巨噬细胞肿瘤疫苗抗瘤作用的实验研究

目的：探究巨噬细胞肿瘤疫苗的细胞形态与表型特征,并观察其CTL反应的诱导效果。方法：分别采用透射与扫描电子显微镜、免疫荧光染色及流式细胞术等技术对巨噬细胞肿瘤疫苗的超微结构及CD14、CD68、CD80、CD86、MHCⅡ等分子进行测定。采用生长状态良好的H22肿瘤细胞移植于接种不同肿瘤疫苗的实验小鼠,分别采用直接测量法、MTT法及比色法测定瘤重量、瘤体积、肿瘤细胞杀伤率和培养上清液LDH活性。结果：巨噬细胞肿瘤疫苗细胞表面有许多的伪足皱褶、囊泡,胞浆内有大量大小不一、形态不规则的吞噬体；CD14、CD68、CD80、CD86及MHCⅡ的阳性细胞率分别为53.90%、98.60%、26.50%、90.20%和25.40%。小鼠体内实验结果显示,巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的肿瘤形成率、瘤体积与瘤重量明显低于对照组和石蜡诱生的巨噬细胞接种组（P均〈0.05）；巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的成瘤率与灭活肿瘤细胞接种组无明显差异（P〉0.05）,但瘤体积与瘤重量明显低于灭活肿瘤细胞接种组（P均〈0.05）。另外,巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的淋巴细胞自体肿瘤细胞杀伤率和培养上清液LDH活性分别高于对照组、灭活肿瘤细胞接种组和石蜡诱生的巨噬细胞接种组。结论：巨噬细胞肿瘤疫苗具备巨噬细胞的典型特征,该种细胞接种后可诱导机体产生特异性抗肿瘤免疫反应。     

人缺血脑组织中TNF-α和IL-1β的表达

目的 :检测人缺血脑组织中TNF α和IL 1β的表达。 方法 :将 13例脑梗死的死亡病例按发病时间分成 <2d、3～ 5d、 >5d3个组 ,以非缺血侧半球作为对照 ,用免疫组化染色法检测缺血脑组织中TNF α和IL 1β的表达。结果 :人脑缺血后缺血病灶中TNF α和IL 1β呈高表达 ,与正常侧脑组织相比较有极显著差异。TNF α和IL 1β表达细胞的分布与缺血灶相一致 ,呈局灶性分布。TNF α的表达高峰在病后 2d内。IL 1β表达高峰在病后 3～ 5d。在病后 5d ,缺血侧TNF α和IL 1β的表达与正常侧无显著差异。结论 :人类脑缺血组织中TNF α和IL 1β的表达与动物实验的结果相似 ,提示TNF α和IL 1β参与了脑缺血损伤 ,有助于临床建立新的有针对性的治疗措施     

人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白V3区对细胞结合能力的研究

目的：研究人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）不同亲嗜株包膜糖蛋白Ｖ３区结合于靶细胞的能力。方法：合成来源于不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区的生物素标记和非标记的多肽。采用流式细胞计数分析生物素化的 Ｖ３多肽对细胞的结合能力以及细胞表面的结合配体。结果：ＨＩＶ－１Ｘ４　亲嗜株ＩＩＩＢＶ３区能结合于多种细胞的表面，包括辅助受体ＣＸＣＲ４；竞争实验结果显示蛋白酶抑制剂能抑制该结合。Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区只极微弱地结合于外周血单核细胞和表达ＣＣＲ５ 的人星形胶质细胞表面。结论：不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区结合于细胞表面的能力不同从亲嗜株Ｖ３区直接结合于细胞表面并被其自身所增强，其靶分子至少包括辅助受体 ＣＸＣＲ４和蛋白酶分子；而Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区则不结合于 ＣＣＲ５和蛋白酶。     

hB7-1重组腺病毒感染的肿瘤细胞的生物学特性

目的 在完成hB7-1 cDNA克隆并成功构建包含hB7-1基因的重组腺病毒rAdexl-B7－1的基础上,对经rAdexl-B7－1感染的B16细胞的体外生物学特性进行了研究。方法 以FACS、电镜等方法观察病毒感染前后B16细胞的变化。结果 ①重组腺病毒经KEK293细胞扩增、CsCl纯化后滴度可达10^10ＰＦＵ／ml,且２０ＭＯＩ的病毒可使９５％以上的Ｂ１６细胞被感染。②细胞动力学研究显示,rAdexl-B7-1对Ｂ１６的生长及集落形成能力无影响。③ＦＡＣＳ结果表明,rAdexl-B7-1细胞的增殖周期无影响。④扫描电镜及透射电镜结果表明,经rAdexl-B7-1感染的Ｂ１６细胞在表面形态及超微结构上出现变化。结论 重组腺病毒rAdexl-B7-1对Ｂ１６细胞的生长动力学无影响,对形态学有轻微影响。     

