肝素涂层体外循环管道抗凝血性能的研究

目的 评测3种离子键肝素涂层体外循环管道的抗凝血性能和稳定性。方法 用PT和APTT对不同浓度肝素—氯烃基二甲基代苯甲胺(HBC)复合物涂层体外循环管道的凝血性能进行评测，同时测试体外转流对3种肝素涂层管道抗凝血性能的影响。结果 3种肝素涂层方法均能够将肝素分子结合于材料表面并具有抗凝活性，其中HBC复合物和肝素—聚乙烯亚胺复合物处理的体外循环管道经体外转流96h后仍具有较佳的抗凝血活性。结论 离子键肝素涂层因结合物质不同其稳定性也不同；HBC复合物和肝素—聚乙烯亚胺复合物处理的体外循环管道肝素分子结合较牢固，能够满足临床短期使用需要。     

兔体外循环对胃泌素及其受体的影响

目的　研究体外循环 (CPB)过程中胃泌素及胃泌素受体的释放对胃液 p H值的影响 .方法　采用兔 CPB模型 ,分别测定 CPB过程中胃液的 p H值 ,胃液及血清中胃泌素质量浓度 ,并通过原位杂交的方法检测胃泌素受体 m RNA在胃肠道粘膜中的表达 .结果　 CPB过程中胃液的 p H值 (2 .2 1±0 .2 2 )与血液的 p H值 (7.40± 0 .15 )呈明显相关性 (P<0 .0 1) ,而且胃液的 p H值随 CPB时间增加 ,CPB组 (2 .2 1±0 .2 2 )较对照组明显降低 (5 .30± 0 .17,P<0 .0 1) .胃液及血清中胃泌素质量浓度随体外循环时间延长较对照组明显增高 .胃泌素受体 m RNA的表达量 (0 .43± 0 .0 4) %随 CPB时间增加较对照组明显增加 (0 .2 7± 0 .0 8) % ,(P<0 .0 1) .结论　 CPB过程中随时间延长 ,胃液及血清中胃泌素浓度增高 ,胃液 p H值降低及胃泌素受体 m RNA的表达量增高使胃粘膜处于高酸环境中 ,是 CPB术后发生胃肠道并发症的潜在的危险因素     

骨髓内皮祖细胞EPCs两种分离方法及其对比研究

目的:研究免疫磁珠法和贴壁换液法分离骨髓内皮祖细胞的可行性和条件,并比较两种方法优缺点.方法:利用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取内皮祖细胞,体外观察细胞生长及形态变化,通过检测细胞血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)、Ⅷ因子相关抗原抗体表达、摄取乙酰化-低密度脂蛋白(Ac-LDL)情况和超微结构等进行鉴定.同时,流式细胞检测分离所得细胞的纯度、细胞计数测定分离所得细胞的数量及MTT法检测细胞生长增殖状况等,对两种分离方法进行对比研究.结果:用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取的细胞,体外培养后细胞呈铺路石形,透射电镜显示细胞内具有特征性的W-P小体,免疫荧光染色检测细胞相关抗原VEGFR-2, Ⅷ/vWF 呈阳性,同时细胞摄取Ac-LDL,证实为内皮祖细胞.免疫磁珠法与贴壁换液法相比,分离所得内皮祖细胞数量是后者2倍,纯度为76%,明显高于贴壁换液法的29%;同时,两者对细胞增殖生长无明显影响.结论:利用免疫磁珠法和贴壁换液法均可分离得到骨髓内皮祖细胞,它将成为新的组织工程种子细胞.免疫磁珠法分离得到细胞纯度更高、数量更大,但步骤复杂、价格昂贵;贴壁换液法得到细胞纯度和数量偏低,但方法简单、经济、实用性强.     

动态种植法提高在去细胞猪瓣支架上种植内皮细胞效率和均匀性的研究

目的:尝试使用简单的动态种植方法来提高内皮细胞在去细胞牛心包支架上的种植效率和均匀性,以更有效地构建组织工程瓣膜.方法:采用胰酶-去垢剂法制备去细胞牛心包. 内皮细胞以下列方式在去细胞牛心包支架进行种植和培养: ①振荡种植振荡培养(OO);②振荡种植静止培养(OS);③静止种植静止培养(SS). 定期取样品进行电镜、组织学检测及细胞计数分析. 结果:细胞加入24 h后振荡种植的样品比静止种植的样品细胞在支架内分布更为均匀,同时振荡种植的样品细胞贴壁率[ (36±3) %]高于静止种植的样品细胞贴壁率[(21±2)%, P<0.05]. 振荡种植振荡培养的样品在培养过程中细胞脱离支架而死亡,因此放弃了这些样品的继续培养. 振荡种植静止培养的样品和静止种植静止培养的样品细胞一直保持正常的伸展状态. 在培养过程中支架上的活细胞总数振荡种植静止培养的样品一直高于静止种植静止培养的样品. 结论:采取振荡种植的方式种植细胞可明显提高内皮细胞在三维支架上种植的效率和分布均匀性.     

