天然属性抗氧化型低密度脂蛋白IgM亚类抗体对动脉粥样硬化形成的机制探讨

目的探讨天然属性抗氧化低密度脂蛋白(oxLDL)IgM亚类抗体在动脉粥样硬化中的作用。方法选取部分小鼠巨噬细胞分为LDL组、铜(Cu)oxLDL组与对照组,LDL组、CuoxLDL组分别预先与LDL、冰CuoxLDL孵育,然后与对照组进行黏附实验。3A6,5G8和2H7分别与~(125)I-CuoxLDL混合,另取部分巨噬细胞分为3A6组,5G8组和2H7组,分别加入上述处理的~(125)I-CuoxLDL进行黏附实验。采用油红O染色以及细胞内脂质分析泡沫细胞。结果 CuoxLDL组结合~(125)I-CuoxLDL水平明显低于对照组和LDL组(P0.01)。5G8组和2H7组结合~(125)I-CuoxLDL水平与对照组无显著差异(P0.05),而3A6组结合~(125)I-CuoxLDL水平明显低于对照组、5G8组和2H7组,差异有统计学意义(P0.01)。油红O染色结果显示,未活化的巨噬细胞未见油滴,3A6组有少量油滴,而对照组油滴明显增加。与对照组相比,3A6组胞内胆固醇酯水平明显降低了45%,且TG水平明显降低170%(P0.01)。结论抗体3A6能够有效阻断未活化巨噬细胞与ox-LDL相结合,抑制动脉粥样硬化的发生发展。     

Perilipin 5在肝细胞癌中的表达及对HepG2细胞脂质代谢和生物学行为的影响

目的:探讨脂滴包被蛋白5(perilipin 5,Plin5)在肝细胞癌中的表达变化,以及对肝癌细胞HepG2脂质含量、氧化应激和生物学行为的影响。方法:采用免疫组化染色和RT-qPCR分析人肝细胞癌组织中Plin5的表达。通过腺病毒感染,在HepG2细胞中过表达Plin5,检测其对肝癌细胞活力、迁移和侵袭能力的影响。利用BODIPY 493/503染色和脂质定量分析确定Plin5对HepG2细胞脂质含量的影响,并利用试剂盒检测过表达Plin5的HepG2细胞中脂质过氧化和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与正常肝组织比较,人肝细胞癌组织中Plin5的表达明显降低(P 0. 05)。过表达Plin5能够抑制HepG2细胞的活力,降低HepG2细胞的体外迁移和侵袭能力(P 0. 01)。进一步研究发现,过表达Plin5能够促进HepG2细胞中的脂质蓄积,并降低氧化应激水平。结论:肝细胞癌中Plin5呈低表达。Plin5能够促进肝癌细胞中脂质蓄积,降低氧化应激水平,从而抑制肝癌细胞的迁移和生长。     

阿托伐他汀抑制Perilipin5表达降低肝脏脂质储积的病理学分析

目的探讨阿托伐他汀(atorvastatin,ATR)对肝脏脂质代谢的影响及脂滴蛋白Perilipin5(Plin5)在其中的关键机制。方法采用高脂喂养野生型和Plin5敲除小鼠,利用生理盐水和每天ATR 20 mg/kg灌胃小鼠10天。取小鼠肝脏组织HE染色和油红O染色观察肝脏组织结构和脂质变化,并进行脂质定量分析。实时定量PCR和Western blot法检测肝脏组织脂滴相关蛋白表达水平。分离培养野生型小鼠原代肝细胞,使用Plin5过表达的腺病毒进行感染,Bodipy 493/503染色观察脂滴形态和数量,定量试剂盒测定原代肝细胞各脂质含量,Western blot分析脂质合成相关蛋白的表达水平。结果高脂喂养小鼠肝脏脂质储积明显增加,且ATR可以显著降低肝脏脂滴数量和大小,下调肝脏甘油三酯含量和胆固醇含量。同时,ATR能够下调脂滴蛋白Plin5的mRNA和蛋白水平。但是,ATR对Plin5缺失小鼠肝脏的脂肪含量无明显影响。原代肝细胞中过表达Plin5可显著增加肝细胞中脂滴数量和大小,提高肝细胞中甘油三酯含量。Plin5过表达增加乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase 1,ACC1)和脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)等脂质合成相关酶的表达。结论 ATR能够降低肝细胞Plin5表达,抑制脂质合成,减少肝脏脂质储积。     

阿托伐他汀钙对非酒精性脂肪肝脂质储积的影响

目的探讨阿托伐他汀钙对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的肝脏脂质储积的影响。方法利用不同程度的高脂饮食建立正常体重和超重的小鼠NAFLD模型,阿托伐他汀每天20 mg/kg灌胃10天,HE染色观察肝脏组织学形态,脂质定量试剂盒检测肝脏脂质含量,血生化检测小鼠肝脏功能变化。收集临床数据,回顾性分析101例NAFLD患者,按体重指数分为正常体重(18.5≤BMI24,n=48)和超重组(BMI≥24,n=53),分别检测阿托伐他汀钙治疗前后患者肝功能、血浆脂肪指标,并通过肝脏常规超声检查评估脂肪肝严重程度的变化。结果 35%高脂饮食的小鼠体重和正常饮食的小鼠体重相比,差异无显著性;58%高脂饮食小鼠体重较正常饮食小鼠体重显著增加。阿托伐他汀每天20 mg/kg灌胃10天后,HE染色显示58%高脂饮食小鼠脂肪肝程度较35%高脂饮食小鼠减轻更为显著。肝脏脂肪含量检测显示35%高脂饮食小鼠及58%高脂饮食小鼠肝脏总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)含量均较前下降,且58%高脂饮食小鼠比35%高脂饮食小鼠下降更为明显。临床治疗数据分析显示,患者每天服用20 mg阿托伐他汀钙治疗6个月后,正常体重组和超重组患者血浆TC、TG均较治疗前有不同程度的下降,且超重组血中TC和TG下降较正常组更为明显。肝脏常规超声结果也显示阿托伐他汀钙能够明显降低患者肝脂肪变程度,且超重组患者受益更为明显。结论阿托伐他汀钙可用于NAFLD的治疗,且对超重患者脂肪肝的改善效果更为明显。