2型糖尿病并冠心病患者vWF水平变化及其与冠脉病变程度、临床相关因素的关系

目的观察2型糖尿病合并冠心病患者中血管性血友病因子（vWF）的变化及其与冠脉病变程度、临床相关因素的关系。方法2型糖尿病患者582例,其中合并冠心病患者414例（DM-CHD组）、不合并冠心病患者168例（DM．NCHD组）,另选择100例非糖尿病非冠心病患者作为对照组。空腹取血测定3组血浆vWF、TC、LDL-C、HDL-C、TG、尿酸（uA）、糖化血红蛋白（HbA,C）、空腹血糖（FBG）、载脂蛋白A1（ApoAl）、载脂蛋白B（ApoB）;计算胰岛素抵抗指数（IRI）。记录DM．CHD组患者冠脉病变情况及Gensini积分;同时根据ACC／AHA冠脉病变分型建议,将患者冠脉病变分为A、B、C型并比较分析。结果DM．CHD组血浆vwF水平高于DM-NCHD组和对照组,P均〈0．05。DM-CHD组血浆vWF水平与冠脉病变支数、Gensini积分呈正相关（r值分别为0．611、0．635,P均〈0．05）;冠脉C型病变患者血浆vwF水平高于B型病变和A型病变（P均〈0．05）,且B型病变高于A型病变血浆vwF水平（P〈0．05）。DM-CHD组血浆vWF与糖尿病病程、FBG、HbA,c、IRI呈正相关（r值分别为0．541、0．508、0．616、0．796,P〈0．05）,其中与IRI的相关性最高（标准化回归系数0．976,P=0．023）。结论2型糖尿病合并冠心病患者vWF水平升高,且与冠状动脉病变程度、冠脉病变支数呈正相关,与糖尿病病程、FBG、HbA,c、IRI密切相关。vWF在2型糖尿病合并冠心病的发生和发展中具有重要作用,监测血浆vWF水平有助于糖尿病合并冠心病的诊断、判断病情及指导治疗。     

共表达腺病毒载体构建鉴定及其转染骨髓间充质干细胞观察

目的：构建并鉴定绿色荧光蛋白标记的人骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein,BMP）2和血管内皮生长因子（vascular endotheliel growth factor,VEGF）165双基因共表达的重组腺病毒,为研究该双基因对骨髓间充质干细胞成骨方向诱导和体内骨缺损修复作用奠定基础。方法：从cDNA文库中PCR扩增BMP2和VEGF165目的基因,并将其插入腺病毒穿梭质粒pAd-MCMV-GFP的多克隆位点,将构建的重组穿梭质粒pAd-MCMV-BMP2-VEGF165和腺病毒辅助质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染细胞HEK293细胞内,经历腺病毒基因重组及出毒后收集细胞,多次冻融离心获取病毒溶液（Ad-BMP2-VEGF165）。进一步纯化并测定病毒滴度,随后通过转染兔骨髓间充质干细胞并检测BMP2和VEGF165双目的基因表达和倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。结果：基因测序、菌落PCR、Western blotting、Real-time PCR、绿色荧光蛋白表达均表明载体Ad-BMP2-VEGF165构建成功,可稳定转染骨髓间充质干细胞内并稳定表达,经测定腺病毒载体滴度达到1×10¹⁰ PFU/ml。结论：携带人BMP2和VEGF165双基因共表达重组腺病毒载体构建成功,并能获得高滴度的病毒感染液。     

Ⅲ度房室传导阻滞一家族调查及致病基因研究

目的:调查一家族的III度房室传导阻滞及其可能的致病基因。方法:对一家族性房室传导阻滞患者家族的所有成员进行病史采集、体格检查、心电图及超声心动图等检查,分析其临床特点,制作家系图谱,采用外显子组测序及突变分析寻找可能的致病基因。结果:此家系含有22名成员,其中有6例(27.3%)发病,均表现为40岁左右开始出现心动过缓,逐渐演变为II度房室传导阻滞、最终发展成为III度房室传导阻滞,这6例患者均已行永久性起搏器植入术,根据遗传家系图谱提示此家族患者可能为常染色体不完全显性遗传。与亚洲健康人群进行基因比对发现,此家族性房室传导阻滞患者中有24个差异基因。结论:该家族性房室传导阻滞系常染色体不完全显性遗传,可能由一个或多个基因突变引起。