不射精症寻因求治

不射精症寻因求治上海市第二医科大学教授朱继业不射精是指性交能力正常，但达不到情欲高潮与快感，不能在阴道内射精，因而不能使女方受孕。故不射精症为男子不育症的原因之一。不射精的原因大多数是功能性的，器质性疾病的较少见。功能性不射精症又有原发性与继发性两种...     

Expressions of α_1 adrenoceptor subtypes mRNA in hepatic tissues of cirrhotic patients with portal hypertension

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重组腺病毒Ad-PD-L1转染供体小鼠树突状细胞对受体小鼠淋巴细胞激活的影响

目的:观察重组腺病毒载体Ad-PD-L1转染供体C57BL/6(H-2b)小鼠树突状细胞(DC)对受体DBA/2(H-2d)小鼠淋巴细胞增殖和激活的影响.方法:构建腺病毒穿梭质粒pShuttle-GFPCMV(-)-PD-L1和腺病毒骨架质粒pAdxsi-GFP-CMV-PD-L1,重组腺病毒Ad-PD-L1进行包装、扩增和纯化.分离培养供体C57BL/6小鼠的DC,分为3组:腺病毒载体Ad-PD-L1转染组(A组),空载体转染组(B组)和对照组(C组).Western blot检测转染后各组细胞PD-L1的表达.分离受体DBA/2小鼠的淋巴细胞,用羧基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记,将供体C57BL/6小鼠的DC和受体DBA/2小鼠淋巴细胞混合培养,流式细胞仪观察淋巴细胞的增殖情况.结果:酶切及测序证实含PD-L1的重组腺病毒载体Ad-PD-L1构建成功.转染供体C57BL/6小鼠的DC后其PD-L1的表达升高37% (P<0.05),将转染了PD-L1的DC与受体DBA/2小鼠的淋巴细胞进行共培养.与对照组相比,PD-L1表达升高后,明显地抑制了淋巴细胞的增殖和活化.受体DBA/2小鼠的淋巴细胞增殖降低41% (P<0.01).结论:转染供体C57BL/6小鼠DC后通过共刺激通路PD-1/PD-L1抑制了受体DBA/2小鼠淋巴细胞的增殖和激活.     

大鼠库普弗细胞分离培养方法的改良

目的建立一种稳定、高效的大鼠库普弗细胞(KCs)分离培养方法。方法采用大鼠肝脏离体链酶蛋白酶E消化和胶原酶循环灌注消化。低速离心去除肝细胞,Histodenz不连续密度梯度离心和选择性贴壁的方法分离KCs。采用ED2 CD163、兔抗大鼠溶酶体膜相关蛋白2(LAMP2)免疫细胞化学．latex-beads吞噬实验和电镜观察来鉴定 KCs。结果KCs得率为5×107个,活率为98％,经鉴定ED2阳性细胞大于98％,LAMP2阳性细胞大于99％,吞噬试验及电镜观察证明分离所得为KCs。结论改良的分离培养方法稳定、高效,为进一步的研究打下了基础。     

保脾断流术治疗门静脉高压症

食管胃底静脉曲张破裂出血是门静脉高压症患者死亡的主要原因之一,其治疗手段已经从早期外科手术一枝独秀,变成现在内镜治疗、介入治疗和手术治疗百家争鸣。由于肝移植供肝短缺,断流术在今后相当长的一段时间内依然是我国治疗门静脉高压症的主要手段之一。北京大学人民医院肝胆外科结合自身经验对传统断流手术进行改进,提出保脾断流术。该技术具有术中出血量少,手术时间短,术后并发症发生率低等优势,取得了较好的近期和远期止血效果。     

神经内分泌肿瘤肝转移患者的射频消融治疗

神经内分泌肿瘤（neuroendocrine tumor,NET）患者发生肝转移较为常见,大多数患者确诊时已不宜行肝切除。射频消融（radiofrequency ablation,RFA）广泛地应用于NET肝转移患者的治疗。RFA应用灵活,创伤相对较小,对于控制患者神经内分泌症状,减缓肿瘤进展、延长患者生存时间都有着不...     

