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1.
细胞因子Midkine融合蛋白的表达及其单克隆抗体的制备与应用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:克隆细胞因子midkine(MK)基因,表达其融合蛋白,制备抗MK单克隆抗体(mAb)并检测MK在肿瘤细胞中的表达。方法:利用MK基因的特异性引物,通过RT-PCR从人肾癌组织mRNA中扩增人MKcDNA分子。将其定向克隆于原核表达载体中,在大肠杆菌中表达MS2-MK融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,用传统的杂交瘤技术,进行细胞融合、筛选、克隆化并制备mAb腹水。用ELISA法分析其Ig亚类,用免疫细胞化学染色法检测MK在肿瘤细胞中的表达。结果:成功地克隆出MK基因并表达了MS2-MK融合蛋白。通过免疫和筛选,获得2株分泌小鼠抗人MKmAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb的Ig亚类分别为IgG1和IgG2a。免疫细胞化学染色显示,2株mAb与人胃癌细胞株MGC803和胃癌组织呈强阳性反应。结论:在原核细胞中获得MS2-MK融合蛋白的表达,并制备出抗MK的mAb,为研究MK的生物学活性提供了条件。 相似文献
2.
益气活血通腑法对类2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究益气活血通腑中药(加味桃核承气汤)对类2型糖尿病大鼠的作用及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响。方法:采用低剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射加高热量饲料喂养导致大鼠类2型糖尿病模型,灌胃给药4周,检测糖耐量、空腹血清胰岛素及骨骼肌GLUT 4mRNA表达量的变化。结果:造模后大鼠注射葡萄糖后30、60、120min血糖显著升高,血清空腹胰岛素水平无明显变化,骨骼肌GLUT4 mRNA表达量显著降低。给药4周后,各药对空腹血清胰岛素水平和注糖后30、60min血糖无明显影响,但中药低剂量、二甲双胍、罗格列酮可使注糖后120min血糖下降;罗格列酮尚可降低空腹血糖。二甲双胍可使骨骼肌GLUT4mRNA表达量明显升高,中药高剂量可防止GLUT 4mRNA表达量的降低,但罗格列酮对GLUT4 mRNA表达量的降低无影响。结论:低剂量STZ腹腔注射加高热量饲料喂养可导致大鼠类2型糖尿病胰岛素抵抗样改变,益气活血通腑中药可改善此模型的糖耐量异常,其作用与增强其骨骼肌GLUT4基因表达,促进骨骼肌对葡萄糖的摄取和利用有关。 相似文献
4.
目的:探讨肾动脉支架置入术,对肾动脉狭窄导致缺血性肾病患者的肾功能影响。方法:2008年1月至2010年1月,对肾动脉狭窄合并有肾功能不全的患者,采用肾动脉支架进行血管腔内治疗。术后1,3,6及12个月定期复查血清肌酐水平。结果:共入选26例患者进行了肾动脉支架治疗,男性14例,女性12例,平均年龄(62±14)岁,术前肾血清肌酐水平为(151.58±11.86)umol/L,术后1个月血肌酐水平为(149.96±16.39)umol/L,与术前差异无统计学意义(P=0.551)。术后3,6及12个月肌酐分别为〔(140.38±27.07)umol/L,P=0.02〕,〔(137.15±30.73)umol/L,P=0.005〕,〔(135.38±33.37)umol/L,P=0.005〕,均低于术前水平,差异具有统计学意义。结论:肾动脉腔内支架成形术,可改善肾动脉狭窄患者的肾功能。 相似文献
5.
目的 建立一种SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测血清miR-21方法,并初步探讨其对乳腺癌诊断的应用价值.方法 用Trizol试剂提取血清总RNA.用茎环引物将miR-16(作为miR-21内参基因)与miR-21分别逆转录成相应cDNA.再用SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR对cDNA进行扩增、检测.然后,通过信噪比(signal to noise ratio,SNR)分析试验的准确性;通过熔解曲线评价试验的特异性;通过标准曲线的R2评估试验的精确性;通过批内和批间差异计算试验的稳定性.另外,用自建方法检测33例乳腺癌患者、18例乳腺良性疾病和49名健康人群血清miR-21和miR-16水平,并根据乳腺癌组与健康对照组中miR-21相对表达量确定临界值,以评价其对乳腺癌诊断的敏感度、特异度.结果 通过PCR退火与延伸在温度和时间上的优化,本试验所建立方法SNR≥99.36%;熔解曲线为单峰;标准曲线R3=0.994 8;批内CV< 1.5%,批间CV< 4%.以miR-16为内参,用自建SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测乳腺癌组、良性疾病组与健康对照组血清miR-21的相对表达量分别为20.83±18.18、20.86±10.11和9.33±4.44,经Kruskal Wallis检验,3组间表达量差异有统计学意义(x2=16.92,P<0.001),且健康对照组与乳腺癌组、健康对照组与良性疾病组间的差异均有统计学意义(Z值分别为-2.58、-4.42,P均≤0.01),而乳腺癌组与良性疾病组血清miR-21表达量差异无统计学意义(Z=-0.51,P=0.608).以miR-21相对表达量18.32为临界值,其对乳腺癌诊断的敏感度为51.5%(17/33),特异度为93.9%(46/49).结论 建立了一种较敏感、特异、稳定的SYBRGreen Ⅰ荧光定量PCR检测血清miR-21方法,该方法对乳腺癌的诊断可能有一定价值. 相似文献
6.
