靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的 通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA),探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞,分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况.噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1～6 d的生长情况,绘制生长曲线,比较各组细胞增殖差异.流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响.RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平.结果 siRNA-a细胞镜下形态基本正常,5d后荧光效率仍较高,感染稳定,但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢.siRNA-b细胞感染48 h后,镜下见细胞肿胀、变形,空泡出现,5d后见多量细胞碎片,凋亡小体形成,呈现凋亡状态,11d后可见细胞碎片,已近完全凋亡.MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P＜0.01).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果:siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组.RT-PCR和Western bloting结果 显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调.结论 慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达,从而抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.由此可见,瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段.     

瘦素与肺癌关系的研究进展

肺癌是目前病死率最高的恶性肿瘤,关于肺癌的认识一直是研究热点。肥胖作为一些肿瘤重要的诱因已被公认,而大量证据提示瘦素作为典型的脂肪细胞因子在肿瘤发生、发展中起着十分重要的作用,但是目前对瘦素和肺癌关系的认识仍不是十分清楚。现就瘦素的生物学特性、功能、瘦素与肺癌的关系及其可能的致癌机制等方面予以综述。     

瘦素在呼吸系统中的作用

瘦素作为一种多效性的激素,参与维持机体免疫系统的动态平衡,调节生殖以及血管的生成等。瘦素在呼吸系统方面的作用也日益受到重视。胎儿和成人肺组织是瘦素的反应和产生器官,并在肺稳态的维持及呼吸系统相关疾病的发生、发展等方面发挥着重要的作用。现就瘦素在肺组织中的活性及其在常见呼吸系统疾病发病机制中的作用予以综述。