细菌Ⅵ型分泌系统功能的多样性

<正>在漫长的进化过程中，细菌为了适应各种各样的环境，进化出了多种大分子分泌系统以帮助菌体生存以及侵袭宿主^[1]。迄今为止，在细菌中已发现了Ⅰ～Ⅸ型分泌系统(Type Ⅰ-Ⅸ secretion systems,T1SS～T9SS)，这些分泌系统以一步式或两步式途径将底物跨膜转移至胞外^[2-4]。其中Ⅵ型分泌系统(Type Ⅵ secretion system,T6SS)是革兰阴性菌中发现的一种由多蛋白组成的跨膜复合物^[5-6]。     

液相色谱串联质谱测定大鼠血浆中多黏菌素E甲磺酸钠及多黏菌素E方法的建立及应用

目的 建立液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中多黏菌素E甲磺酸钠（CMS）及其活性成分多黏菌素E并进行应用。方法 通过多黏菌素E主成分E1及E2浓度之和间接得到多黏菌素E的浓度。在大鼠血浆样品中加入硫酸对CMS进行水解，通过测定水解后与水解前血浆样品中多黏菌素E的浓度差间接测定CMS浓度。采用固相萃取法对样品进行预处理。色谱柱选择Phonomenex Kinetex XB-C18柱，质谱采用电喷雾电离源（ESI源）及多反应监测（multi-reaction monitoring,MRM）模式。其中待测物质多黏菌素E1、多黏菌素E2、内标多黏菌素B1的离子通道分别为m/z390.7→101.3、m/z 386.0→101.2、m/z 402.3→101.2。结果 多黏菌素E1及E2的测定不受大鼠血浆中内源物质的影响，且分别在0.187～6.24 mg/L、0.037 0～1.23 mg/L内线性良好，批内与批间精密度良好，变异系数均<15%。多黏菌素E1、E2准确度范围分别为100.1%～113.3%和94.9%～107.3%。多黏菌素E1、E2的提取回收率分别为2...     

针对Abl-T315I突变的Bcr-Abl蛋白激酶抑制剂的研究进展

Bcr-Abl融合基因与慢性粒细胞白血病(CML)的发病发展密切相关.直接作用于Bcr-Abl蛋白的小分子药物是目前治疗CML的重要方法,受到广泛的关注.伊马替尼作为首个上市的Bcr-Abl蛋白激酶抑制剂,在靶向治疗慢性粒细胞白血病上取得了很大成功,但Bcr-Abl基因的突变导致其出现耐药性,尤其以Abl-T315I突变的耐药程度最高.本文综述了近年正在开发中的针对Abl-T315I突变的Bcr-Abl蛋白激酶抑制剂.     

硫化氢上调ABCA1的表达促进HepG2细胞载脂蛋白形成

目的探讨硫化氢对HepG2细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白及载脂蛋白形成的影响。方法将硫化氢供体硫氢化钠(NaHS)以不同浓度(25、50、100、200及400μmol/L)处理HepG2细胞24h后,采用MTT法检测NaHS对HepG2细胞细胞存活率的影响;HepG2细胞以100μmol/LNaHS处理4、12及24h,实时定量PCR检测NaHS对HepG2细胞ABCA1及载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白A2(ApoA2)mRNA的影响,Westernblot检测NaHS对ABCA1、ApoA1及ApoA2蛋白的影响。结果 MTT结果显示,除400μmol/L以外,25、50、100及200μmol/LNaHS对HepG2细胞的生长无抑制作用;Westernblot量效结果显示,NaHS呈浓度依赖性地上调ABCA1蛋白的表达;时效结果显示,100μmol/LNaHS作用4、12及24h,均能上调ABCA1表达及促进培养上清ApoA1、ApoA2的分泌,但不具时间依赖性;实时定量PCR结果显示,ABCA1、ApoA1及ApoA2的mRNA均增加,其变化与蛋白表达变化一致。结论硫化氢可以促进HepG2细胞ABCA1表达,进而促进载脂蛋白形成。     

隐丹参酮对骨髓来源巨噬细胞功能的影响

目的研究隐丹参酮对骨髓巨噬细胞功能的影响。方法激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能;庆大霉素保护法检测巨噬细胞杀菌能力;q-PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平;Western blot检测NF-κB通路;LPS(lipopolysaccharides)及IL-4刺激检测巨噬细胞分型。结果隐丹参酮能够增强巨噬细胞吞噬功能及杀菌能力;促进抗炎因子IL-10并抑制促炎因子TNF-α及IL-6的表达;阻断NF-κB信号通路;诱导巨噬细胞向M2型分化。结论隐丹参酮能促进巨噬细胞向M2型分化,并上调骨髓巨噬细胞的免疫功能。