酿酒酵母细胞GUT2基因的研究进展

目的一磷酸甘油脱氢酶(glycerol-1-phosphate dehydrogenase,GPD)是广泛存在于微生物、动物和植物中的一类重要代谢酶,参与能量代谢、磷酸合成等生物过程。酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)细胞中存在3种GPD的同工酶,其中有两种以NAD为辅基并定位于胞质中,分别由GPD1和GPD2基因编码形成;还有一种GPD同工酶以FAD为辅基,由GUT2基因编码形成,定位于线粒体,参与细胞的甘油代谢[1]。GUT2基因是酿酒酵母细胞中线粒体FAD+-3-磷酸甘油脱氢酶的编码基因。在甘油分解代谢中,该酶催化3-磷酸甘油转化成为磷酸二羟丙酮。同时还发现,GUT2基因是一个全新的线粒体内膜肽酶IMP的酶作用物。在工业生产中,通过敲除GUT2基因构建高产菌株可用于提高甘油产量。本文从GUT2基因的生物学功能研究与工业生产应用展开论述。     

女性散发性基底细胞型乳腺癌ERα启动子甲基化的研究

目的:探讨ERα甲基化与基底细胞型乳腺癌发生发展的相关性。方法:用甲基化PCR研究60例散发性基底型乳腺癌ERα启动子甲基化情况,并研究其与临床病因素之间的关系。结果:女性散发性基底细胞型乳腺癌组织中ERα基因启动子甲基化发生率为80.0%(48/60)。ERα基因启动子甲基化与淋巴结转移情况、肿瘤分期、p53蛋白、BRCA-1蛋白和BRCA-2蛋白表达情况有相关性,与患者年龄及绝经状态无关。结论:ERα基因启动子甲基化在基底细胞型乳腺癌发生发展中可能起重要作用。     

乳腺浸润性导管癌中HER-2和Survivin蛋白表达相关性研究

目的研究乳腺癌组织中HER-2蛋白和Survivin蛋白表达的相关性及其机制。方法采用免疫组化技术和图像分析技术检测24例乳腺浸润性导管癌组织中HER-2、ERK1/2、p-ERK1/2、AKT、pAKT、Survivin蛋白的表达情况,对蛋白表达的相关性进行统计学分析。结果乳腺浸润性导管癌组织中HER-2蛋白和p-AKT、Survivin蛋白表达之间具有正相关性(P<0.01)。结论乳腺浸润性导管癌组织中HER-2蛋白和Survivin蛋白之间可能具有正向调节关系,且其关系可能通过细胞信号转导蛋白pAKT参与完成。     

拉帕替尼诱导Her－2高表达乳腺癌细胞凋亡的机制探讨

目的探讨拉帕替尼诱导Her-2高表达乳腺癌细胞株SKBR-3凋亡的机制。方法取处于对数生长期的SKBR-3细胞,接种于96孔板。随机分为实验组和对照组,每组设6个复孔。实验组加入终浓度500μg／L拉帕替尼,对照组加入含DMSO无血清的DMEM培养液。培养24、48、72h后,采用MTT法检SKBR-3生存率,用流式细胞仪检测两组细胞凋亡情况,Western blot法检测磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）及survivin蛋白。结果拉帕替尼作用24、48、72h时SKBR-3生存率分别为100％、69．4％、62．0％（P均〈0．05）。实验组细胞凋亡率为10．48％,明显高于对照组的2．14％（P〈0．05）;实验组p-AKT与survivin蛋白相对表达量为0．49±0．12、0．51±0．38,明显低于对照组的1．46±0．13、0．89±0．36（P均〈0．05）。结论拉帕替尼诱导Her-2高表达乳腺癌SKBR-3细胞凋亡的机制与其下调p-AKT、survivin蛋白表达有关。     

