中国人群HLA－DR_4等位基因结构及其与类风湿关节炎相关性研究

中国人群ＨＬＡ－ＤＲ_４等位基因结构及其与类风湿关节炎相关性研究朱乃硕，等。中华医学杂志１９９４，７４（７）：４２８对１３０名正常人及９５例类风湿关节炎（ＲＡ）病人ＨＬＡ－ＤＲ４基因分析结果显示，该基因与ＲＡ易感性显著相关（Ｐ＜０．００５），中国人群?..     

A histomorphometric and molecular study on stress adaptability of freeze-dried bone allograft

Objective To Investigate stress adaptability of freeze-dried bone allograft.Methods Cortical and cancellous allograft were transplanted to each side of the midshaft diaphyseal ulna in two groups of 28 animals. The left transplanted allograft w as free from fixation and bore a normal physiological load, while the right tran splanted allograft was protected from loading by a simple external fixator and b ore less load. Animals were sacrificed at the 2nd, 4th, 8th, 16th week after tr ansplantation and specimens were taken out for bone histomorphometry studies an d analysis of collagen gene expression by in situ cDNA-mRNA hybridization.Results Labeled surface(LS) and bone mineral apposition rate(MAR) of the normally loaded graft-host bone interface were significantly higher than that of the less load ed side at the 4th,8th,16th week after transplantation. Parameters reflecting t he internal repair process of the allograft, such as LS in cortical and cancello us bone or MAR in cortical bone of the normally loaded side were significantly h igher than those of the less loaded side at the 16th week after transplantation . The result of in situ hybridization indicated that more osteoblast-like cell s expressing the type Ⅰ collagen gene were found in the interface or interior o f normally loaded grafts. Conclusion The stimulus of physiologic load can accelerate the early union of allograft-ho st bone interface and later new bone creep substitution to the necrotic allograft.     

信号肽序列修饰的单纯疱疹病毒-2多表位复合DNA疫苗构建

目的:构建经糖蛋白gD信号肽修饰的单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白gD、gB、gC和早期表达蛋白ICP 27的多表位复合DNA疫苗.方法:国内HSV-2野生株经测序与PCR鉴定后利用PCR技术从其基因组中扩增出HSV-2 ICP27 377-459、gD146-179、gD223-306、gB529-606、gC247-282、gD1-77 6个基因片段,PCR鉴定后按先后顺序,采用多基因片段一步酶切连接法获得HV融合基因片段,经pGEMT载体克隆后定向插入真核表达质粒pcDNA3.1载体中,构建出重组真核表达质粒HV-pcDNA3.1,并对其进行酶切分析及测序鉴定.PCR扩增gD146-179信号肽片段,进一步酶切连接构建重组质粒gDs-HV-his-pcDNA3.1,并对其进行测序鉴定.结果:酶切重组质粒HV-pcDNA3.1,电泳可见两条带,分别为融合基因HV(1.3 kb)和线性质粒pcDNA3.1(5.4 kb).测序结果表明,克隆基因插入方向正确,重组质粒gDs-HV-his-pcDNA3.1与GenBank HSV-2中相关序列同源性达99.9%.结论:成功构建了经糖蛋白gD信号肽修饰的HSV-2多表位复合DNA疫苗.     

原发性肝癌患者血液中XAGE-1b mRNA的表达

XAGE-1是一类通过生物信息学的方法获得的肿瘤一睾丸抗原编码基因,XAGE-1b是其主要的表达剪接体[1].临床研究已获得了较为详细的XAGE-1在肿瘤细胞中的表达谱,发现在肺癌、黑色素瘤、前列腺癌等肿瘤组织中有较高的XAGE-1检出率,并且逐步揭示出:XAGE-1的表达与病理进程和肿瘤亚型间的关联[2-5].     

中国人共刺激信号抑制配体表达载体的构建及在大肠杆菌DH5α中的表达

构建CTLA－4基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中表达CTLA－4蛋白。方法：用PCR方法获得中国人CTLA－4基因第二外显子，构建重组表达质粒pPBCTLA，转化大肠杆菌DH5α，以PCR和RFLP方法筛选阳性克隆，以免疫印迹技术检测表达产物。结果：阳性重组子在DH5α中经温度诱导表达CTLA－4蛋白，分子量与理论值相符（约12kD)，进一步分析表明，CTLA－4蛋白主要以包涵体形式存在。Western-blot结果证实，12k的表达条带可与标准羊抗人CTLA－4ITgG起特异反应。淋巴细胞转化实验结果表明该蛋白具有明显的免疫抑制作用。结论：用基因工程技术获得中国人CTLA－4基因表达蛋白，为进一步研究CTLA－4的生物学功能及研制CTLA－4抗体奠定了基础。     

同种异体反应性淋巴细胞克隆疫苗回输诱导受体特异性免疫耐受的研究

目的：探讨同种异体移植抗原抗原特异性免疫耐受诱导的新途径，以达到心肺移植长期存活的目的。方法：以同种异体反应性淋巴细胞克隆在体外培养条件下大量增殖后，作为自身独特性疫苗，体内注射免疫家兔，以混合淋巴细胞反应来观察免疫前和免疫后对供体淋巴细胞刺激指数（SI）的变化。结果：同种异体反应性自身独特型淋巴细胞疫苗具有显著诱导特异性免疫应答移植现象，SI值显著降低（P＜0．05），而对卡介苗诱导的特异性免疫应答并未因独特型淋巴细胞疫苗的应用而下降，结论：同种异体反应性自身独特型淋巴细胞疫苗有可能成为诱导抗原特异性免疫耐受的一种手段。     

中国人群中一个新的HLA-DRB4等位基因(DRB4·NC)的发现及比较分析

目的 :对人群进行HLA DRB的分型及多态性研究 ,发现未曾报道过的HLA DRB等位基因。方法 :用HLA DRB通用引物扩增该个体所有DRB等位基因的第二外显子 ,并对扩增产物进行克隆 ,通过双脱氧法进行DNA测序。结果 :发现一个新的HLA DRB核苷酸序列。结论 :通过与已发表的序列及Genbank已收载的序列比较 ,显示该序列属于HLA DRB4家族的新等位基因 ,我们暂时称它为DRB4 NC。该序列已被Genbank收载 (登录号为AF2 0 75 48)。