北京地区13 336例成人空腹血脂水平分析 总被引:17,自引:0,他引:17
目的 通过检测健康查体者空腹血脂水平来了解北京地区人群血脂水平现状及其血脂异常患病率.方法 应用日立7 170全自动生化分析仪检测北京地区13 336例成人空腹血脂,血脂指标包括甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),比较不同性别和年龄组间血脂水平差别及血脂异常患病率的差异.结果 总体血脂异常患病率59.9%,男性71.6%,女性47.2%.男性TC平均(4.89±0.87)mmol/L、LDL-C平均(3.33±0.84)mmol/L、HDL-C平均(1.28±0.30)mmol/L、TG中位数1.32 mmol/L;女性TC平均(4.79±0.94)mmol/L、LDL-C平均(2.99±0.89)mmol/L、HDL-C平均(1.53±0.34)mmol/L、TG中位数0.9mmol/L.男性和女性4种血脂成分异常患病率均随年龄增加而增高(P<0.01).TC、LDL-C、TG水平随年龄增加而增高(P<0.01),HDL-C水平随年龄的增加有降低趋势(P<0.01).TC在25~44岁间男性高于女性(P<0.01),在55岁以上女性显著高于男性(P<0.05).LDL-C在18~44岁间男性高于女性(P<0.01),在45~74岁女性显著高于男性(P<0.01).HDL-C水平各年龄组女性明显高于男性(P<0.01).TG在18~54岁男性显著高于女性(P<0.01),在55~64岁组两性间无差异,64岁以上女性高于男性(P<0.05).结论 北京地区成人中血脂异常患病率较高,并且随年龄增大而增高,男女性别间血脂异常患病率差异有统计学意义. 相似文献
7.
目的探讨腔内治疗老年冠心病合并肾动脉狭窄(RAS)的临床疗效。方法回顾性分析了2008年6月至2011年5月在该院治疗的60例老年冠心病合并RAS患者的临床资料,60例患者根据治疗方法不同分为观察组和对照组,观察组患者给予腔内治疗,对照组采用常规保守治疗。记录手术情况,术后随访12个月评价肾功能、血压以及再狭窄发生率。结果观察组手术成功率100%。观察组高血压获益率和肾功能获益率为86.7%、90.0%,显著高于对照组(70.0%、63.3%)(P<0.05)。观察组随访12个月无再狭窄发生,对照组有7例(23.3%)出现再狭窄。结论腔内治疗冠心病合并RAS手术成功率高,可以有效改善患者血压和肾功能,术后无再狭窄发生,近期随访效果满意。 相似文献
8.
阴道毛滴虫可致滴虫性阴道炎,是妇科常见病之一。为了解阴道毛滴虫在山西妇女中的感染情况,我们曾于1973年9月对山西省朔县某村部分妇女和1975年3~6月对太原市城区妇女病普查的同时,进行阴道毛滴虫感染情况调查,以及山医二院妇科门诊部分就诊病例的化验检查,现将调查结果简报于后,供参考。调查方法:用消毒扩阴器和棉签,取阴道后穹窿分泌物,作生理盐水悬滴法涂片、 相似文献
9.
目的 研究三黄降糖方对糖尿病大鼠心肌病变的作用及对心肌肾素一血管紧张素系统(RAS)的影响。方法 腹腔注射链脲菌素(STZ)造成大鼠糖尿病模型,于造模后2周起分别灌胃三黄降糖方(50g/kg)、达美康(20mg/kg)、卡托普利(15mg/kg)和尼群地平(30mg/kg),连续8周,检测空腹血糖、血清胰岛素(Ins)、心脏/体重比值及心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素转换酶(AC:E)和醛固酮(ALD),以逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌血管紧张素Ⅰ型受体(ATIR)mRNA表达。结果 与正常对照组比较,模型对照组空腹血糖升高(P<0.01),血清Ins水平降低(P<0.01),心脏/体重比值升高(P<0.01),心肌AngⅡ含量增加(P<0.01),ACE活性升高(P<0.01),ALD含量增加(P<0.05),心肌ATIR mRNA表达增加(P<0.05)。三黄降糖方、达美康、卡托普利和尼群地平均可使模型大鼠血糖轻微降低,但各药均不升高血清Ins水平。三黄降糖方、达美康、卡托普利和尼群地平均可使心脏/体重比值下降,心肌AngⅡ含量、ACE活性和ATIR mRNA表达量均下降,三黄降糖方和卡托普利还可使心肌ALD含量降低。结论 在糖尿病病程10周,可引起心肌肥大,心脏局部RAS激活与糖尿病心肌病变的发生有关;三黄降糖方、达美康、卡托普利和尼群地平均可对抗糖尿病心肌病变,其作用与抑制心脏局部RAS激活有关。 相似文献
10.
目的 探讨腹腔镜与开腹全子宫加双侧输卵管切除术对子宫疾患患者的疗效和术后性生活质量的影响。方法 选择2018年1月至2019年9月在铜陵市人民医院接受全子宫加双侧输卵管切除手术治疗的115例子宫疾患患者,根据手术方式不同将患者分为腹腔镜组(n=43)和开腹组(n=72),腹腔镜组采用腹腔镜下全子宫加双侧输卵管切除术治疗,开腹组采用传统的经腹式全子宫加双侧输卵管切除术治疗。比较两组患者手术时间、术中出血量、术后住院时间、术后通气时间、住院总费用以及阴道残端并发症与术后性生活质量等情况。结果 腹腔镜组患者术后通气时间及术后住院时间短于开腹组,术中出血量明显少于开腹组,差异均有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组患者手术时间长于开腹组,住院总费用高于开腹组,差异均有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组术后阴道残端肉芽增生发生率为7.9%,低于开腹组的29.7%,且术后性交痛和性交不适较开腹组也明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 腹腔镜全子宫加双侧输卵管切除术较传统开腹全子宫加双侧输卵管切除临床效果更好,患者术后性生活质量更满意,值得临床推广。 相似文献