ＯＨ）２ Ｖｉｔ Ｄ３ １０ －８ ｍｏｌ／Ｌ,在２４ 孔板内,以体积分数为５ ％ 的ＣＯ２ ,３７ ℃,培养８ 天。按原位ＤＮＡ 末端标记（ＴＵＮＥＬ）检测试剂盒方法染色细胞,以荧光显微镜观察细胞凋亡。结果　经活体观察、ＨＥ染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（ＴＲＡＰ） 染色,光学显微镜、扫描电镜观察骨片之陷窝的形成,证实培养的细胞为破骨细胞;ＴＵＮＥＬ 检测,荧光显微镜下可见破骨细胞核染色质浓缩、裂解等凋亡细胞的典型变化与未凋亡的破骨细胞。结论　本实验建立了成年大鼠破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。     

破骨细胞的研究进展

健康成人的骨骼在不断地重建，旧骨吸收和新骨形成处于动态平衡状态，破骨细胞在骨骼的形成和骨量的调节方面起着关键作用。近年来，破骨细胞的研究取得了相当大的进展。在破骨细胞增殖和分化过程中RANKL和M—CSF起到了重要的作用。骨吸收过程中破骨细胞与骨基质接触，在它自身与骨表面之间形成一个独立的微环境。破骨细胞对于骨的识别受到整合素的调控。PU．1基因、转录因子c-Fos、Fra-1、c-Jun可以通过调节破骨细胞前体的分化和成熟发挥吸收骨的作用。通过来源于脾干细胞的破骨细胞样细胞的诱导生成及其培养，可以获得大量的破骨细胞，从而用于实验室内分子生物学研究。     

用单细胞凝胶电泳技术测定犬全身照射后外周血和骨髓DNA损伤

方法:用3.9GyX射线全身照射4只犬,测定照射后9天内的外周血细胞和骨髓细胞数,并用碱性单细胞凝胶电泳技术(彗星测定)检测照射前和照射后1、4小时与1、3、9天的外周血单个细胞及照射前和照射后1、9天骨髓细胞DNA链断裂损伤。     

辐射和N－亚硝基二乙醇胺诱发培养的人正常输尿管上皮稳定p53癌蛋白和c-myc的超常表达

单用60Co照射,或与N-亚硝基二乙醇胺(NNE)合用。刺激培养的60例非恶性肿瘤病人输尿管上皮组织中缺陷p53癌蛋白和c-myc的表达,目的是了解辐射和亚硝胺附加刺激到什么程度将增加外植组织培养物中缺陷p53蛋白高水平表达的病人数,及这组病人是否也显示c-myc的表达升高。     

细胞凋亡的研究进展:回顾1998

细胞凋亡是当前生物医学热门话题之一，近年有诸多相当令人兴奋的发现。现已明确，细胞凋亡的发生主要是胞内一系列凋亡蛋白酶激活的级联反应和细胞表面的死亡受体接受相应外部信号生物调节的结果。本文介绍１９９８年国外有关细胞凋亡研究的主要进展，包括凋亡蛋白酶的作用及其激活、Ｂｃｌ－２家族的作用、死亡受体及其信号转导和与细胞凋亡有关的放射分子生物学研究概况。