乳腺导管内增生病变中p53表达与外显子突变的研究

目的 肿瘤抑制基因p53异常是浸润性乳腺癌发生发展中常见事件,而其与包括普通型增生(usual ductal hyperplasia,UDH)、不典型增生 (atypical ductal hyperplasia,ADH)及导管内原位癌 (ductal carcinoma in situ,DCIS)的乳腺导管内增生性病变关系不明.本研究旨在探讨乳腺导管内增生性病变中p53外显子突变及突变型p53蛋白表达情况,以期了解p53突变及蛋白表达在乳腺癌发生发展中的作用.方法 用高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)结合测序研究140例乳腺导管内增生性病变中p53外显子5-8的突变情况.用免疫组化研究240例乳腺导管内增生性病变中突变型p53蛋白表达情况.结果 经过HRM分析,共17例患者DNA熔解曲线与野生型标准品熔解曲线大于阈值结合测序分析结果发现,其中16例出现p53外显子突变.p53在UDH、ADH及DCIS中的突变率为0.0%(0/40),12.7%(8/63)和21.6%(8/37),三者间差异显著(P<0.05).40例UDH中未出现突变型p53蛋白阳性表达,在14.6%(19/130)的ADH出现阳性表达,在31.4%(22/70)的DCIS中出现阳性表达,三者间差异显著(P<0.05).Spearman相关性分析示突变型p53蛋白表达与p53外显子突变呈正相关(r=0.792,P<0.01).结论 p53外显子突变及突变型p53蛋白表达发生于乳腺导管内增生性病变中的ADH与DCIS,其可能为乳腺癌发生发展中的早期事件.     

女性散发性基底细胞型与非基底细胞乳腺癌ERα启动子甲基化的研究

目的:通过甲基化特异性PCR研究比较女性散发性基底细胞型乳腺癌和非基底细胞型乳腺癌中ERα基因启动子区甲基化情况。方法:筛选基底细胞型乳腺癌,用甲基化特异性PCR研究60例散发性基底细胞型乳腺癌及108例非基底细胞型乳腺癌的ERα启动子甲基化情况,比较二者ERα基因启动子区甲基化情况。结果:女性散发性基底细胞型乳腺癌组织中ERα基因启动子甲基化发生率为80.0%(48/60),高于其在女性散发性非基底细胞型乳腺癌ERα基因启动子甲基化率43.5%(47/108)(χ2=20.89,P<0.01),二者在ER1与ER5区域的甲基化无统计学差异,但在ER3与ER4区域的甲基化差异有统计学意义。结论:女性散发性基底细胞型乳腺癌组织中ERα基因启动子甲基化发生率明显高于非基底细胞型女性乳腺癌,且基底细胞型乳腺癌ER3与ER4区域的甲基化高于非基底细胞型乳腺癌,其可能与基底细胞型乳腺癌发生发展有关。     

乳腺导管内增生病变中p53表达与外显子突变的研究

目的：肿瘤抑制基因p53异常是浸润性乳腺癌发生发展中常见事件,而其与包括普通型增生（usualductal hyperplasia,UDH）、不典型增生（atypical ductal hyperplasia,ADH）及导管内原位癌（ductal carcinoma insitu,DCIS）的乳腺导管内增生性病变关系不明。本研究旨在探讨乳腺导管内增生性病变中p53外显子突变及突变型p53蛋白表达情况,以期了解p53突变及蛋白表达在乳腺癌发生发展中的作用。方法：用高分辨率熔解曲线（high-resolution melting,HRM）结合测序研究140例乳腺导管内增生性病变中p53外显子5-8的突变情况。用免疫组化研究240例乳腺导管内增生性病变中突变型p53蛋白表达情况。结果：经过HRM分析,共17例患者DNA熔解曲线与野生型标准品熔解曲线大于阈值结合测序分析结果发现,其中16例出现p53外显子突变。p53在UDH、ADH及DCIS中的突变率为0.0%（0/40）,12.7%（8/63）和21.6%（8/37）,三者间差异显著（P〈0.05）。40例UDH中未出现突变型p53蛋白阳性表达,在14.6%（19/130）的ADH出现阳性表达,在31.4%（22/70）的DCIS中出现阳性表达,三者间差异显著（P〈0.05）。Spearman相关性分析示突变型p53蛋白表达与p53外显子突变呈正相关（r=0.792,P〈0.01）。结论：p53外显子突变及突变型p53蛋白表达发生于乳腺导管内增生性病变中的ADH与DCIS,其可能为乳腺癌发生发展中的早期事件。     

基于裂殖酵母的蒙医药抗真菌作用研究

各种原因引起的免疫功能低下、老年病人群中真菌感染发病率的不断增加、耐药株或不敏感株检出率的持续增长和抗真菌药物的毒副作用等问题给临床治疗真菌感染带来了严峻挑战。通过阅读国内外真菌研究相关文献,本文对蒙医药抗真菌研究现状进行综述,并为研发抗真菌蒙药提供新的策略。