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目的研究外吐小体免疫原性及其与1型糖尿病病程的相关性。方法采用超滤、高速离心法分离6～15周龄NOD小鼠MIN6β细胞系以及原代胰岛胶质细胞来源的外吐小体,分为对照组、外吐小体组,以Westernblotting分析蛋白表达,以流式细胞术检测外吐小体刺激抗原递呈细胞后表型变化和细胞因子释放水平,掺入。３[H]以检测T淋巴细胞增殖水平,酶联免疫斑点法检测脾细胞受外吐小体刺激干扰素（IFN）－γ阳性T细胞克隆数和NOD小鼠病程的相关性。组间比较采用t检验。结果（1）外吐小体具有典型球状囊泡结构并携带1型糖尿病自身抗原谷氨酸脱羧酶65（GAD65）蛋白;（2）外吐小体组（11．5％）较对照组（2．6％）组织相容性抗原Ⅱ和CD。分子双阳性抗原递呈细胞增加;（3）外吐小体组CD11b＋、CD11c＋和B220＋亚群细胞的白细胞介素6（IL-6）均高于对照组,分别为：（115．0±2．4）比（25．3±2．9）pg／ml,（64．7±3．0）比（22．9±1．4）pg／ml,（10．7±1．2）比（6．3±O．6）pg／ml（均P〈0．05）;（4）外吐小体组CD11b＋、CD11c＋和B220＋亚群细胞的肿瘤坏死因子α（TNF—α）均高于对照组,分别为：（125．0±8．6）比（29．7±1．6）pg／ml,（108．0±6．7）比（16．7±2．1）pg／ml,（24．2±1．4）比（13．5±1．7）pg／ml（均P〈0．01）;（5）外吐小体组CD4阳性T细胞亚群高于阴性对照组[外吐小体10μg/ml组：（21510±1704）cpm,1μg／ml组：（4450±304）cpm,阴性对照组：（575±64）cpm,均P〈0．01],且IFN－γ阳性T细胞克隆数在雌性NOD小鼠随鼠龄呈递增趋势。结论外吐小体具有活化自身反应性T细胞功能并与1型糖尿病病程密切相关。 相似文献
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目的 探究一种新发现的与1型糖尿病(T1D)相关的T细胞抗原[内源性逆转录病毒(ERV)的组特异性抗原(Gag)]与T1D发病的关系。方法 首先对一个从非肥胖糖尿病(NOD)模型小鼠胰岛获得的Gag抗原(Gag 194)的氨基酸序列进行分析[多肽位置：193-210(VSRLRGRRDPPAVDSTTS)],确定Gag 194多肽作为靶点，制备单抗；然后，再利用ELISA和Western blot检测单抗的特异性；最后，在免疫组织化学实验中检测不同年龄的T1D敏感的NOD小鼠与抗性的C57BL/6小鼠胰腺Gag抗原表达的差异性。结果 成功制备了5株(1F4C8、2D4C6、3C3B9、4D6B3、5F9E4)IgG2b亚型的小鼠ERV Gag单抗；5株单抗的敏感性及特异性具有差异；其中，生物素化后的3株单抗(1F4C8、2D4C6、5F9E4)能特异识别NOD小鼠胰腺中表达的ERV Gag抗原且该抗原的表达可在3周龄的NOD小鼠检测到，Gag抗原多表达在NOD小鼠胰岛β细胞区域内，而非淋巴细胞浸润的区域。此外，C57BL/6小鼠的胰腺Gag抗原的表达为阴性。结论 在NOD小鼠幼年时期E... 相似文献
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