落新妇甙对肝缺血再灌注损伤的保护作用

背景:肝脏是对缺血再灌注损伤最敏感的器官之一。黄酮类化合物落新妇甙可作为递氢体清除氧自由基,从而可能在减轻肝脏缺血再灌注损伤等方面发挥作用。目的:观察落新妇甙对肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用,对其机制进行初步探讨。方法:C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组、模型组、小剂量干预组和大剂量干预组。干预组小鼠于缺血前24h和1h分别给予10或40mg/kg的落新妇甙腹腔注射,然后建立70%部分肝缺血再灌注模型。采集血液和肝脏组织样本。检测血清丙氨酸氨基转移酶活性,ELISA测血清肿瘤坏死因子α水平,化学比色法测定肝组织中超氧化物歧化酶、丙二醛含量。肝脏组织病理学检测。Westernblot检测肝组织中肿瘤坏死因子α蛋白含量,RT-PCR检测肿瘤坏死因子αmRNA。结果与结论:落新妇甙干预能有效降低血清丙氨酸氨基转移酶水平,干预组肝组织丙二醛含量较模型对照组明显下降(P<0.01);而超氧化物歧化酶含量明显上升(P<0.01);干预组血清肿瘤坏死因子α含量较模型组对照组明显下降(P<0.01);小、大剂量干预组肝组织中肿瘤坏死因子α蛋白表达与模型组模型对照组比较渐次降低,与半定量RT-PCR结果相符(小剂量干预组P<0.05,大剂量干预组P<0.01)。落新妇甙保护肝脏热缺血再灌注损伤显示出剂量-效应关系趋势。结果提示,落新妇甙干预能减轻小鼠肝脏热缺血再灌注损伤后的炎症反应和脂质过氧化损伤,有效改善肝功能和肝脏病理损害;机制可能在于其能抑制缺血再灌注损伤肝组织中肿瘤坏死因子α的高表达。     

落新妇甙对热缺血再灌注损伤肝脏肿瘤坏死因子α与白细胞介素-10表达的影响

目的 观察落新妇甙对热缺血再灌注(I/R)损伤肝脏Th1、Th2型细胞因子表达的影响. 方法 C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组、模型组,落新妇甙小剂量(10 mg/kg)干预组和大剂量(40mg,/kg)干预组.干预组小鼠于缺血前24h和1 h分别给予10mg/kg或40mg/kg的落新妇甙腹腔注射,建立70%部分肝I/R模型.收集肝组织标本,Western blot检测肝组织中肿瘤坏死因子(TNF)α,白细胞介素(IL)-10蛋白含量,RT-PCR检测肝组织TNF α、IL-10 mRNA的水平.多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK法.结果 与I/R模型对照组比较,小、大剂量落新妇甙干预组肝组织中TNF α蛋白表达水平依次降低,与TNF α mRNA的半定量RT-PCR结果 相符(相对表达量分别为1.74±O.12与1.56±0.09、0.82±0.12,P值均<0.05);而IL-10蛋白表达水平依次升高,与IL-10 mRNA的半定量RT-PCR结果 相符(相对表达量分别为0.96±0.08与1.11±0.17、1.47±0.08,P值均<0.05).结论 落新妇甙干预能抑制I/R损伤肝组织中Th1型细胞因子TNFα的高表达,同时促进Th2型细胞因子IL-10的表达.     

