髓样细胞表达的激发型受体家族的研究进展

髓样细胞表达的激发型受体(TREM)是新近发现的免疫球蛋白超家族的一个受体家族,它主要包括TREM-1、TREM-2、TLT-1和TLT-2四个家族成员.自2000年发现TREM-1以来,TREM家族就成为了人们关注的对象,特别是近年来针对TREM-1与炎症反应的关系及TLT-2配体的研究更是成为了研究的热点.因此对TREM家族全面的认识,有助于其家族信号通路和生物学功能的进一步研究.     

新型冠状病毒核酸检测高循环阈值情况分析

目的探讨新型冠状病毒核酸检测出现高循环阈值(Ct值)情况的原因。方法用实时荧光RT-PCR法检测疑似新型冠状病毒肺炎患者鼻咽拭子、肛拭子样本新型冠状病毒核酸,回顾性分析Ct值处于33~38的高Ct值样本在同一患者重复采样检测、不同品牌基因扩增仪检测及不同实验室相同型号仪器检测情况下结果的一致性。结果8例单靶位高Ct值阳性患者次日重复采样检测结果双靶标均为阴性。7例高Ct值样本有6例同一样本核酸在LC480及ABI 75002台扩增仪上检测结果不一致,包括ORF1ab基因检测结果不一致4例,N基因不一致4例,其中ORF1ab基因和N基因均不一致2例。5例高Ct值样本不同实验室相同基因扩增仪结果均不一致。结论该病毒核酸检测高Ct值时结果重复性较差,需要其他检测方法同时进行补充检测。     

慢性乙型肝炎患者外周血e抗原滴度及病毒载量与T细胞亚群分布的关系

目的 分析慢性乙型肝炎患者HBeAg滴度及HBV DNA载量与T细胞亚群分布的关系.方法 选取苏州市第五人民医院2013年1-8月住院乙型肝炎患者87例为研究对象,50例健康体检者为正常对照,采用化学发光微粒子酶免疫法测定患者外周血血清中HBeAg滴度;采用实时荧光定量PCR法检测外周血HBV DNA;采用流式细胞术测定患者和对照外周血T细胞亚群数量.87例乙型肝炎患者,HBeAg阳性54例,阴性33例;HBV DNA阳性60例,阴性27例.54例HBeAg阳性患者根据HBeAg含量分成3组:HBeAg低滴度组、中滴度组和高滴度组.60例HBV DNA阳性患者根据病毒载量分成3组:HBV DNA低载量组、中载量组和高载量组.结果 HBeAg阳性组的CD3+和CD4+T细胞所占百分比分别为(60.36±6.62)％和(29.26±7.62)％,均低于对照组(t=8.95、7.19,P均＜0.05);CD8+T细胞所占百分比为(26.17±6.34)％,高于对照组的(23.70±4.53)％(t=-2.27,P＜0.05).不同HBV DNA载量组与正常对照组之间CD3+、CD4+和CD8+T细胞百分比的差异均有统计学意义(F=2.93、3.97和7.67,P均＜0.05).HBeAg阴性、HBeAg阳性与正常对照组之间CD3+、CD4+、CD8+T细胞所占百分比的差异均有统计学意义(F=30.68、22.86和3.31,P均＜0.05).结论 乙型肝炎患者的外周血HBeAg滴度及HBV DNA载量不同,其T细胞亚群分布也不同.测定T细胞亚群或可了解患者的免疫状态,为及时调节患者的免疫功能和抗病毒治疗的临床应用提供依据.     

转染Lgr5基因对结肠癌细胞株体外生物学特性影响的研究

目的 构建pIRES2-EGFP-Lgr5重组表达载体,获得SW480/Lgr5瞬时基因转染细胞株,并探讨转染Lgr5基因对结肠癌细胞株生物学特性的影响.方法 运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从结肠癌组织中获得Lgr5全长基因,经双酶切(XhoI和BamHI)连接入真核表达载体pIRES2-EGFP中,利用脂质体法转染SW480细胞,经流式细胞术、Western blot、免疫细胞化学法检测Lgr5分子的表达;CCK-8法和悬滴实验分析Lgr5对结肠癌细胞增殖率和成球能力的影响,划痕实验分析Lgr5对结肠癌细胞迁移能力的影响.结果 成功构建真核表达载体pIRES2-EGFP/hLgr5,并获得SW480/Lgr5瞬时基因转染细胞株;转染Lgr5基因的结肠癌细胞体外增殖速度加快,形成的细胞球大而紧密但迁移能力下降.结论 Lgr5基因转染促进结肠癌细胞株体外的生长,为进一步研究人Lgr5分子的生物学特性及其在结肠癌中的作用机制奠定了基础.     

