脑肿瘤术后小腿肌间静脉血栓的形成因素与转归

目的 探讨脑肿瘤术后小腿肌间静脉血栓形成因素与转归。方法 对2018-11—2019-10徐州医科大学附属医院神经外科治疗的69例脑肿瘤接受脑部肿瘤手术患者的临床资料进行回顾性分析。所有患者术后3d内应用彩色多普勒超声检查双下肢静脉血栓情况。通过手术时间、年龄、术后脱水药物使用及性别因素对小腿肌间静脉血栓形成的影响进行统计分析。术后3个月电话通知小腿肌间静脉血栓患者来院行双下肢静脉彩色多普勒超声检查,观察小腿肌间静脉血栓的转归。结果 17例患者术后发生小腿肌间静脉血栓,发生率24.63%。脑肿瘤术后未发生血栓组52例,年龄1～70(48.59±12.59)岁,手术时间(3.36±1.53)h,男女性别比20∶32,术后脱水药物使用与未使用比例40∶12。小腿肌间血栓组17例患者年龄35～75(56.00±10.61)岁,手术时间(3.78±1.13)h,男女性别比4∶13,术后脱水药物使用与未使用比例14∶3。手术时间、性别、是否术后应用脱水药物在脑肿瘤术后未发生血栓组与发生小腿肌间血栓组比较差异无统计学意义(P0.05)。2组年龄比较差异有统计学意义(P0.05)。3个月后通过双下肢进行彩色多普勒超声检查,17例小腿肌肉静脉血栓完全溶解。结论 小腿肌间静脉血栓可发生于脑肿瘤患者术后,其形成的因素与手术时间、性别、术后是否应用脱水药物无关,与患者年龄有关。肌间静脉血栓在3个月后可以溶解。     

PHAP1通过AKT信号通路调控脑胶质瘤细胞增殖作用的研究

目的探讨人类白细胞抗原关联蛋白1(putative HLA-associated protein1,PHAP1)是否通过蛋白激酶B信号通路进而影响胶质瘤细胞的增殖。方法应用Western blotting检测PHAP1在胶质瘤组织中的表达水平。用CCK-8实验检测沉默或者过表达PHAP1对U251和U87细胞增殖能力的影响;用免疫印迹法检测沉默或者过表达PHAP1对AKT/p27/Stathmin信号分子的影响;裸鼠体内验证PHAP1对胶质瘤移植瘤生长的作用。结果 PHAP1在胶质瘤组织呈高表达。CCK-8实验显示,沉默PHAP1后胶质瘤细胞U251和U87的增殖能力下降,而过表达PHAP1后U251和U87细胞的增殖能力增强。Western blotting检测证实沉默PHAP1后,AKT活化显著下降,从而导致下游p27表达水平增高和Stathmin蛋白表达水平降低,过表达PHAP1产生相反的效应。进一步裸鼠体内实验验证,沉默PHAP1抑制胶质瘤移植瘤的生长。结论 PHAP1可以通过调控AKT/p27/Stathmin信号通路,从而促进胶质瘤的增殖。     

慢病毒介导的酸性成纤维细胞生长因子基因在乳腺癌细胞MCF-7中的表达及其意义

目的：探讨慢病毒系统介导的实现酸性成纤维细胞生长因子 (FGF-1) 在 MCF-7 细胞中的过表达，获得初步稳定并且大量表达 FGF-1 的细胞株，为研究 FGF-1 在肿瘤发生及发展中的作用奠定基础。 方法：构建 FGF-1的慢病毒表达载体 pWPXLd-FGF-1，通过与包装质粒 psPAX2、 pMD2.G 共转染 293FT 细胞进行病毒包装，用包装成功后病毒液侵染乳腺癌 MCF-7 细胞，通过流式细胞仪检测侵染效率，通过 Western blotting 检测 GFP-FGF-1 的融合表达,通过 Wound healing 实验初步检测 FGF-1 对细胞增殖及迁移能力的影响。 结果：成功 构建了FGF-1的慢病毒表达载体，病毒滴度达到2.8×10⁶ TU•mL^-1；获得一株大量表达 FGF-1 的细胞株，FGF-1的转染效率达60%以上，FGF-1对细胞的增殖及迁移具有一定的促进作用。 结论：成功构建FGF-1的慢病毒表达载体并且实现在 MCF-7 细胞中的大量表达。     

RhoC—miRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌细胞系中稳定表达

目的 体外合成RNA干涉小分子构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA真核表达载体,分析其在人卵巢癌细胞SKOV3中稳定表达情况.方法 设计并合成单链oligo,经退火形成双链的DNA oligo,将其与线性的pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR质粒连接,构建重组质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA真核表达载体,经扩增、筛选、鉴定及测序后,用脂质体法将重组质粒转染SKOV3细胞,筛选稳定转染细胞系、观察转染细胞的形态并进一步通过Western印迹法检测细胞内RhoC蛋白表达.结果 重组质粒进行PCR鉴定及DNA序列测定证实DNA oligo已被成功连接到载体中并且序列完全正确;经重组质粒转染的SKOV3细胞24 h后的荧光显微镜下观察到少量细胞带有绿色荧光信号,RhoC-miRNA稳定转染的SKOV3细胞形态变圆,折光性增强,收缩不铺展.Western印迹结果显示,与SKOV3细胞株及pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-neg细胞相比,pcDNATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA细胞中RhoC蛋白表达水平明显降低,表明所设计的RhoC-miRNA能有效抑制SKOV3细胞中内RhoC蛋白表达.结论 该实验成功构建了RhoC-miRNA真核表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA,利用脂质体法将其转染卵巢癌细胞后,能有效地抑制细胞内RhoC蛋白表达,为进一步研究RhoC的功能及探讨以RhoC为靶点的基因治疗提供了研究平台.     

神经节细胞胶质瘤的临床特点及外科治疗

目的探讨神经节细胞胶质瘤的临床特点及外科手术治疗。方法回顾性分析11例行外科手术治疗的神经节细胞胶质瘤患者的临床和病理资料。结果本组11例患者术后平均随访12个月,预后均良好,均无癫痫再发作及肿瘤复发。结论神经节细胞胶质瘤早期诊断、早期治疗的预后较好,术中神经导航、皮层脑电图、术中超声等多种技术手段,是外科手术全切治疗的关键。