Ghrelin及GHSR在急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺组织的表达

目的 观察急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺组织ghrelin以及生长激素促分泌素受体(GHSR)的表达,探讨ghrelin在ANP发病机制中的作用.方法 70只大鼠按完全随机法分为ANP组和对照组,每组35只.采用逆行胆胰管注射4％牛磺胆酸钠的方法制备大鼠ANP模型;对照组仅开腹,轻翻动胰腺.术后3、6、12、24、48 h处死大鼠,取血测血清淀粉酶,取胰腺行常规病理检查并评分,应用RTPCR和蛋白质印迹法检测胰腺组织ghrelin、GHSR的mRNA及蛋白表达.结果 ANP组大鼠血清淀粉酶浓度从造模后3h开始升高,6h达(8244±2950) U/L,显著高于对照组(P＜0.05);胰腺病理损伤及评分随时间延长逐渐加重,24h评分为(11.91 ±1.31)分,显著高于对照组的(3.12±1.60)分.ANP组大鼠胰腺组织ghrelin mRNA和GHSR mRNA表达随时间的延长而逐渐升高,48 h达峰值,分别为1.29 ±0.64和0.94±0.16,均显著高于对照组的0.58 ±0.05和0.19±0.03(P值均＜0.05).ANP组大鼠胰腺组织ghrelin和GHSR蛋白的表达在48 h时达峰值,分别为3.05±0.48和2.34±0.32,均显著高于对照组的2.18±0.23和1.55 ±0.10(P值均＜0.05).结论 ANP大鼠胰腺组织ghrelin、GHSR的mRNA及蛋白表达均显著增加,且与胰腺病变严重程度有关.     

ghrelin 与胰腺疾病的相关性研究进展

ghrelin 是一种新发现的脑肠肽，广泛分布于全身多个系统，具有多种生物学功能。研究表明ghrelin 在胰腺内、外分泌性疾病中均有异常表达，可能参与了胰腺疾病的发生发展。此文就 ghrelin 在胰腺疾病中的研究进展作一综述。     

2012年版急性胰腺炎分类标准的临床应用

目的 初步探讨2012年版急性胰腺炎分类标准的临床应用价值.方法 回顾性分析2009年10月至2012年9月广西医科大学第一附属医院诊断为急性胰腺炎患者的临床资料.根据2012年版分类标准将患者分为轻症急性胰腺炎(MAP)、中度重症急性胰腺炎(MSAP)、重症急性胰腺炎(SAP)3组.比较各组患者的好转及治愈例数、住院天数、住院费用、ICU入住率及入住天数、SIRS发生率及持续天数、Ranson评分、APACHEⅡ评分、CTSI评分的差异有无统计学意义.结果 166例患者中MAP 76例,MSAP 65例,SAP 25例;男性119例,女性47例;平均年龄(49±15)岁;平均入院前发病时间为(2.27±1.46)d.3组患者的好转及治愈例数、住院天数、住院费用、入住ICU例数及天数、SIRS发生例数及持续天数、Ranson评分、APACHEⅡ评分、CTSI评分均随着疾病严重程度的增加而升高(P值均＜0.01),其中SAP组患者相应值分别为21例(84.0％)、(23.8±13.6)d、(53900±30260)元、12例(48.0％)及(5.76±13.8)d、24例(96.0％)及(5.00±2.40)d、(3.76±1.30)分、(8.52±4.24)分、(5.44±3.48)分.166例患者中79例发生局部并发症,其中急性胰周液体积聚34例,急性坏死物积聚45例.SAP组急性坏死物积聚发生率高于MSAP组(68.0％比44.6％,P=0.047),而急性胰周液体积聚发生率低于MSAP组(16.0％比46.1％,P=0.016).166例患者中42例发生器官功能衰竭,其中35例发生呼吸功能衰竭,2例发生肾功能衰竭,5例合并发生呼吸功能和肾功能衰竭.SAP组器官功能衰竭发生率为100％,MSAP组为26.2％,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 2012年版急性胰腺炎分类标准简便易行,能准确反映急性胰腺炎的严重程度,适于临床应用.     