应用羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺脂探讨新型免疫抑制剂J2作用机制

目的探讨基于CIM立体构型设计的新型免疫抑制剂（J2）在小鼠体内的免疫抑制作用以及其作用机制。方法将羧基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记的C57BL／6（H-2b）小鼠的淋巴细胞4×10^6～6×10^6经尾静脉注入经印钴照射（900拉德）后的DBA／2（H-2d）小鼠体内构建模型。将DBA／2小鼠随机分为5组，每组5只，模型建立后即刻腹腔注射J2，每天1次。对照组注射生理盐水、CsA组注射环孢素A（10mg／kg体重）；实验组J2A组（1mg／kg体重）、J2B组（4mg／kg体重）、J2C组（8mg／kg体重）。给药3d后分组处死DBA／2小鼠取脾制备淋巴细胞，用CD3、CD4、CD8单抗分别标记受检T细胞，FACS流式细胞仪检测CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞在小鼠体内分裂增殖的情况，并检测CD4^＋T细胞的凋亡情况。结果CFSE标记C57BL/6小鼠的脾淋巴细胞着染率大于99％。对照组分裂的CD4^＋T细胞（75．34±1．58）％、分裂的CD8^＋T细胞（83．48±1．25）％明显多于CsA组和实验组（P〈0．01）。J2B组和J2C组分裂的细胞数分别与CsA组比较差异无统计学意义（P〉0．05），但J2A组多于CsA组（P〈0．05）。对照组CD4^＋T细胞早期凋亡的比例（41．1±3．4）％明显高于其他各组（P〈0．01）。J2A组（35．6±4．1）％、J2B组（24．0±3．7）％和J2C组（13．6±2．3）％CD4^＋T细胞早期凋亡的比例显著高于CsA组（7．4±1．9）％（P〈0．05）。结论J2可能抑制T细胞亚群CD4^＋T细胞的活化，从而进一步抑制CD8^＋T细胞的分裂增殖而具有免疫抑制作用。     

卫生部《原发性肝癌诊疗规范(2011年版)》解读

原发性肝癌是严重危害人类生命健康的重大疾病之一.据2008年最新统计,每年全球新患肝癌人数为74.8万人,因肝癌死亡者高达69.6万人,位居全球男性和女性恶性肿瘤发病率的第5位和第7位,而死亡原因高居第2位和第6位[1].全球新发肝癌病例中有50％发生在中国[2],我国的肝癌诊疗形势十分严峻.根据卫生部统计,我国肝癌死亡率在各种癌症死亡率中居第2位.国际上有多个治疗原发性肝癌的指南,例如,美国国立综合癌症网络( National Comprehensive Cancer Network,NCCN)、美国肝病学会(American Association for the Study of Liver Diseases,AASLD)、巴塞罗那肝癌小组(Barcelona-Clinic Liver Cancer Group,BCLC)、亚太肝病学会(Asian Pacific Association for the Study of the Liver,APASL)、日本肝病学会(Japan Society of Hepatology,JSH)制定的治疗指南等,但由于中国肝癌患者的特殊性,这些指南没有一个能被我国医生完全接受[3].     

活体肝移植供体手术及术后管理（附22例临床分析）

目的 探讨提高活体肝移植供体手术安全性和加强术后管理的措施。方法 回顾性分析北京大学人民医院2003年2月至2009年6月22例活体肝移植供体的临床资料,总结供体术前评估、手术技术、术后并发症及随访情况。结果 术前对供体进行三步法评估,术中采用超吸刀 （CUSA）进行肝脏实质分离,术后定期随访。供肝移植物包括肝左外叶2例、左半肝6例、扩大左半肝1例、右半肝5例和扩大右半肝8例。1例在术后早期出现腹腔内出血,1例合并胸水,1例枕后皮下血肿,其他供体未出现严重并发症,术后肝功能迅速恢复正常,随访至今无供体死亡。结论 活体肝移植供体手术复杂,严格术前评估,术中精细操作,术后加强随访是提高活体肝移植供体安全的重要保证。