肺表面活性物质诱导剂治疗呼吸衰竭的临床分析

当今结核病仍是影响人类健康流行最广，病死率最高的感染性疾病之一，而呼吸表竭又是结核病危重期的并发症，也是导致肺结核患者死亡的主要原因之一。呼吸衰竭是肺输入氧和排出二氧化碳的功能不能满足人体代谢的需要引起的一系列生理功能和代谢紊乱的临床综合征。因此，快速、有效救治呼吸衰竭成为呼吸科医生不断探索的课题。我院在积极治疗原发病．常规治疗呼吸衰竭的基础上，应用溴环已胺醇静脉给药及超声雾化吸入，取得了较满意的临床疗效。     

半套式PCR和DNA探针技术检测Q热立克次体

目的 建立半套式PCR和DNA探针技术由于检测Q热立克次体。方法 依据已知的Q热立克次体的16S和23S rRNA基因及其间区的序列。设计3条引物,建立了扩增16S－23S mRNA基因间区的半套式PCR方法,并将扩增片段制成探针,建立了斑点杂交技术。结果 10株Q热立克次体分离株均可扩增出572bp的PCR条带,而对照菌都为阴性,此半套式PCR方法的灵敏度高达1pg;用九里株扩增片段标记后制成的探针,与10个Q热立克次体分离株的全DNA呈阳性杂交,对照菌为阴性,此杂交方法的灵敏度为0．5ng。结论 基于Q热立克次体16S－23S rRNA基因间区的半套式PCR和DNA探针技术具有较好的特异性和灵敏度,可联合应用于Q热的病原学诊断。     

血清抗Sm抗体ELISA检测方法的建立

目的：建立血清抗Ｓｍ抗体的ＥＬＩＳＡ检测方法。方法：应用纯化的Ｓｍ抗原,采用棋盘滴定等方法建立ＥＬＳＩＡ方法检测血清抗Ｓｍ抗体的最适实验条件。结果：建立了血清抗Ｓｍ抗体的ＥＬＩＳＡ检测方法。ＳＬＥ患者血清抗Ｓｍ抗体的阳性率为２９．２Ａ％,正常人和其它自身免疫病患者未查到此抗体。     

舒适护理运用于手术室护理的探讨

目的探讨舒适护理在手术室的运用方式,使手术病人安全、舒适地接受手术。方法对300例15～80岁手术病人在整体护理中运用舒适护理方式,并评价其效果。结果300例手术病人均有生理等方面的改善,术后随访满意度为99.8%。结论舒适护理在手术室护理中的运用提高了护理服务质量,充实了“以人为本”的整理护理内涵。     

五日热巴通体重组外膜蛋白HbpA的研制和抗原性分析

为克隆并表达五日热巴通体外膜蛋白HbpA的基因,并对其抗原性进行初步分析,采用PCR方法从五日热巴通体基因组DNA扩增hbpA基因,将目的基因片段插入原核表达质粒pET32a（＋）,构建重组质粒pET32a（＋）-hbpA;将构建的重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）并诱导目的基因表达,以SDS-PAGE电泳以及免疫印迹实验分析表达的目的蛋白。SDS-PAGE电泳分析发现pET32a（＋）-hbpA转化菌高效表达一48kDa重组蛋白;免疫印迹分析发现该蛋白与其免疫血清发生强烈反应;间接免疫荧光分析发现该重组蛋白免疫血清能特异识别五日热巴通体。实验结果表明五日热巴通体外膜蛋白HbpA的基因已在大肠杆菌中高效表达。     

综合医院和儿童专科医院流感病原学监测结果比较分析

目的通过对北京市西城区综合医院和儿童专科医院流行性感冒(简称流感)病原学监测结果进行比较分析,了解儿童流感流行规律,为制订流感防控措施提供依据。方法由两家哨点医院每周随机采集流感样病例的咽拭子共40份,提取病毒RNA,应用RT-PCR方法进行检测。结果综合医院和儿童专科医院流感病原学监测阳性率(21.8%vs.14.9%)比较,差异有统计学意义(P0.001)。综合医院流感病原学监测阳性率最高的为≥60岁年龄组(31.3%)。儿童专科医院阳性率最高的为4~14岁年龄组(26.7%)。综合医院和儿童专科医院11月至次年4月均处在流感高峰期,呈现典型的北方地区流行特征,但儿童专科医院在1月和2月有个流行小低谷。两家医院均存在甲型H3亚型、甲型H1N1和乙型3种流感病毒流行,并以甲型H3亚型和乙型流感病毒为优势毒株。结论以综合医院作为参照,儿童专科医院的流感监测质量稳定可靠。儿童专科医院缺少24~60岁年龄组和≥60岁年龄组是两家医院间的流感病原学监测阳性率差异有统计学意义的主要原因。儿童的流感疫苗接种率较高,疫苗保护效果比较好。     

实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体

目的建立检测恙虫病东方体的实时荧光定量PCR(quantitative real-ti me PCR)方法。方法根据恙虫病东方体56kD外膜蛋白基因序列设计引物和探针,以克隆的56kD基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。结果建立的荧光定量PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.999)。荧光定量PCR检测恙虫病东方体的灵敏度约为套式PCR的100倍,并且具有良好的重复性。用该定量PCR检测其它相关立克次体和病原菌DNA样本,检出结果均为0。用该定量PCR检测恙虫病东方体实验感染小鼠的血、脾脏、肺脏、肝脏标本,结果脾脏中东方体出现最早和检出量最多,肝脏和肺脏次之。血中的恙虫病东方体量较低。结论本研究建立的荧光定量PCR方法具有很高的特异性和敏感性,可用于东方体感染早期血样本的快速检测作恙虫病感染早期诊断,并且可以定量分析评价恙虫病东方体感染的程度。     

检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究

目的：建立聚合酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的方法，并评价共临床应用的价值。方法：依据结核分枝杆菌rpoB基因的耐利福平决定区设计引物，用PCR从临床分离株和直接从痰标本中扩增rpoB基因片段；对扩得的rpoB基因片段做DNA SSCP分析，并随机测定rpoB片段的序列。结果：PCR从所有212株结核分枝杆菌中均扩得230bp片段135份抗酸染色阳性的痰标本中，有113份扩得阳性片段（83．7％），在SSCP分析中，140份经L－J药敏试验检测为利福平耐受的结核分枝杆菌，有130份有rpoB基因突变（符合率为92．9％），72份经L－J药敏试验检测为利福平敏感的菌，有67份的rpoB基因无突变（符合率为93．1％），测序分析发现57份经SSCP检测为突变的rpoB片段均有序列改变，10份经SSCP分析为无突变的有8份无序列改变，SSCP与测序结果的符合率为94．0％，在本研究的菌株中，耐多药结核病（MDR－TB）占76．4％（107／140），有92．5％（99／107）耐多药菌株经SSCP检测有rpoB突变。结论：建立的PCR－SSCP分析方法，是一种较准确和稳定的检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的方法，可用于临床快速分析患者结核分枝杆菌对利福平的耐药性，并可作为MDR－TB判断的一个重要指标。