肺结核患者外周血sIL-2R、IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α的检测意义

目的分析未抗痨治疗的结核患者及已经有效治疗的患者s IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表达的差异,以探讨上述指标的变化及意义。方法采用免疫化学发光法检测未抗结核治疗患者(A组)、抗结核治疗有效患者(B组)及健康组(C组)上述指标的表达水平,并比较各组差异。结果 A组C组相比较,均明显升高(P0.01)。B组s IL-2R和IL-6的含量较A组明显下降,分别为(509.41±96.52)U/ml vs(1207.09±105.33)U/ml和(8.91±3.22)pg/ml vs(37.84±15.46)pg/ml(P0.01);IL-8和TNF-α在B组中的含量较A组明显下降,分别为(12.78±3.69)pg/ml vs(23.82±5.67)pg/ml和(14.33±6.82)pg/ml vs(32.41±11.66)pg/ml(P0.05);而IL-10水平未发生明显变化。结论肺结核病患者s IL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α水平明显增加,抗结核治疗后上述因子水平明显降低,初步提示s IL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α表达水平与结核活动程度相关,有望进一步作为评价肺结核活动程度的指标。     

乙型肝炎病毒基因型不同的患者肝功能相关指标及免疫功能变化分析

目的 探讨基因型不同的乙肝患者肝功能、病毒载量和免疫功能的差异及临床意义.方法 145例乙肝患者划分两个年龄段:小于35岁和大于35岁,全部应用实时荧光PCR法进行乙型肝炎病毒(HBV)基因分型检测;同时采用实时荧光PCR法检测血清HBV-DNA载量;用全自动生化分析仪和流式细胞仪检测各组肝功能相关指标及淋巴细胞亚群含量.结果 145例HBV患者仅为两种基因型,B基因型62例(42.76％),C基因型83例(57.24％).B型患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和HBV-DNA均稍高于C型,分别是[(263.6±36.13) U/L比(243.1±37.69) U/L]、[(128.1±15.84) U/L比(123.6±19.1)U/L]和[(6.131±0.2133)比(5.875±0.1725)],进行统计学分析后差异均无统计学意义(P＞0.05),但划分年龄段后,大于35岁的患者,B型ALT、AST和HBV-DNA均显著高于C型(P＜0.05),分别是[(227.6±34.52) U/L比(144.8±19.92) U/L]、[(124.5±19.4) U/L比(79.79±12)U/L]和[(6.166±0.2582)比(5.228±0.2644)].淋巴细胞亚群分析可见,所有年龄段或大于35岁患者均是B型的CD4+T细胞比例显著低于C型[(32.97±0.95)％比(35.81±0.85)％](P＜0.05),CD8+T细胞显著高于C型[(30.19 ±0.97)％比(27.44±0.92)％](P＜0.05),而CD3+T细胞、B细胞、NK细胞在B型和C型患者中则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 145例HBV患者B、C型的分布未见显著差异;肝功能、病毒载量及T细胞亚群在年龄较大的B、C两组患者中存在显著差异.     

HBV感染不同病程中病毒载量与肝功能相关指标及免疫功能的变化分析

目的 探讨HBV感染者外周血肝功能主要指标、T细胞亚群以及病毒载量在不同病程中的变化及其临床意义.方法 170例HBV感染患者根据病程分成急性乙肝组(18例)、慢性乙肝组(73例)、肝硬化组(41例)及肝癌组(38例),正常对照组40例.用全自动生化分析仪和流式细胞仪检测各组肝功能相关指标及T细胞亚群含量;采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量.结果 四组实验组与正常对照相比谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)均升高,差异具有统计学意义(P＜0.05),且以急性乙肝升高最为显著,慢性乙肝次之,组间比较可见慢性乙肝患者组比急性乙肝患者组ALT、AST有所下降,且差异具有统计学意义(P＜0.05),而肝癌患者组和肝硬化组之间则变化不显著,差异无统计学意义(P＞0.05);碱性磷酸酶ALP的升高见于肝癌患者组,慢性乙肝患者组ALP水平较低;各组总蛋白(TP)均在正常参考范围内.四组实验组外周血CD3+T细胞均比正常对照组低,其中肝癌组、肝硬化患者组降低最为明显,CD4+T细胞比例上升见于急性乙肝组,而CD8+T细胞的比例在急性乙肝患者组中最低.外周血中HBV病毒核酸载量升高的最为明显的是慢性乙肝患者组,而急性乙肝患者组、肝硬化患者组、肝癌患者组的HBV-DNA水平比较低,以急性乙肝最低,各组与其相比均具有统计学差异(P＜0.05).结论 HBV不同病程中患者的肝功能相应指标、T细胞亚群表达、HBV-DNA含量存在显著差异,联合检测这些项目可为临床正确评估患者的病情及病程提供相应指导,为疾病转归的判断及治疗提供可靠的依据.