2012年亚特兰大急性胰腺炎严重程度分类的临床特征研究

目的 比较1992年和2012年亚特兰大急性胰腺炎（AP）严重程度分类的临床特征有无差异.方法 回顾性分析广西医科大学第一附属医院近3年的AP患者临床资料,分别按1992年和2012年AP分类标准将患者分为轻症组（MAP组）、重症组（SAP组）及轻度组（MAP1组）、中度组（MSAP组）、重度组（SAP1组）.比较两种分类方法的临床资料有无差异.结果 纳入的162例AP患者中,男115例,女47例,平均发病年龄（48.62 ±15.37）岁,女性发病年龄高于男性（P =0.006）,病因以胆源性、特发性及饱餐后为主,胆源性AP以女性为主（P＜0.001）.不同的性别、年龄段及病因的住院日、住院费用差异均无统计学意义（P均＞0.05）.MAP组及SAP组的性别、年龄、病因分布差异均无统计学意义（P均＞0.05）.MSAP组的女性比例、发病年龄及胆源性比例均低于MAP1组及SAP1组.各组的住院日及住院费用随AP严重程度升高而升高,且SAP1组＞SAP组（P均＜0.001）.结论 2012年AP严重程度分类标准下,不同AP严重程度的临床特征有一定的差异,较1992年分类标准更有临床指导意义.     

急性坏死性胰腺炎大鼠血清消褪素的表达变化及意义

目的观察急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠血清消褪素D1（resolvin D1,RvD1）和白细胞介素-6（IL-6）、IL-10的变化情况,探讨RvD1在急性坏死性胰腺炎发病机制中的作用。方法70只SD大鼠随机分为ANP模型组（n=35）和假手术组（r／=35）。经十二指肠乳头逆行胆胰管注射4％牛磺胆酸钠来制备大鼠ANP模型。大鼠分别于造模后3h、6h、12h、24h、48h处死,测定大鼠血清淀粉酶,光镜下进行胰腺病理学观察及评分,应用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清RvD1和IL-6、IL-10的变化情况。结果ANP组大鼠血清淀粉酶从造模后3h开始升高,6h达峰值（8244．00±2949．83）u／L,各时点血清淀粉酶显著高于假手术组（P〈0．05）;ANP组胰腺病理损伤及评分于造模后3h～24h随时间延长逐渐加重,24h评分为（11．91±1．312）分,均较假手术组高（P〈0．05）。ANP组血清RvD1水平于造模后3h～24h随时间延长逐渐升高,24h达峰值（39．48±15．28）pg／mL,较假手术组显著升高（P〈0．05）,并与血清IL-6水平呈正相关（r=0．362,P〈0．05）;在造模后6h、12h、24h,ANP组的血清IL-6水平均较假手术组高（P〈0．05）,并随时间延长逐渐升高,于24h达峰值（1293．26±428．12）pg／mL;在造模后3h、24h和48h,ANP组的血清IL-10水平均较假手术组显著升高（P〈0．05）。结论血清Rv的变化可能与急性胰腺炎（AP）严重程度有关,在AP中起抗炎及促进炎性反应消退的作用。     

二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

背景与目的:近年研究发现二甲双胍对多种肿瘤具有抑制作用,部分临床研究也发现二甲双胍可以降低糖尿病并发胰腺癌的风险和降低胰腺癌的死亡危险。本研究从细胞水平着手研究二甲双胍对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株Bxpc-3,予二甲双胍进行干预作为二甲双胍干预组,无药物组作为对照组。以MTT检测二甲双胍对Bxpc-3细胞存活率的影响,流式细胞术检测二甲双胍对Bxpc-3细胞周期的影响,流式细胞术及Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR检测AMPKα1、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin D1 mRNA的表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测Cyclin D1、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,MTT检测结果显示,二甲双胍可以抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,并呈时间-浓度依赖性(F=8.99、124和114.61,P<0.01);流式细胞术检测结果显示,二甲双胍干预组与对照组相比,G0/G1期细胞所占百分比增加(t=-8.71,P<0.01),S期(t=7.54,P<0.01)及G2/M期(t=7.00,P<0.01)细胞所占百分比减少;流式细胞术(早期凋亡率t=-2.68,晚期凋亡率t=1.29,总凋亡率t=-0.85)及Hoechst 33258荧光染色法(t=-0.46)结果显示,两组细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示,二甲双胍干预组Cyclin D1 mRNA表达明显降低(t=4.96,P<0.01),AMPKα1、Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=1.68、-0.56、-1.80、0.67,P>0.05);Westernblot结果显示,二甲双胍干预组Cyclin D1蛋白表达明显降低(t=7.02,P<0.01),Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=-0.11、-0.20,0.11,P>0.05)。结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,机制主要与其阻滞细胞周期、下调Cyclin D1表达有关;二甲双胍对Bxpc-3细胞的凋亡无明显诱导作用。     

二甲双胍对人胰腺癌细胞迁移的抑制作用

目的:研究二甲双胍对胰腺癌细胞迁移的影响,并初步探讨可能机制.方法:体外培养人胰腺癌细胞株Bxpc-3,予二甲双胍进行干预作为实验组(M组),无药物组作为对照组(C组).MTT检测二甲双胍对Bxpc-3细胞存活率的影响,细胞划痕实验检测划痕愈合率,RT-PCR检测MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,Elisa检测细胞培养上清液MMP-2、MMP-9蛋白的分泌量.结果:与对照组相比,MTT结果示二甲双胍可以抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,并呈时间-浓度依赖性(F=8.991,124,114.61,P<0.01);划痕实验示二甲双胍干预组12、24、48h与对照组相比划痕愈合率显著下降(t=7.683,9.013,10.471,P<0.01);RT-PCR示二甲双胍干预组MMP-2、MMP-9mRNA的表达显著降低(t=16.563,28.494,P<0.01);Elisa示二甲双胍干预组MMP-2、MMP-9蛋白分泌明显下降(t=9.428,13.542,P<0.01).结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖及迁移,其主要机制可能与抑制MMP-2、MMP-9活性有关.     

