CpG岛甲基化表型肺癌的分型标记及临床病理特征

目的 比较新的CpG岛甲基化表型(CIMP)筛选标记基因和经典CIMP筛选标记基因在CIMP肺癌筛选中的作用,并分析CIMP肺癌的临床病理特征.方法 取第二军医大学长海医院呼吸科50例肺癌患者的肺癌组织和癌旁组织,提取DNA,进行甲基化转换后,利用甲基化特异性PCR (MSP)对新的CIMP筛选标记基因(SHISA3、CTSL1、C1ORF103和TMEM200B)和经典的CIMP筛选标记基因(CACNA1G、IGF2、NEUROG1、RUNX3)的启动子CpG岛区域进行扩增,采用琼脂糖凝胶电泳分析其甲基化状态.运用SPSS统计软件对结果进行统计分析.结果 肺癌组织发生明显的甲基化,所研究的8个基因甲基化水平均明显高于癌旁组织(P=0.014).其中RUNX3甲基化与淋巴结转移及功能状态(PS)评分有关(P值分别为0.017、0.018).年龄＞60岁的肺癌患者甲基化率高于≤60岁者(P=0.031).吸烟对CTSL1基因甲基化的影响也很大(P=0.018).结论 CpG岛甲基化表型肺癌具有独特的临床病理特征;新的和经典的甲基化基因组合在CIMP肺癌筛选上都具有较高的灵敏度和特异性.     

基于γ干扰素释放试验的流式荧光免疫分析法检测结核分枝杆菌的方法学研究

目的 基于γ干扰素释放试验（IGRA）,利用流式荧光免疫分析法建立一种检测结核分枝杆菌（TB）感染的新方法。方法 分别用植物凝集素（PHA）、TB特异性混合多肽[早期分泌靶向抗原（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）]刺激全血标本产生γ干扰素（IFN-γ）,用双抗体夹心法结合流式荧光技术检测培养后血浆中的IFN-γ浓度,使用受试者工作特征（ROC）曲线评价其对TB感染的诊断效能。对该方法的线性范围、最低检测限、重复性、抗干扰性能及其与市售同类产品检测的一致性进行评价。结果 流式荧光免疫分析法检测IFN-γ的线性范围为2~1 000 pg/mL,最低检测限为0.3 pg/mL;检测100 pg/mL和500 pg/mL 2个浓度标本的重复性,2个浓度下变异系数分别为4.58%和2.46%;回收试验平均回收率为98.0%;三酰甘油≤ 50 mg/mL、胆红素≤ 0.6 mg/mL、血红蛋白≤ 10 mg/mL时对流式荧光免疫分析法检测结果无干扰。通过ROC曲线确定该方法诊断TB感染的最佳截断值为10 pg/mL,此时灵敏度为82.46%,特异度为87.30%。该方法与市售TB感染T淋巴细胞斑点试验（T-SPOT）试剂盒、QuantiFERON-TB Gold（QFT）试剂盒和万泰TB-IGRA试剂盒诊断TB感染的总符合率分别为92.5%、83.0%和85.4%,Kappa系数分别为0.822、0.622和0.630。结论 本研究建立的TB感染检测方法性能良好,准确性达到市售同类产品的水平,且在重复性、检测流程等方面具有明显优势。     

器官移植患者院内感染病原体分布及其药敏分析

目的 分析器官移植患者院内感染病原体的分布及耐药性,为器官移植患者院内感染的治疗提供依据。方法 收集2016年1月至2017年12月海军军医大学（第二军医大学）长海医院149例器官移植患者的临床样本。使用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪或Microflex基质辅助激光解析飞行时间质谱仪进行细菌鉴定。使用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪进行细菌药敏试验,使用ATB Fungus 3药敏试剂盒进行真菌药敏试验。结果 器官移植患者感染的病原体主要来源于冲洗液样本（42.3%,101/239）。149例患者中共分离出239株病原菌,其中革兰阴性菌135株（56.5%）、革兰阳性菌77株（32.2%）、真菌27株（11.3%）。革兰阴性菌中肺炎克雷伯菌的检出率最高（13.8%,33/239）,且其对哌拉西林等常见抗菌药物的耐药率普遍偏高（耐药率均>50.0%）,呈多重耐药趋势;大肠埃希菌对碳青霉烯类药物的敏感性高（耐药率均<5.0%）;鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的耐药率均高达81.0%。革兰阳性菌中肠球菌对青霉素、氨苄西林等常见抗菌药的耐药率为40.0%～77.2%,但未发现其对利奈唑胺及万古霉素耐药。真菌对常用抗真菌药物的敏感率均高于80.0%,其对伏立康唑的敏感性最高（96.3%）。结论 器官移植患者院内感染病原菌主要为革兰阴性菌,肺炎克雷伯菌为主要致病菌,且呈现多重耐药趋势。革兰阳性菌对利奈唑胺及万古霉素敏感。真菌对常用抗真菌药物的敏感性较好。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分布与耐药性分析

目的 了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）的分布特点及其耐药性,为指导临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 收集2014年1月至2017年12月临床分离的CRKP菌株,采用自动化仪器法和纸片扩散法（K-B法）对上述菌株进行药物敏感性试验,药物敏感性结果严格按照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）和美国食品药品管理局（FDA）标准判定。采用WHONET软件和SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。结果 共收集临床分离CRKP菌株403株,主要标本来源为痰/支气管肺泡灌洗液（169株,占41.9%）。CRKP首次分离标本来源不同,后续CRKP血流感染的发生率也不同,差异有统计学意义（P<0.05）。CRKP来源科室位列前3位的分别为烧伤重症监护病房（30.0%,121/403）、消化科（8.4%,34/403）和急诊重症监护病房（7.2%,29/403）。药物敏感性试验结果显示CRKP除对替加环素和磷霉素耐药率较低外,对其余抗生素的耐药率均>60.0%。结论 CRKP对多数常用抗生素呈现高度耐药。应加强对CRKP的耐药性监测,尤其是烧伤重症监护病房等重点科室,并采取有效措施预防和控制CRKP的传播。     

