构建MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1表达的腺病毒载体

目的：构建串联的MYC反应元件修饰人端粒酶逆转录酶（hTERT)核心启动子引导酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1表达的复制缺陷型腺病毒载体。方法：将串联的MYC反应元件修饰的hTERT核心启动子及下游酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1克隆到穿梭质粒pDC316上，上辅助质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞获得重组复制缺陷型腺病毒并在HEK293细胞中扩增重组病毒。PCR法及斑形成实验鉴定重组腺病毒和病毒滴度。结果：成功获得由6倍和18倍MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的复制缺陷型腺病毒载体。结论：MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的腺病毒载体为进一步研究骨肉瘤转录靶向基因治疗奠定了基础。     

膝骨关节病的关节镜诊断治疗

目的 通过对79例84膝骨关节病的关节镜诊断治疗回顾性总结,探讨高效率、创伤小、疗效佳的方法。方法 采用关节镜微创技术,结合术前检查对膝骨关节病分为：软骨破坏型,滑膜类型,游离体型及半月板型,依此施行有针对性,局限化手术治疗。结果 69膝得到6mo-3a的随访,按膝关节综合评分表评分,优20％,良59％,可和差21％。结论 该方法具有创伤小、康复快、并发症少等优点,在病损严重的病例,全膝置换或截骨术是进一步提高总体疗效的适宜选择。     

使用人骨钙素启动子实现在体研究成骨细胞特定基因的功能

目的:使用骨钙素启动子构建骨组织特异性小发卡状RNA表达载体.方法:实验于2003-11/2004-09在解放军第四军医大学全军骨科研究所和全军整形外科中心完成.以HEK293细胞基因组为模板,利用聚合酶链反应扩增人骨钙素启动子.将骨钙素启动子、针对虫荧光素酶的小发卡状RNA编码序列和多腺苷酸信号依次克隆至pGL3-control载体的相应酶切位点,经双酶切鉴定和DNA测序证实后命名为pGL3-OCP-shLuc.将pGL3-OCP-shLuc与pGL3-control分别共转染人胚胎肾细胞HEK293和人骨肉瘤细胞MG-63,48 h后测定虫荧光素酶活性,计算相对活性.结果:使用特异性引物成功扩增出长度为830 bp的人骨钙素启动子聚合酶链反应产物.DNA测序结果证实pGL3-OCP-shLuc中的小发卡状RNA表达框与设计完全一致.pGL3-OCP-shLuc与pGL3-control共转染HEK293细胞后,虫荧光素酶相对活性与对照组相比没有明显差异,而共转染MG-63细胞后虫荧光素酶相对活性显降低,剔出效率约为69.8%.结论:成功使用人骨钙素启动子构建了小发卡状RNA表达载体,并实现了骨组织特异性RNA干扰,为将RNA干扰技术引入骨肉瘤基因治疗领域奠定了基础.     

C-反应蛋白联合肿瘤标志物检测在老年肺癌诊断中的应用

目的 分析C-反应蛋白(CRP)、细胞角蛋白片段(Cyfra21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)和糖类抗原19-9(CA19-9)联合检测对老年肺癌的诊断价值.方法 检测200 例老年肺癌患者、120 例老年肺部良性病变患者和80 例老年健康体检者上述指标,分析5 项指标单独和联合检测诊断肺癌...     

阿立哌唑与富马酸喹硫平治疗精神分裂症疗效观察

【目的】比较阿立哌唑与富马酸喹硫平治疗精神分裂症的疗效及不良反应。【方法】将80例精神分裂症患者随机分为阿立哌唑组与富马酸喹硫平组各40例。阿立哌唑剂量为10～30mg／d，富马酸喹硫平为400～800mg／d，疗程8周。采用阳性阴性症状量表（PANSS）评定疗效，采用副反应量表（TESS）和锥体外系副反应量表（RSESE）评定不良反应。【结果】阿立派唑有效率为87．5％，富马酸喹硫平有效率为85．0％，两组治疗效果无显著性差异。但副反应富马酸喹硫平组明显高于阿立哌唑组。【结论】阿立哌唑为一种安全有效且耐受性较好的抗精神病药。     

