用聚合酶链反应检测人巨细胞病毒DNA的失败原因

聚合酶链反应(PCR)是一种新的基因扩增技术,应用日趋广泛,但影响因素较多。我们在用 PCR 检测人巨细胞病毒(HCMV)DNA 时发现,紫外吸收法进行引物定量,不一定能测出样品中寡核苷酸的实际含量,引物寡核苷酸定量不准,是 PCR 不成功的重要原因。材料与方法(一)PCR 模板 HCMV AD 169株,引自解放军第302医院病毒室。病毒经人胚肺纤维母细胞培养增殖,冰融3次,直接或     

柯萨奇B组病毒感染的ELISA检测

为了对柯萨奇B(CoxB)组病毒感染进行病原诊断,我们用细胞培养的病毒抗原建立了检测该组病毒(1～6型)抗体的ELISA 法.两年多临床试用表明,该法快速、简便、特异与稳定.现报告如下.     

亲环素A抗原表位氨基酸序列及三维结构研究

目的：研究人抗亲环素A（CyPA)McAb D4识别的抗原表位的氨基酸组成及其在蛋白分子上的三维定位。方法：以抗人亲环素A McAb D4作捕获抗体,对噬菌体展示肽库进行淘筛,并对筛选出的噬菌体中插入片段进行DNA序列测定和氨基到序列分析,再用RasMol蛋白质三维结构分析软件在亲环素A分子的三维结构中查找相应的抗原表位。结果：经过三轮淘筛和扩增,选择7个克隆进行序列,提示该抗原表位是构象性的。用RasMol蛋白质三维结构分析软件在亲环素A分子的三维结构中,找到由W121、S99、L98、Q111、S110、F112、L122构成的疏水代状结构,可能就是McAb D4的抗原表位。结论：人亲环素A分子上W121、S99、L98、Q111、S110、F112、L122构成一个构象型抗原表位。     

亲环素A与HIV－1的感染性

亲环素A（CyPA）是免疫抑制药物环孢素A的受体,是胞质内一种具有肽基－脯氨酸顺／反异构酶活性的蛋白质。CyPA在HIV－1的生命周期中能掺入病毒颗粒,其掺入为HIV－1的感染性所必需。本文简要综述CyPA在HIV－1复制中的作用,以及这方面的研究对抗HIV－1治疗的意义。     

45例SLE患者抗CyP与ENA多肽抗体谱测定结果分析

0　引　　言系统性红斑狼疮 ( SLE)是一种全身性的自身免疫病 ,其血清学异常常表现为产生一系列特异的自身抗体 ,如抗 Sm、抗 ds- DNA、抗 U1- RNP等 ,其中可提取的核抗原 ( ENA)多肽抗体谱的出现在 SLE的发病机制中具有重要作用。近年来 ,国外有学者发现 SLE患者存在有较高水平的亲环素 ( Cy P)自身抗体 ,并与疾病的活动性密切相关 [1]。为探讨 Cy P自身抗体与 ENA多肽抗体间的关系 ,作者以 SLE患者为研究对象 ,对二者进行了测定和比较 ,现报告如下。1　材料与方法1 .1　主要试剂　重组人 Cy PA( rh Cy PA)抗原、辣根过氧化…     

人穿孔素cDNA的克隆与序列分析

引言穿孔素（ｐｅｒｆｏｒｉｎ）又称成孔蛋白（ｐｏｒｅｆｏｒｍｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＰＦＰ）,是一种主要由激活的细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）和自然杀伤（ＮＫ）细胞所产生的溶细胞蛋白,贮存于细胞的杀伤颗粒中,在细胞介导的杀伤过程中起非常关键的作用［１］。...     

凋亡相关基因突变与人类疾病

细胞凋亡 (又称细胞程序性死亡 )过程由多种不同基因产物的协同作用来完成。其中某些凋亡基因的突变 ,已被认定为人类疾病的病因或相关因素。作者综述了当前对凋亡基因突变所致人类疾病的认识 ,以及将凋亡的基础研究成果应用到临床疾病诊治的情况     

人精子蛋白17基因在大肠杆菌中的表达

目的: 克隆人精子蛋白17(hSp17)基因,构建重组表达载体并表达重组蛋白. 方法: 用RT-PCR法从人睾丸中克隆hSp17基因,构建重组表达质粒pET-28a( )/hSp17,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,用特异性hSp17的mAb进行Western blot鉴定,Ni-NTA His-Bind树脂纯化重组蛋白. 结果: 克隆到hSp17 cDNA(456 bp)并经过DNA测序证实,表达和纯化得到重组蛋白hSp17(表观Mr为27 500),并经过Western blot鉴定. 结论: 成功克隆和表达hSp17 基因.     

精子蛋白17在卵巢癌中的表达及其意义

目的:探讨精子蛋白17在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌组织学分型,肿瘤分化程度及临床分期预后的关系.方法:对48例上皮性卵巢癌手术切除的石蜡包埋组织标本用自制的Sp17单克隆抗体进行免疫组化染色,研究Sp17在卵巢癌组织中的表达,并结合临床资料,探讨Sp17的表达与卵巢癌组织学分型、肿瘤分化程度(分级)及临床分期、预后的关系.结果:Sp17在上皮性卵巢癌的阳性表达率达43.8%(21/48),Sp17的表达与上皮性卵巢癌的组织学类型、肿瘤分化程度及临床分期无相关性,Sp17阳性患者生存时间似较阴性者为长,但无统计学意义.结论:Sp17在上皮性卵巢癌中有较高的表达率,值得进一步研究.     

假丝酵母菌属感染评分预测外科ICU患者侵袭性真菌感染

目的采用假丝酵母菌属评分(CS)以预测普通外科ICU患者侵袭性假丝酵母菌病(IC),弥补血培养方法的不足。方法采集2011年6月-2013年5月普通外科ICU 307例患者资料及微生物检验结果,结合临床诊疗实际,参考国外假丝酵母菌属感染评分标准(CS=2×脓毒症+1×外科手术+1×全肠外营养+1×假丝酵母菌属定植),以CS=3作为预测假丝酵母菌属感染的临界值,并将评分结果与真菌培养结果进行比较分析。结果 307例ICU患者中,CS≥3者145例占47.2%;确诊IC感染患者34例,感染率为11.1%;CS≥3的确诊感染IC患者33例,占总体确诊感染IC患者总数的97.1%。结论假丝酵母菌属评分方法早期预测ICU患者侵袭性假丝酵母菌病具有一定的价值,对临床预防性应用抗真菌药物有一定的指导意义。