人CD80重组腺病毒感染的肺癌细胞的生物学特性

目的：研究c-myc对人端粒酶逆转录酶（htert）启动子的调节作用。方法：采用Lipofect脂质体转染法将DNA质粒分别转染至肝癌细胞HepG2、猴肾COS－7细胞和NIH3T3细胞,孵育48h后,分别检测其报告基因萤虫素酶活性。结果：与对照组相比,载有htert80bp启动子的质粒TERTLuc(800)在肿瘤细胞HepG2中活性显著增强。外源性转因子c-myc可显著上调htert启动子的表达,其激活作用与剂量呈正相关。人工突变c-myc结合位点明显降低htert启动子的活性。结论 ：c-myc可直接激活ht ert启动子的表达,是调节端粒酶活性的重要转录因子。     

重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子下游处理研究(Ⅰ)

目的 在成功构建人粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)高效表达克隆的基础上,对表达产物进行实验室规模和中试规模的分离、纯化及对rhGM—CSF在溶液中的稳定性进行研究。方法 应用工程菌发酵、超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层折、复性、离子交换等方法对rhGM—CSF进行纯化,并用GM—CSF依赖株TF-1细胞MTT法测定其生物学活性及应 用透析法测定其在溶液中的稳定性。结果 终产物纯度达99％,比活性达1.5×10~7u/mg蛋白。在偏硷性溶液中会发生降解,但降解后生物活性未见明显下降。结论 采用分子筛色谱和阴离子交换色谱对GM—CSF进行纯化,经从实验室规模放大至中试规模证明该工艺是简便可行的,得到了高纯度、高比活性的纯品。     

壳寡糖协同双歧杆菌对荷瘤鼠免疫功能的影响

背景与目的:建立H22肝癌荷瘤鼠实验动物模型,研究壳寡糖协同双歧杆菌对荷瘤鼠免疫功能的影响.材料与方法:采用体内注射的方法将壳寡糖和双歧杆菌注入荷瘤小鼠体内,观察肿瘤生长情况,并进行免疫功能的测定,及观察肿瘤病理变化.结果:壳寡糖协同双歧杆菌对肿瘤的生长有抑制作用,可提高荷瘤小鼠血清的IL-2和INF-γ含量,增加荷瘤小鼠免疫器官脾脏和胸腺的重量,显微镜下观察显示肿瘤组织出现坏死.结论:壳寡糖协同双歧杆菌可抑制肿瘤生长,提高机体免疫功能,促使肿瘤细胞坏死.     

转移部位对肿瘤生长的影响

本文应用可移植的WBT-2实体型纤维肉瘤细胞接种于不同的部位,以探讨接种部位对肿瘤生长的影响。 材料与方法 动物用3～4月龄的纯系WKA大鼠(Wister King Aptekman/Hok rats),体重在200～250g,,雄雌并用。肿瘤及肿瘤细胞悬液的制备:应用的WBT-2纤维肉瘤是用3.4苯胼在诱发的后经皮下传代20代的移植率为100％的     

巨噬细胞分化的研究现状

巨噬细胞是机体的重要免疫细胞之一,在特异性免疫反应的诱发和免疫调节中起关键作用.巨噬细胞是一种多分化来源的细胞,单核细胞、CD34+造血干细胞及早期T淋巴细胞等在适当的因素作用下可分化成巨噬细胞,不同细胞来源的与不同因素诱导分化的巨噬细胞在功能与生物学特性方面有很大差异.     

斑蝥素及其衍生物在肿瘤治疗中的研究进展

天然斑蝥素源自于芫青科昆虫斑蝥。斑蝥作为传统中药昆虫类药物之一,对消化道肿瘤等实体肿瘤、机体顽癣、瘰疬、赘疣、斑秃、颜面神经麻痹等具有一定的治疗作用。西医基础研究表明,斑蝥提取物斑蝥素在体外明显干预肿瘤细胞凋亡、自噬等生物学过程,具有显著的抗肿瘤活性。天然提取的斑蝥素或斑蝥虫中药炮制品毒副作用明显,相关药品的直接使用不...