落新妇苷通过促进IL-10表达保护小鼠缺血再灌注损伤肝脏

目的:观察落新妇苷对肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用,对其机制进行初步探讨。方法:C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组(Sham)、模型组(I/R)、落新妇苷小剂量(10 mg/kg)干预组和落新妇苷大剂量(40 mg/kg)干预组。缺血前24 h和1 h干预组小鼠腹腔注射分别给予10或40 mg/kg的落新妇苷,建立肝左、中叶70％部分肝缺血再灌注模型,模型组和假手术组给予同样体积的生理盐水。小鼠肝脏左叶缺血90 min、再灌注6 h后各实验组采集血液和肝脏组织样本。检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)的活性作为肝功能损伤的指标,同时用ELISA检测肝组织中MPO含量。观察肝脏组织病理学改变。Western印迹检测肝组织中IL-10蛋白含量,半定量RT-PCR检测IL-10 mRNA表达情况。结果:落新妇苷干预能有效降低部分肝脏热缺血再灌注小鼠血清ALT水平,能有效降低缺血肝脏中MPO含量,改善肝组织病理表现。干预组肝组织中IL-10蛋白表达与I/R模型对照组比较均渐次升高,与半定量RT-PCR结果相符(小剂量干预组P<0.05；大剂量干预组P<0.01)。结论:落新妇苷干预能减轻小鼠肝脏热缺血再灌注损伤后的炎症反应,有效改善肝功能和肝脏病理损害；机制可能在于其能促进缺血再灌注损伤肝组织中IL-10的高表达。     

人骨髓来源多能成体祖细胞与人肝细胞系体外间接共培养向肝样细胞分化的实验研究

目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞ZHJ-MAPCs与人肝细胞系L02在体外间接共培养条件下诱导其横向分化为肝细胞的可行性，为其在组织工程学研究和临床医学中的应用奠定基础。方法将分别接种于盖玻片上的ZHJ-MAPCs和人肝细胞系L02共置于直径10cm培养皿中实现间接共培养。于间接共培养第1、3、5、7天免疫细胞化学鉴定ZHJ-MABCs的ALB、AFP、CK-18、CK-19等肝细胞特征性表型表达变化情况，并设阳性对照（单独培养的L02细胞）和阴性对照（单独培养未经诱导的ZHJ-MAPCs），计数阳性细胞比率。结果AFP在ZHJ-MAPCs间接共培养第1天即表现为强阳性。ALB在共培养第3天出现较强的阳性，第5天达到高峰。CK-18在培养第5天开始出现阳性。CK-19在各时间点均为阴性着色。阳性对照细胞ALB及CK18有较强的阳性表达，AFP弱阳性表达，CK19阴性表达。阴性对照细胞均为阴性表达。结论与人肝细胞系L02间接共培养能够诱导人骨髓来源的ZHJ-MAPCs向成熟肝样细胞横向分化。     

肝移植治疗肝原发性恶性肿瘤合并门静脉瘤栓的疗效分析

目的：探讨肝原发性恶性肿瘤合并门静脉瘤栓行肝移植治疗的临床疗效.方法：2002年1月至2010年5月,采用肝移植术治疗原发性肝恶性肿瘤合并门静脉瘤栓19例;其中原发性肝癌18例、肝脏肉瘤1例,均排除肝外转移.结果：术后6个月、1年、2年、3年生存率分别为89.5% 、52.6% 、42.1%、21.0%;存活时间最长1例达59个月.6个月、1年和2年的无瘤生存率为57.9% 、31.6%及21.1%.结论：如无肝外转移,肝移植可成为肝原发性恶性肿瘤合并门静脉瘤栓的一种有价值的治疗选择.     

消化道穿孔伴甲状腺功能亢进危象2例

1　病例报告例 1　男 ,40岁。反复中上腹疼痛 5年 ,时伴返酸、黑便 ,2个月前开始出现多饮、多食、多汗、消瘦。经检查诊为“胃溃疡 ,甲状腺功能亢进”。经口服他巴唑、心得安、雷尼替丁等好转。入院前 9ｈ突然出现剧烈腹痛 ,心慌、胸闷。体查 :急性痛苦面容 ,心肺无明显异常 ,板状腹 ,全腹压痛、反跳痛 ,肝浊音界消失 ,移动性浊音阳性 ,肠鸣音减弱。白细胞 16 .8× 10 9/Ｌ。腹部透视见膈下游离气体。诊断 :胃穿孔。予以胃肠减压 ,吸氧 ,抗感染 ,补液治疗。 2ｈ后出现高热(体温 39.6℃ ) ,脉搏 142次 /ｍｉｎ ,心慌加重 ,并出现意识不清。查…     

