小鼠缺血性脑卒中后病灶部位CD45+ CD11b-免疫细胞种类以及基因表达谱分析

目的 探讨小鼠缺血性脑卒中发生后不同时间点病灶部位CD45⁺ CD11b^-免疫细胞浸润情况以及基因表达的动态变化。方法 将60只6～8周龄成年雄性C57鼠采用随机数字表法分为6组：假手术组(Sham组)和缺血性脑卒中后第1天(D1L组)、第3天组(D3L组)、第7天组(D7L组)、第14天组(D14L组)和第21天组(D21L组)。Sham组小鼠给予缺血性脑卒中处理但不进行大脑中动脉结扎,缺血性脑卒中各组小鼠给予缺血性脑卒中手术处理。按上述时间点取病灶组织消化后,流式细胞术分选CD45⁺ CD11b^-免疫细胞,然后应用RNA-seq技术,对小鼠不同时间点分选的CD45⁺ CD11b^-免疫细胞进行基因表达谱测序、生物信息学分析以及细胞种类验证。结果 在缺血性脑卒中发生后,γδ T淋巴细胞和天然杀伤性T淋巴细胞的数目逐渐上升,在D3达到高峰,然后逐渐下降趋于稳定;CD4 T淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞数目逐渐上升,在D14达到高峰;调节性T淋巴细胞数目在D14...     

小鼠缺血性脑卒中后磷脂酶D1在自噬和神经损伤中的作用

目的探讨在小鼠缺血性脑卒中模型中,磷脂酶D1(PLD1)在自噬和神经损伤中的作用。方法将6只6~8周龄成年雄性C57鼠采用随机数字表法分为两组,sham组和stroke组,每组各3只。sham组小鼠给予缺血性脑卒中处理但不进行大脑中动脉结扎,stroke组小鼠给予缺血性脑卒中处理。观察两组小鼠脑神经元内PLD1的变化。然后构建条件性基因敲除小鼠,将小鼠采用随机数字表法分为3组:sham PLD1~(fl/fl)组12只,缺血性脑卒中后PLD1~(fl/fl)组(stroke PLD1~(fl/fl)组) 12只,缺血性脑卒中后PLD1-KO组(stroke PLD1-KO组) 12只,然后利用免疫荧光染色、Western blotting、TTC染色法观察sham PLD1~(fl/fl)组小鼠,缺血性脑卒中后PLD1~(fl/fl)小鼠和缺血性脑卒中后PLD1-KO小鼠神经元自噬(LC3-Ⅱ)的情况及自噬对梗死面积的影响,明确PLD1的作用机制。结果在缺血性脑卒中后24 h,缺血半暗带的神经元中,stroke组较sham组PLD1表达明显增多。在条件性敲除小鼠中,stroke PLD1~(fl/fl)组较sham PLD1~(fl/fl)组自噬重要标志物LC3-Ⅱ明显升高(P 0. 05),而条件性敲除神经元内PLD1后,stroke PLD1-KO组较stroke PLD1~(fl/fl)组LC3-Ⅱ明显降低(P 0. 05),同时,梗死面积也明显缩小(P 0. 000 1)。结论缺血性脑卒中后神经元内PLD1表达升高,LC3-Ⅱ增多,抑制PLD1引起的过度自噬可以有效改善缺血性脑卒中后的神经损伤。     

肠道菌群与卒中

近年来提出的"肠-脑轴"理论指出,肠道菌群与中枢神经系统疾病之间存在相互影响.大量研究表明,肠道菌群与抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默病之间均存在联系.肠道菌群与卒中的联系亦受到关注.文章对肠道菌群与卒中的关系进行了综述.