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目的:抗转铁蛋白受体单链抗体(TfR-scFv)-EGFP融合蛋白真核表达载体的构建与表达.方法:设计两对引物引入连接肽(Gly4Ser)3以及酶切位点HindⅢ和BamH Ⅰ,采用重叠延伸PCR扩增与构建具有前导肽的L-VH-Linker-VL单链抗体基因,亚克隆至pEGFP-N1,转染COS-7细胞,倒置相差荧光显微镜下观察荧光蛋白表达,流式细胞术(FCM)检测细胞分泌上清与乳腺癌细胞MCF-7及黑色素瘤细胞A375结合活性.结果:测序表明获得了正确的L-VH-Linker-VL单链抗体基因序列;亚克隆至pEGFP-N1后,表达载体转染COS-7细胞,经荧光显微镜观察转染细胞,及通过流式细胞术(FCM)检测细胞分泌上清,证实抗TfR-scFv-EGFP融合蛋白在转染细胞中分泌性表达,并能够与天然高表达TfR的细胞特异性结合.结论:抗TfR-scFv-EGFP融合蛋白真核表达载体构建成功,其表达产物具有与TfR阳性细胞结合的活性. 相似文献
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目的 研究转染FADD缺失突变体(FADDdel)和WeelHu/GFP的胰岛β细胞株(NIT细胞)抵抗细胞毒T细胞的杀伤作用及其分泌胰岛素与细胞增殖所受的影响。方法 采用免疫磁珠法测量转染WeelHu基因的NIT细胞培养上清中的胰岛素水平及观察其增殖速度。将分别转染空载体pUC-pIC、pCMV和转染pFADDdel、pCMV-WeelHu、pCMV-WeelHu/GFP的NIT细胞与活化的淋巴细胞共培养,利用51Cr释放试验检测淋巴细胞对NIT细胞的杀伤作用。结果 转染WeelHu基因与未转染的NIT细胞胰岛素的分泌和生长速度没有明显变化(P>0.05)。转染pCMV-WeelHu/GFP或pCMV-WeelHu的NIT细胞其抗淋巴细胞杀伤能力明显高于转染空载体的NIT细胞(P<0.01),表达WeelHu或WeelHu/GFP融合蛋白的胰岛细胞之间抗凋亡能力差异无统计学意义,转染FADDdel在低剂量效靶比时对胰岛β细胞有一定保护作用(P <0.05),但在高剂量效靶比时与转染空载体比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论表达WeelHu或FADDdel的胰岛细胞可抵抗T细胞的杀伤,且对胰岛素的分泌及细胞增殖元明显影响。 相似文献
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当下整形外科的教学中仍存在“重理论,轻实践,难理解”等客观问题,这极大地阻碍了我国高质量整形医师的培养,是整形外科教学中亟待解决的难题之一。近年来,各种虚拟现实技术在医学教育中逐步实施,这有助于学生对较为抽象的学习对象的理解与学习兴趣的培养。而翻转课堂教学模式则能更加充分地调动学生的学习积极性与主观能动性,从而更有利于学生自主学习与终身学习能力的培养。鉴于目前整形外科课堂教学中存在的挑战,应用基于虚拟现实技术的翻转课堂教学模式对于增加学生的学习兴趣、提高学生的学习效率、提升教师的教学质量具有重要意义,同时也将更有利于整形外科领域更多高质量医生的培养。文章将对虚拟现实技术联合翻转课堂教学模式在未来整形外科教学中的应用进行展望与总结。 相似文献
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血清药物化学已成为近年来研究中药药效物质基础较为科学且迅速发展的方法之一,利用该法可从复杂的中药成分中筛选和明确与功能主治相吻合的物质,对有效成分进行分离纯化,阐明药效作用的物质基础,说明中药复方配伍的意义和作用机制,能有效反应中药多成分、多靶点协同发挥药效的作用特点,同时通过分析研究血清移行成分,寻找体内直接作用物质,有助于快速、准确地对中药药效物质进行研究。 相似文献
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目的 了解恶性脑胶质瘤的治疗现状,分析不同治疗方法对患者生存期的影响,研究影响恶性脑胶质瘤预后的相关因素,为规范化、个体化治疗恶性脑胶质瘤提供指导.方法 依据治疗方式不同,对我院自2001年1月至2010年1月经术后病理证实为恶性脑胶质瘤,且随访成功的68例患者进行回顾性分析.结果 全组病例1、2、5年生存率分别为54.2%、41.9%、16.2%.平均生存时间(29.4±5.18)个月.Cox模型多因素分析显示影响预后的独立因素有:年龄、肿瘤级别、肿瘤切除程度(P<0.05);Log - rank检验单因素分析发现与预后相关的因素有:年龄、肿瘤级别、治疗方式(P<0.05).结论 恶性胶质瘤的预后较差,特别是Ⅳ级的胶质母细胞瘤.术后采取以手术、放化疗为主的综合治疗可以延长患者生存时间,改善预后. 相似文献
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目的探讨抗转铁蛋白受体(Tf R)抗体联合化疗药物姜黄素的抗瘤效应。方法利用MTT方法检测Tf R抗体与姜黄素单独及联合作用对胶质瘤细胞生存率的影响;利用流式细胞仪检测Tf R抗体与姜黄素单独及联合作用对胶质瘤细胞凋亡、细胞增殖和细胞周期的影响。结果 Tf R抗体与姜黄素联合作用可增强对胶质瘤细胞增殖的抑制作用,促进肿瘤细胞坏死,并将肿瘤细胞有效阻滞在S期。结论抗Tf R抗体可协同增强姜黄素对胶质瘤细胞的生长抑制效应。 相似文献
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目的 分析因免疫组化检测(immunohistochemistry examination,IHC)引发的病理科医疗纠纷案件的特点及原因,并提出改善建议。方法 下载并回顾性分析中国裁判文书网2017—2021年149例涉及IHC的病理医疗纠纷案件。结果 基层医院为主要涉案医院(44.0%),医方责任案件137例,案件获赔率91.9%。病变部位以女性生殖、淋巴造血和软组织系统为主,病变种类以淋巴瘤、各类肉瘤、交界肿瘤以及少见罕见病为主。各种原因未行IHC检测是引起纠纷的主要原因,IHC指标不全、技术局限、病理医生判读错误等致病理诊断偏差为次要原因。结论 病理科涉及IHC的医疗纠纷防范主要在于提高病理医务工作者的业务水平,提高IHC送检率、会诊率,规范IHC质控。 相似文献