IL-18基因转导乳腺癌细胞肿瘤原性的改变及抗瘤作用的研究

目的：建立转人白细胞介素-18（IL-18）基因的乳腺癌细胞株Bcap37细胞,并探讨IL-18基因转导后Bcap37细胞肿瘤原性的改变和抗瘤作用。方法：将携带人IL-18的质粒pcDNA3.1-IL-18转导入人乳腺癌细胞系Bcap37细胞中,通过药物G418进行筛选,采用RT-PCR和ELISA法对IL-18基因的表达进行检测;裸鼠致瘤实验观察肿瘤原性的改变;观察灭活后Bcap37-IL-18细胞的抗瘤作用。结果：IL-18基因成功转导入Bcap37细胞中并能顺利表达;RT-PCR 电泳结果显示IL-18基因在mRNA水平有表达;ELISA结果显示,106个转导细胞在24h内分泌IL-18的含量是(126.3±4.5)pg; 空载体转染的细胞未检测到IL-18;裸鼠致瘤实验表明,接种Bcap37-IL-18细胞的裸鼠肿瘤的生长速度明显低于Bcap37组和Bcap37-pCDNA3.1组;抗瘤实验结果显示,放射灭活的Bcap37-pcDNA3.1细胞和Bcap37-IL-18细胞免疫接种裸鼠后,再接种Bcap37细胞于裸鼠左侧背部皮下。肿瘤长出的时间Bcap37-IL-18细胞免疫接种组比Bcap37 pCDNA3.1细胞免疫接种组明显延长,且肿瘤的体积Bcap37-IL-18细胞免疫接种组比Bcap37-pCDNA3.1细胞免疫接种组小。结论: IL-18基因能成功的整合到Bcap37细胞基因组中,且在转导的肿瘤细胞中持续表达;IL-18基因转染降低了Bcap37细胞的肿瘤原性;IL-18基因修饰的Bcap37细胞具有明显的抗肿瘤作用。     

hIL-18基因转导人肺癌细胞及其肿瘤原性的研究

目的建立人白细胞介素-18(h IL-18)基因转导的肺癌细胞株,并研究其肿瘤原性。方法将携带h IL-18的质粒pcDNA 3.1-h IL-18转导入人肺癌细胞系PG细胞中,G-418进行筛选,采用RT-PCR和EL ISA法检测转导的PG细胞h IL-18的表达水平;将转导的PG细胞接种于裸鼠背部皮下,观察成瘤情况。结果h IL-18基因成功转入PG细胞中并顺利表达;h IL-18基因在mRNA水平有表达;106个转导细胞在24 h内分泌h IL-18的水平为(186.3±15.7)pg;空载体转染细胞未检测到h IL-18;裸鼠接种h IL-18基因转导的肿瘤细胞后无肿瘤长出。结论h IL-18基因转导的PG细胞肿瘤原性下降,可作为治疗肺癌的肿瘤疫苗。     

BCAP37-hIL-18基因疫苗抗乳腺癌作用研究

目的 为乳腺癌基因工程疫苗的临床应用奠定基础。方法 采用MTT法检测经高能X线照射灭活BCAP37-hIL-18基因疫苗（下简称基因疫苗）的生存曲线，以及其刺激T细胞增殖的能力。结果 经过高能X线照射后，BCAP37-hIL-18细胞生长停滞。基因疫苗作用T细胞的反应值及刺激率提高，荷瘤小鼠的肿瘤缩小，生存时间延长，生存率提高。结论 BCAP37-hIL-18疫苗具有明显抗肿瘤作用；本研究为乳腺癌基因工程肿瘤疫苗的研制及临床应用提供了实验基础。     

白细胞介素-18基因修饰大肠癌细胞肿瘤疫苗的制备及抗肿瘤作用研究

目的：制备人白细胞介素-18（hIL-18）基因的修饰的大肠癌基因工程肿瘤疫苗,观察其抗肿瘤作用。方法：应用MTT法观察X线照射后对SW480细胞生长的影响,治疗15d后,采用ELISA法检测实验鼠血清IFN—γ、IL-2、IL-12、IL-4、IL-10;将SW480细胞和SW480-IL-18细胞应用放射线灭活后接种于裸鼠左侧背部皮下,再接种SW480细胞于裸鼠右侧背部皮下,观察灭活后SW480-IL-18细胞的抗瘤效应。结果：经过高能X线照射后,SW480-IL-18细胞生长停滞,96h细胞全部死亡。未照射的106个SW48-1L-18细胞在24h内分泌IL-18的含量是182．7PG;照射组可是60．39pg。空载体转染的SW480细胞和未转染的SW480细胞上清液中未检测到IL-18。SW480-IL-18组较SW480组和pcDNA3．1／SW480组,能明显刺激T细胞增殖（P=0．01）;而SW480组和pcDNA3．1／SW480组,对T细胞的刺激作用微（P=-0．27）。灭活SW480-IL-18细胞能有效地激活裸小鼠体内NK细胞活性。SW480-IL-18细胞治疗后,治疗组较其他对照组肿瘤生长明显受到抑制（P〈0．05）。治疗组小鼠存活期显著延长,有33．4％小鼠长期存活,高于对照组。结论：IL-18基因修饰的SW480细胞具有明显的抗肿瘤作用,为大肠癌基因工程肿瘤疫苗的研制提供了实验基础。