一株海绵共附生真菌Fusarium equiseti SCSIO 41019的次级代谢产物及其抑菌活性研究

目的 研究海绵共附生真菌Fusarium equiseti SCSIO 41019的次级代谢产物及抑菌活性。方法 采用中压硅胶柱色谱、中压反相ODS柱色谱及高效液相色谱等方法对发酵产物进行分离和纯化，运用核磁数据及文献对比的方法鉴定化合物结构。采用滤纸片琼脂扩散法、改良肉汤稀释法评价化合物的抑菌活性。结果 从其大米发酵产物中分离并鉴定了8个化合物，分别为equisetin(1)、5'-epiequisetin(2)、lumichrome(3)、N-乙酰基色胺(4)、亚油酸(5)、methyl (4-hydroxyphenyl) acetate(6)、methyl (2-hydroxyphenyl) acetate(7)和graminin B(8)。化合物1、2和5对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)分别具有不同程度的抑制作用，最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)为2.0~125μg/mL，其中化合物1的抑菌活性最强(MIC值分别为2.0和3.9μg/mL)。结论 从菌株Fusarium equiseti SCSIO 41019分离得到两个具良好抑菌活性的化合物(1~2)，为将其开发为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的先导化合物提供一定参考。     

重组旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂体外诱导骨髓来源巨噬细胞极化的研究

目的探讨重组旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制(rTs-Cys)对体外诱导骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化的调控作用。方法获取BMDMs并培养至条件培养基中,7d后获取成熟BMDMs。将此BMDMs分为阴性对照组(A组)、阳性对照组(B组)、单独重组蛋白组(C组)和蛋白共培养组(D组),A组细胞给予10 ng/mLγ-干扰素(IFN-γ)和100 ng/mL脂多糖(LPS)刺激,B组细胞给予10 ng/mL白细胞介素(IL)-4和10 ng/mL IL-10刺激,C组细胞给予1_μg/mL rTs-Cys干预,D组细胞给予1μg/mL rTs-Cys、10 ng/mL IFN-γ及100 ng/mL LPS刺激。干预24 h后,收集细胞及培养上清,采用流式细胞术检测各组细胞中F4/80^+、CD11b^+、CD206^+和CD11c^+细胞比例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10及转化生长因子-β(TGF-β)水平,采用免疫荧光染色鉴定CD86^+、CD206^+表型。结果流式细胞术检测结果显示,4组F4/80^+CD11b^+CD11c^+细胞比例差异具有统计学意义(F=46.184,P<0.001),C组及D组F4/80^+CD11b^+CD11c^+细胞比例均较A组显著降低(P均<0.001);4组F4/80^+CD11b^+CD206^+细胞比例差异具有统计学意义(F=11.032,P<0.01),C组及D组F4/80^+CD11b^+CD206^+细胞比例均较A组显著升高(P均<0.01)。免疫荧光染色显示,C组及D组CD206^+表达水平较A组显著上调,两组CD86^+表达水平较A组下降。ELISA检测结果显示,4组细胞培养上清液中IL-6(F=3.950,P<0.001)和TNF-α水平(F=205.827,P<0.001)差异均有统计学意义;C组及D组IL-6和TNF-_α水平均较A组显著下降(P均<0.05)。4组细胞培养上清液中IL-10(F=8.274,P<0.001)和7GF-β水平(F=13.559,P<0.01)差异均有统计学意义;C组IL-10、TGF-β水平较A组显著增加(P均<0.01);D组TGF-β水平较A组显著增加(P<0.05),但IL-10水平较A组无明显变化(P>0.05)。结论rTs-Cys体外能诱寻BMDMs向抗炎特性的M2方向极化,并抑制M1型巨噬细胞活化。     

AcCystatin减轻卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎病变和促炎细胞因子分泌

目的 观察广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(AcCystatin)对卵清蛋白(OVA)诱导的变应性鼻炎小鼠的影响.方法 将24只8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、OVA变应性鼻炎致敏组和AcCystatin治疗组.OVA组以OVA为变应原,氢氧化铝为佐剂进行腹腔注射,第15天后OVA滴鼻建立小鼠AR模型;A...