食管-胃颈部吻合术后远期并发胃溃疡

食管切除,食管-胃颈部吻合术后远期并发胃溃疡者较少见,我科近年来收治3例,现报告如下:     

两种细胞因子诱导人骨髓多能成体祖细胞向肝样细胞分化的作用

本实验用免疫磁性分离（MACS）方法分选骨髓间充质干细胞（MSCs）亚群MAPCs，用成纤维细胞生长因子-4（FGF-4）及肝细胞生长因子（HGF）诱导其向肝细胞方向分化，并采用不同方法鉴定了细胞分化能力。     

落新妇甙对肝缺血再灌注损伤的保护作用

背景：肝脏是对缺血再灌注损伤最敏感的器官之一。黄酮类化合物落新妇甙可作为递氢体清除氧自由基,从而可能在减轻肝脏缺血再灌注损伤等方面发挥作用。目的：观察落新妇甙对肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用,对其机制进行初步探讨。方法：C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组、模型组、小剂量干预组和大剂量干预组。干预组小鼠于缺血前24h和1h分别给予10或40mg/kg的落新妇甙腹腔注射,然后建立70%部分肝缺血再灌注模型。采集血液和肝脏组织样本。检测血清丙氨酸氨基转移酶活性,ELISA测血清肿瘤坏死因子α水平,化学比色法测定肝组织中超氧化物歧化酶、丙二醛含量。肝脏组织病理学检测。Westernblot检测肝组织中肿瘤坏死因子α蛋白含量,RT-PCR检测肿瘤坏死因子αmRNA。结果与结论：落新妇甙干预能有效降低血清丙氨酸氨基转移酶水平,干预组肝组织丙二醛含量较模型对照组明显下降（P〈0.01）;而超氧化物歧化酶含量明显上升（P〈0.01）;干预组血清肿瘤坏死因子α含量较模型组对照组明显下降（P〈0.01）;小、大剂量干预组肝组织中肿瘤坏死因子α蛋白表达与模型组模型对照组比较渐次降低,与半定量RT-PCR结果相符（小剂量干预组P〈0.05,大剂量干预组P〈0.01）。落新妇甙保护肝脏热缺血再灌注损伤显示出剂量-效应关系趋势。结果提示,落新妇甙干预能减轻小鼠肝脏热缺血再灌注损伤后的炎症反应和脂质过氧化损伤,有效改善肝功能和肝脏病理损害;机制可能在于其能抑制缺血再灌注损伤肝组织中肿瘤坏死因子α的高表达。     

青藤碱对大鼠肝脏缺血再灌注后树突状细胞功能的影响

目的 观察青藤碱对大鼠肝移植缺血再灌注后肝脏树突状细胞功能的影响.方法 应用"二袖套法"建立大鼠肝移植模型,48只BN大鼠分为对照组、低剂量(40 μg/g)和高剂量青藤碱组(80 μg/g),每组16只,术后第3天切取肝脏,分离、纯化肝脏树突状细胞.流式细胞仪对树突状细胞OX62、主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex Ⅱ,MHC-Ⅱ)和CD86等分子表型进行分析.RT-PCR测定细胞因子IL-12、IL-1、TNF-a mRNA表达水平,Western blot检测树突状细胞表达的Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4).结果 青藤碱处理组树突状细胞呈现不成熟的表型,树突状细胞表面MHC-Ⅱ和CD86表达显著下降.树突状细胞表达IL-12、IL-1、TNF-a mRNA和TLR4蛋白水平明显降低.结论 青藤碱能明显抑制大鼠肝移植缺血再灌注后肝脏树突状细胞成熟和免疫功能.