血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测对真菌血流感染的诊断价值

目的 探讨血浆（1-3）-β-D葡聚糖检测（G试验）对真菌血流感染的诊断价值。方法 收集海军军医大学（第二军医大学）长海医院2015年1月至2017年12月临床各科室送检的进行真菌血培养和G试验的血液标本。分析264例真菌血培养阳性标本的来源科室分布和菌种分布情况。1 678例同时进行真菌血培养和G试验,以真菌血培养阳性为标准,G试验结果>100.5 pg/mL为阳性,计算G试验诊断真菌血流感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值;采用SPSS 19.0软件进行统计学分析,以受试者工作特征（ROC）曲线评估G试验对真菌血流感染的诊断价值。结果 2015-2017年共检出血培养阳性真菌264株,主要分布在肝胆外科（81株）、心血管外科（57株）、急救科（24株）、胸外科（22株）、血液科（16株）等科室;病原菌以假丝酵母菌属为主,其中近平滑假丝酵母菌最多（142株,占53.8%）,其次为角膜假丝酵母菌（36株,13.6%）、白假丝酵母菌（20株,7.6%）和热带假丝酵母菌（18株,6.8%）。1 678例同时进行真菌血培养和G试验的患者中,137例真菌血培养结果为阳性。以真菌血培养阳性为标准,G试验诊断真菌血流感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为61.3%、87.9%、31.1%、96.2%;ROC曲线分析结果显示,G试验对真菌血流感染的诊断效能较好（曲线下面积为0.771,95%置信区间为0.723~0.819）。137例真菌血流感染病例中,102例在血培养之前2~5 d进行了G试验,其中71例（69.6%）G试验结果为阳性。结论 血浆G试验诊断真菌血流感染的特异度较高,对真菌血流感染的早期诊断具有较好的阴性预测价值。     

烧伤患者院内感染病原菌分布及耐药性分析

目的 分析烧伤患者院内感染病原菌的分布及耐药性,为烧伤患者院内病原菌感染的治疗提供依据。方法 收集2015年1月至2017年12月海军军医大学（第二军医大学）长海医院534例烧伤患者的各类临床标本,分离培养病原菌。使用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪或Microflex基质辅助激光解析飞行时间质谱仪进行细菌鉴定,使用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪进行细菌药物敏感性试验。结果 共分离出1 219株病原菌。其中革兰阴性菌877株（71.9%）,位列前4位的菌株分别为肺炎克雷伯菌（203株,16.7%）、铜绿假单胞菌（183株,15.0%）、鲍曼不动杆菌（176株,14.4%）和大肠埃希菌（101株,8.3%）;革兰阳性菌342株（28.1%）,位列前3位的菌株分别为金黄色葡萄球菌（136株,11.2%）、屎肠球菌（72株,5.9%）和粪肠球菌（60株,4.9%）。病原菌主要来源于创面分泌物（577株,47.3%）、痰/支气管肺泡灌洗液（341株,28.0%）和尿液（147株,12.1%）,93.5%（319/341）的痰/支气管肺泡灌洗液病原菌为革兰阴性菌。534例患者中有311例（58.2%）患者分离出2株及以上细菌。革兰阴性菌中肺炎克雷伯菌对常见抗菌药物的耐药率普遍偏高,呈现多重耐药趋势;铜绿假单胞菌耐药情况不容忽视,对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率最高为35.5%;鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的耐药率最高达93.2%,对其他大部分抗菌药物耐药率>80.0%。革兰阳性菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为69.1%（94/136）,肠球菌属对常见抗菌药物的耐药率为38.9%~66.3%,但尚未发现对万古霉素、替加环素和利奈唑胺耐药的革兰阳性菌。结论 烧伤患者院内感染病原菌分布较为复杂,超过一半的患者呈多重细菌感染。最常见的致病菌为肺炎克雷伯菌,呈现多重耐药趋势。革兰阳性菌对万古霉素、替加环素和利奈唑胺敏感。     

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的临床分布及耐药性分析

目的 了解耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的流行状况及耐药特征,为指导临床合理用药及感控部门对多重耐药菌防控提供依据.方法 收集2015年1月至2019年12月临床分离的CRE菌株,采用仪器法(MIC法)和纸片扩散法(K?B法)对上述菌株进行药敏试验,按美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准对结果进行判定.采用WH...     

VITEK 2 Compact检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星药敏结果的准确性评价

目的 评价VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统(简称VITEK 2 Compact)及与之配套的AST-GN13卡检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星药物敏感性结果的准确性。方法 分别采用VITEK 2 Compact,纸片扩散法(K-B法)和E-test法检测临床分离的147株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的敏感性。结果 147株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的药敏检测中,K-B法和E-test法的结果完全一致。其中,5株VITEK 2 Compact,K-B法和E-test法三种检测方法结果一致,4株均为敏感,1株均为耐药; 142株VITEK 2 Compact和E-test法结果不一致,VITEK 2 Compact结果敏感或中介,而E-test法和K-B法结果耐药。结论 VITEK 2 Compact在检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的敏感性时会出现不准确的结果,临床工作中需要用K-B法或者其他方法验证后方能报告耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的药敏结果。