经导管主动脉瓣置换的动物实验方法

目的:建立经导管主动脉瓣置换（transcatheter aortic valve replacement,TAVR）的动物实验方法,确定适合于TAVR的实验动物模型及主动脉根部造影的最佳投照体位。方法:选用健康绵羊15只（体质量40～45 kg）,于颈中、下1/3处到胸骨上窝区间,通过超声心动图和血管超声分别测量绵羊主动脉瓣环直径和颈总动脉直径。分离绵羊颈总动脉,于直视下测量其直径。穿刺颈总动脉,送入猪尾巴导管,行左心室造影,确定主动脉根部最佳投照体位并进行影像学分析。行颈总动脉横切口,依次置入20F和24F介入式大动脉支架（主动脉覆膜支架）输送鞘,观察能否顺利通过。分别在置入前后,经胸超声心动图（TTE）测量主动脉瓣有效瓣口面积（effective orifice area,EOA）、返流百分比、心率,经心导管测量主动脉收缩压（aortic systolic pressure,ASP）、主动脉舒张压（diastolic aorticpressure,DAP）、平均主动脉压（mean aortic pressure,MAP）、左心室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）、左室舒张末压（left ventricular end diastolic pressure,LVEDP）。结果:用超声心动图测得收缩期主动脉瓣环直径为（24.98±2.41）mm,舒张期主动脉瓣环直径为（19.82±2.14）mm。用血管超声测得颈中、下1/3处颈总动脉直径为（5.61±0.50）mm,颈总动脉胸廓入口处直径为（9.16±0.84）mm。解剖直视下测得的颈中、下1/3处颈总动脉直径为（5.90±0.64）mm。15只绵羊均可经颈总动脉成功置入20F输送鞘,13只绵羊可成功置入24F输送鞘。造影结果显示,右前斜位2.5°±3°、头足位7.1°±6°,可清楚显示绵羊左、右冠脉的开口及主动脉根部的解剖形态。术后存活绵羊（14只）主动脉瓣的EOA、返流百分比、心率、ASP、DAP、MAP、LVSP、LVEDP与术前测量值差异均无统计学意义。结论:经绵羊颈总动脉可建立逆行TAVR实验模型,右前斜位2.5°±3°、头足位7.1°±6°,可获得良好的主动脉根部影像,满足应用介入瓣膜输送系统进行TAVR动物实验研究的需要。     

连续性肾脏替代治疗在心内直视术后急性肾功能衰竭的应用

目的总结连续性肾脏替代疗法（CRRT）治疗心内直视术后急性肾功能衰竭（ARF）的经验。方法1999年1月至2005年5月共发生51例心内直视术后急性肾功能衰竭患者,均采用CRRT进行治疗。结果存活的30例患者在CRRT治疗12 h后血气和电解质明显改善,18288 h进入多尿期,肾功能逐渐恢复正常。死亡的21例患者中早期5例治疗偏晚,肾功能未恢复,最终肾衰死亡,另16例CRRT治疗1周后肾功能均恢复,但因低心排、感染及呼吸循环衰竭等非肾性因素死亡。结论CRRT是救治心内直视术后并发ARF的有效手段。     

自制气动左心辅助泵对急性左心室心力衰竭犬血浆CT-1及BNP的影响

目的:通过监测血流动力学及测量血浆心肌营养素-1(CT-1)、脑钠肽(BNP)浓度的变化,观察自制气动左心辅助泵对急性左心衰竭实验犬左心功能的影响。方法:18只实验犬建立犬心力衰竭(心衰)模型后,随机分为2组:辅助组(A组)、对照组(B组)。从术前到术后360min共4个时间点内监测血流动力学变化,并测定血浆CT-1和BNP浓度。结果:急性左心衰竭前各组CT-1与BNP水平差异无显著性(P>0·05)。心衰后360min辅助组CT-1和BNP水平分别是(44·2±4·5)pg/mL和(58·5±6·9)pg/mL,而对照组分别为(180·6±5·7)pg/mL和(132·9±3·6)pg/mL,2组差异有显著性(P<0·01)。结论:血流动力学及血浆CT-1与BNP的变化表明,自制气动左心辅助泵能明显改善急性左心衰实验犬的左心功能。