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目的 利用聚合酶链反应-连接酶反应(polymorphism chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)技术检测瘦素受体基因Lys109Arg (A/G)、Gln223Arg (A/G),脂联素基因G276T、T45G,护骨素基因T950C、G1181C六个多态性位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP).方法 参照待测多态性位点所在DNA序列设计并合成一对引物及3条探针,先通过PCR反应获得含有待检测突变位点的基因片段,再进行LDR,根据测序电泳结果所显示的含荧光标记的LDR产物的片段长度来判断基因型别.结果 采用PCR技术成功扩增出包含瘦素受体基因(110 bp,130 bp)、脂联素基因(400 bp)、护骨素基因(118 bp,163 bp)多态性位点的基因片段.根据LDR产物片段长度不同进行基因分型,纯合子只有一种片段长度,杂合子包含两种纯合子的片段长度,如瘦素受体基因SNP Lys109Arg (A/G)的PCR产物长度为110 bp,LDR产物片段的长度为110 bp时则判断为AA基因型,112 bp则判断为GG基因型,AG基因型则具有110 bp、112 bp两种片段长度.PCR-LDR基因分型结果与DNA测序技术的检测结果一致(Kappa=1,P=0.00).结论 PCR-LDR技术简单、快速、准确、成本低,适用于大批量SNP检测. 相似文献
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目的研究脂联素基因SNP+45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症的相关性,比较脂联素基因SNP+45多态性与骨转换生化标志物的关系。方法以聚合酶链反应-限制性内切酶长度多态性(PCR—RELF)技术,对75例骨质疏松症患者和71例正常对照者脂联素基因SNP+45位点进行基因分型,应用酶联免疫测定法或电化学发光免疫法测定75例骨质疏松症患者血清和尿液中8项骨代谢指标。结果脂联素基因SNP+45多态性位点的基因型和等位基因频率在骨质疏松症患者和正常对照组比较差异无统计学意义,脂联索基因SNP+45多态性位点的基因型与骨转换标志物比较差异也均无统计学意义。结论脂联素基因SNP+45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症无相关性,与骨转换率也无相关性。 相似文献
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斜视作为眼科常见疾病因其影响美观、影响儿童视力发育等诸多特点,患者常常出现焦虑、抑郁、自卑等多种心理问题,严重的演变为心理障碍。本文旨在分析斜视患者和家属的心理问题,寻找与之对应的护理对策。 相似文献
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骨转换生化标志物的临床应用和评估 总被引:1,自引:0,他引:1
目的比较妇女绝经前后骨转换生化标志物变化率,研究各指标在各种疾病组的浓度变化,并对临床应用作出初步评价。方法应用酶联免疫测定法或电化学发光免疫法分别测定164名健康成年人和120例患者血清和尿液中10项骨代谢指标。结果绝经后妇女骨代谢指标明显升高;高转换型骨质疏松组与对照组相比骨转换生化标志物的差异有统计学意义;变形性骨炎组和甲状旁腺功能亢进组与对照组比较除Ⅰ型胶原羧基端前肽(PICP)外,骨转换生化标志物的差异有统计学意义;甲状腺功能亢进组和肿瘤骨转移组除PICP和甲状腺激素(PTH)外,与对照组相比差异有统计学意义;风湿性关节炎除吡啶啉(PYD)和脱氧吡啶啉(DPD)与对照组比较差异有统计学意义外,其余差异均无统计学意义。结论各种骨代谢疾病不同程度影响骨转换,PICP应用于临床敏感性较差。 相似文献
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目的研究ERK5在成骨细胞的表达及IL-6对其表达的调控,初步探讨ERK5在成骨细胞增殖分化中的作用。方法应用免疫印迹法检测人、大鼠、小鼠成骨细胞和MG-63细胞ERK5的表达;用IL-6作用于MG-63细胞,检测不同时间和剂量干预后ERK5和P-ERK5表达情况,构建ERK5 siRNA和空白对照质粒,转染MG-63细胞,IL-6干预细胞后检测各组细胞增殖率、碱性磷酸酶活性和骨钙素表达的差异。结果在人、大鼠、小鼠成骨细胞和MG-63细胞中均有ERK5的表达;IL-6可呈时间、剂量依赖性的提高ERK5的磷酸化;与对照组相比,ERK5 siRNA的成骨细胞IL-6刺激后增殖降低,骨钙素表达量下降且差异有统计学意义,而碱性磷酸酶活性的变化差异无显著性。结论成骨细胞ERK5信号通路的活性受IL-6调控,ERK5信号通路参与了成骨细胞的增殖分化。 相似文献
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目的 探讨卡松方程参数在血液流变检测中的应用价值。方法 分别测定197例常见老年病患者(糖尿病44例、冠心病59例、高血压30例、高血脂11例、慢支30例、脑梗塞23例)和54例中老年正常健康体检者的血流变指标及卡松方程参数,并按疾病分组,统计分析其相关性。结果 卡松屈服应力τ_0与全血低切粘度η_p,(2s~(-1))、红细胞聚集指数EAI间,卡松粘度η_c与全血高切粘度η_P(200s~(-1))、全血低切粘度η_b(2s~(-1))、红细胞压积HCT、红细胞刚性指数IR,红细胞聚集指数EAI间均具有较显著的相关性(P<0.05~0.01)。结论 卡松屈服应力τ_0和卡松粘度η_c分别作为血流变检测指标全血低切粘度η_b(2s~(-1))和全血高切粘度η_b(200s~(-1))的补充延伸指标,有助于临床血流变检测结果间的统一性和标准化及质控管理。 相似文献
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目的了解上海地区汉族人群中神经肽Y(NPY)基因信号肽部位T1128C(Leu7Pro)单核苷酸多态性(SNP)的分布频率。方法利用聚合酶链反应(PCR)-连接酶检测反应(LDR)技术检测了867例上海地区汉族人群的NPY基因多态性。参照待测多态性位点所在DNA序列设计并合成1对引物及3条探针,先通过PCR获得含有待检测突变位点的基因片段,再进行PCR产物的LDR,根据测序电泳结果所显示的含荧光标记的LDR产物的片段长度来判断基因型别。结果 867例研究对象均显示NPY基因型为T1128T(Leu7Leu),未出现T1128C(Leu7Pro)或C1128C(Pro7Pro)。结论 NPY基因多态性存在明显的种族和地理差异,上海地区汉族人中不存在NPY T1128C(Leu7Pro)基因多态性,NPY基因T1128C多态性与上海地区汉族人群冠心病的发生、发展无相关关系。 相似文献