复方牛胎肝提取物抑制小鼠转化生长因子β1/Smad2信号通路发挥抗纤维化的作用机制

目的研究复方牛胎肝提取物通过抑制肝纤维化小鼠肝脏组织转化生长因子β1/Smad 2通路发挥抗纤维化作用的机制。方法健康雄性ICR小鼠90只,随机分为正常对照组(10只),模型组(20只),治疗组(60只)。治疗组按不同剂量分为大剂量治疗组(20只),中剂量治疗组(20只),小剂量治疗组(20只)。模型组及治疗组皮下注射30%四氯化碳溶液制备肝纤维化小鼠模型。治疗组造模8周后用复方牛胎肝提取物以大、中、小剂量灌胃治疗,1次/d,持续4周;正常组及模型组同期予等量生理盐水灌胃。肝脏组织经HE染色后光学显微镜观察病理变化;采用Real-Time PCR、免疫组织化学及Western蛋白印迹法分别检测正常组、模型组及治疗组TGFβ1、蠕虫果蝇母抗同源蛋白(Smad)2的mRNA及蛋白表达水平。各组间均数比较采用单因素方差分析。方差齐性采用Levene法检验,样本均数比较采用单因素方差分析;方差不齐时采用秩和检验。相关性检验采用Pearson直线相关分析。结果正常对照组TGFβ1、Smad 2 mRNA及蛋白表达量很低,模型组较高,治疗组较模型组表达下降,大剂量治疗组下降最为显著,其他2组随治疗剂量的减少表达逐渐增加;各组TGFβ1、Smad 2 mRNA表达水平差异具有统计学意义(χ2=27.877、26.688,P0.05)。直线相关性分析显示:各治疗组TGFβ1、Smad 2的mRNA表达水平与治疗剂量均呈负相关(r=-0.967、-0.956,P0.05)。结论复方牛胎肝提取物能改善小鼠肝脏纤维化程度,并呈剂量依赖性抑制TGFβ1、Smad 2蛋白在肝纤维化组织中的表达,这可能与其抗肝纤维化机制相关。