HCV与HIV混合感染研究进展

艾滋病病毒(HIV)与丙型肝炎病毒(HCV)感染是世界性的重要公共卫生问题,因二者存在相同的传播途径,其混合感染的发生率极高.HIV感染可导致免疫抑制,加速HCV发展为慢性肝病、肝硬化及原发性肝癌,同时HCV感染可加速HIV感染的疾病发展进程.从流行病学方面对HIV/HCV混合感染的作用特点、治疗方面进行综述,深入探讨HIV与HCV混合感染相互影响特点,为将来进行关于HIV和HCV混合感染研究提供方向.     

HCV非结构蛋白5A对HIV长末端重复序列影响的初步探讨

目的本研究拟探讨HCV非结构蛋白5A(NS5A)对HIV长末端重复序列(long terminal repeat,LTR)影响,从而为HCV对HIV的影响提供实验依据。方法将构建的LTR启动子驱动的荧光素酶(Luc)报告基因表达质粒(pGL3-LTR-Luc)和含HCV NS5A基因的表达质粒pCNS5A共转染肝癌细胞株(Huh7细胞),采用免疫细胞化学技术、Western Blot及逆转录聚合酶链反应检测HCV NS5A蛋白及mRNA的表达;本实验分三组,将质粒pGL3-LTR-Luc(空白组)、质粒pRc/CMV+pGL3-LTR-Luc(对照组)、质粒pCNS5A+pGL3-LTR-Luc(实验组)分别转染Huh7细胞,48 h后收集细胞,采用Luc活性检测LTR的活性,以观察HCV NS5A对LTR的调控影响。所得荧光活性值以均数±标准差表示,采用Levene's方差齐性检验,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较行LSD-t检验。结果转染pcNS5A质粒的Huh7细胞质经RT-PCR及Western Blot检测,HCV NS5A mRNA及蛋白在细胞中获得表达。方差分析结果提示LTR荧光活性在三组间有明显的差异(F=7.876,P=0.002),进一步比较各组间的差异,结果提示共转染质粒pcNS5A+pGL3-LTR-Luc组的Huh7细胞中Luc相对活性(22 476±4471)明显高于单转染pGL3-LTR-Luc组(15 887±3039,P=0.002)及共转染质粒pRc/CMV+pGL3-LTR-Luc组(16 321±4162,P=0.008),差异有统计学意义。结论表达HCV NS5A的质粒pCNS5A成功转染至Huh7细胞;HCV NS5A蛋白能激活HIV LTR,提示HCV NS5A可能为HCV促进HIV复制的分子机制之一。     

聚乙二醇干扰素α-2a治疗慢性丙型肝炎患者程序性死亡受体-1和Toll样受体3与4的表达及其意义

目的 观察聚乙二醇干扰素(Peg-IFN) α-2a联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎初治患者抗病毒治疗48周及停药后随访至72周外周血单个核细胞(PBMC)表面程序性死亡受体(PD)-1、Toll样受体(TLR)3、TLR4表达率的变化,探讨PBMC表面PD-1、TLR3、TLR4是否参与了宿主抗HCV固有免疫和获得性免疫过程,及其与持续病毒学应答的关系.方法 收集慢性丙型肝炎初治患者23例及正常人10名,慢性丙型肝炎患者均接受48周Peg-IFN α-2a(180 μg/周)联合利巴韦林口服(15 μg·kg-1·d-1)抗病毒治疗.分别在0、4、12、24、48、72周时,检测患者血清中ALT、HCV RNA变化;分离患者PBMC,流式细胞术检测不同时间点患者和正常人PBMC表面PD-1、TLR3、TLR4的表达率,分析持续病毒学应答(SVR)与非SVR患者上述指标的变化和差异.多组资料之间的比较采用one way ANOVA模块进行t检验;两组之间比较采用独立样本t检验.结果 丙型肝炎患者基线时与正常人PBMC表面PD-1、TLR4、PDl/TLR4表达率分别为:45.44％±7.32％、57.74％±15.45％、35.42％±7.97％与16.82％±4.13％、21.09％±2.89％、14.12％±2.89％,丙型肝炎患者基线水平较正常人明显升高(t值分别为4.675,5.148,2.549,P值均＜0.05).正常人TLR3及PD1/TLR3表达率较丙型肝炎患者基线水平稍低,但差异无统计学意义(P＞0.05).在Peg-IFN α-2a联合利巴韦林治疗期间,慢性丙型肝炎患者PBMC上PD-1及TLR4表达率逐渐下降,TLR3表达率逐渐升高;且SVR患者PBMC上PD-1和TLR3表达率的变化与非SVR患者的差异明显(P＜0.05).结论 慢性丙型肝炎患者PBMC上PD-1、TLR4、PD1/TLR4高表达,初治患者用Peg-IFN α-2a治疗可以使这些指标表达下降,TLR3的表达率升高;PBMC表面PD-1和TLR3的表达可能与患者出现SVR密切相关.     

HCV与HIV混合感染研究进展

艾滋病病毒(HIV)与丙型肝炎病毒(HCV)感染是世界性的重要公共卫生问题,因二者存在相同的传播途径,其混合感染的发生率极高.HIV感染可导致免疫抑制,加速HCV发展为慢性肝病、肝硬化及原发性肝癌,同时HCV感染可加速HIV感染的疾病发展进程.从流行病学方面对HIV/HCV混合感染的作用特点、治疗方面进行综述,深入探讨HIV与HCV混合感染相互影响特点,为将来进行关于HIV和HCV混合感染研究提供方向.