急性坏死性胰腺炎大鼠Ghrelin表达的变化及GHRP-2对其的影响

重症急性胰腺炎（server acute pancreatitis,SAP）患者早期病情变化迅速、病死率高,虽然近年SAP的治疗手段有很大进步,但寻找早期干预疾病进程、减少疾病重症化仍是本领域的研究热点之一.生长激素释放肽-2（growthhormone releasing peptides,GHRP-2）是ghrelin受体激动剂,它可以减轻肝脏炎症、急性肺损伤,而且外源性ghrelin对急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）的炎症反应有抑制作用,但内源性ghrelin与AP发病机制的关系未明确.本研究观察GHRP-2干预急性坏死性胰腺炎（acute necrotizing pancreatitis,ANP）大鼠后内源性ghrelin表达的变化.     

急性胰腺炎患者血清晚期氧化蛋白产物检测的临床意义

目的 检测急性胰腺炎患者血清晚期氧化蛋白产物（AOPP）的水平,结合IL-6及反映急性胰腺炎（AP）严重程度的指标及相关临床资料,探讨AOPP与AP严重程度的关系.方法 回顾性分析我院2010年ll月-2012年9月临床上确诊的AP患者58例.其中,重症急性胰腺炎（sever acute pancreatitis,SAP） 18例,轻症急性胰腺炎（mild acute pancreatittis,MAP）40例.应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测AP患者入院24 h内的血清AOPP和IL-6含量.同时检测患者血常规、肝功能、血钙（Ca）、血糖（GLU）、乳酸脱氢酶（LDH）.结果 SAP组血清白细胞（WBC）、GLU、LDH高于MAP组,差异有统计学意义（P＜0.05）,白蛋白（ALB）、血Ca低于MAP组,差异有统计学意义（P ＜0.05）;SAP组、MAP组血清AOPP含量分别为（38.12± 11.67） ng/ml和（29.40±14.19） ng/ml,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;SAP组、MAP组血清IL-6含量分别为（211.01±107.98） pg/ml和（129.72±56.53） pg/ml,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.AP患者血清AOPP与WBC、GLU呈正相关性（P＜0.05）,与LDH、血Ca、ALB无明显相关性（P＞0.05）.结论 血清AOPP增高可能与AP的严重程度有关;AOPP可能参与AP发生、发展中的炎症反应过程.     

二甲双胍对人胰腺癌细胞株PANC-1生长侵袭影响及其机制的探讨

目的:研究二甲双胍对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株PANC-1,给予不同浓度二甲双胍进行干预作为实验组,无药物组作为对照组。MTT法检测二甲双胍对PANC-1细胞存活率的影响;流式细胞仪检测二甲双胍对PANC-1细胞周期及细胞凋亡的影响;Transwell小室侵袭实验观察细胞侵袭能力;RT-PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin D1、MMP-2和MMP-9mRNA的表达。结果:与对照组相比,用药组细胞增殖活性明显下降,F值分别为70.318、327.201和654.196,P<0.01,且呈时间-浓度依赖性。流式细胞仪检测细胞周期结果显示,随着二甲双胍浓度的增加,G0/G1期细胞所占百分率逐渐增加,S期和G2/M期细胞所占百分率逐渐下降,F值分别为208.365、195.308和48.87,P<0.01;流式细胞仪分析对照组与实验组早期和晚期细胞凋亡率差异无统计学意义,F值分别为0.123和0.298,P>0.05。侵袭实验结果显示,随着二甲双胍浓度的增加,细胞侵袭能力逐渐下降,F=66.131,P<0.01。RT-PCR示,二甲双胍干预组Cyclin D1、MMP-2和MMP-9mRNA表达明显降低,t值分别为6.789、13.452和25.72,P<0.01;Bax、Bcl-2和Caspase-3mRNA与对照组相比差异无统计学意义,t值分别为-0.683、-1.567和0.78,P>0.05。结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株PANC-1的增殖和侵袭,机制主要与其阻滞细胞周期以及影响相关基因表达有关;二甲双胍对PANC-1细胞的凋亡无明显诱导作用。