大龄先天肌性斜颈患者的康复治疗体会

对7例大龄先天肌性斜颈患者采用手术切断胸锁乳突肌的张力纤维，配合石膏外固定和面部、颈部按摩，取得了较好效果。     

特异性抗前列腺癌多肽抑制前列腺癌细胞生长的作用研究

背景与目的：本实验组根据PSA具有的肿瘤定位及丝氨酸蛋白酶活性，设计并已获得了包含促细胞凋亡的BH3结构域、抗肿瘤血管形成的VEGF拮抗肽K237和bFGF拮抗肽DG2结构域以及可被PSA特异性水解短肽的复合型多肽APP216的纯化蛋白，并运用细胞培养初步验证了其在体外对前列腺癌细胞的杀伤作用，本文进一步探讨该多肽对人前列腺癌肿瘤异种移植物的杀伤作用，为抗前列腺癌新药的研究奠定基础。方法：利用检测荷瘤裸鼠血清PSA浓度、各组荷瘤裸鼠肿瘤体积、重量变化、各组荷瘤裸鼠治疗前后体重的变化以及病理组织学观察来评估包含有BH3、K237、DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列的多肽药物APP216对分泌PSA的前列腺癌细胞系22RV，荷瘤裸鼠及不分泌PSA的前列腺癌细胞系PC3荷瘤裸鼠的肿瘤细胞杀伤作用。结果：前列腺癌细胞22RV，的荷瘤裸鼠治疗后比治疗前血清PSA浓度下降了71．1％、肿瘤体积下降51％，治疗组肿瘤重量比对照组低52％，组织病理学观察镜下可见坏死瘤组织。而前列腺癌细胞PC3的荷瘤裸鼠治疗组肿瘤重量与对照组无明显差别；治疗前后肿瘤体积变化无统计学意义，组织病理学观察癌细胞生长活跃。所有裸鼠重要脏器均未见病理损伤。结论：APP216多肽对分泌PSA的前列腺癌细胞荷瘤裸鼠具有良好的抑制瘤细胞增殖的作用。而对于不分泌PSA的前列腺癌细胞荷瘤裸鼠抑瘤效果不佳。并且该蛋白对其他重要脏器无毒性。     

抗前列腺癌多肽APP216的体外活性

目的：探讨抗前列腺癌多肽APP216对体外培养的前列腺癌细胞的杀伤作用，为抗前列腺癌新药的研究奠定基础。方法：利用MTT实验、细胞凋亡染色及流式细胞仪，检测包含有BH3、K237、DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列的多肽药物APP216对分泌PSA的前列腺癌细胞系LNCaP、22RV1及不分泌PSA的前列腺癌细胞系PC3m、DU145的杀伤作用。结果：APP216（270 μg／mL）处理48h后，前列腺癌细胞系LNCaP、22RV。的细胞生存率分别为22％和34％，72h后为10％和8％；前列腺癌细胞系PC3m、DU145的细胞生存率分别为90％和95％，72h后为87％和92％。APP216作用后，分泌PSA的前列腺癌细胞胞核呈致密浓染，或呈碎块状，有凋亡小体出现；不分泌PSA的PC3m细胞则未发现改变。APP216（270 μg／ml）处理48h后，分泌PSA的LNCaP细胞凋亡率为36．26％，不分泌PSA的PC3m细胞凋亡率仅为1．63％。结论：APP216多肽对分泌PSA的前列腺癌细胞有杀伤作用，可诱导肿瘤细胞发生凋亡；而对于不分泌PSA的前列腺癌细胞则效果不佳。证实了该多肽可被PSA特异性酶切；同时，BH3结构域可通过HIV-TAT的转导作用转入细胞内诱导凋亡。     

全身结核死亡1例

患者,女,16岁,学生.主因消瘦、腹部不适半年入院.患者于半年前无明显诱因出现腹部不适、腹胀,呈持续性,伴有食欲不振,无恶心、呕吐,无咳嗽、咳痰,曾就诊于当地医院,超声示盆腔积液,胸片示肺结核,结核菌素试验阴性,诊断为"结核性腹膜炎",予抗结核治疗,症状有所好转出院.     

放-化疗联合治疗原发性鼻腔NK/T细胞淋巴瘤的疗效观察

目的：观察放-化疗联合治疗对原发性鼻腔NK/T细胞淋巴瘤的近期疗效。方法：52例确诊为原发性鼻腔NK/T细胞淋巴瘤患者,随机分为治疗组与对照组。对照组接受单纯放疗治疗,治疗组接受放-化疗联合治疗。化疗加放疗1～2个疗程后,在放疗过程中,加用静脉注射左旋门冬酰胺酶每次20mg/m^2。两组患者治疗结束后1个月内评价疗效。结果：治疗组临床疗效明显好转,完全缓解率为73.1%,高于对照组（42.3%）,两组比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：放-化疗联合治疗原发性鼻腔NK/T细胞淋巴瘤近期疗效较好。