高表达重组人组织激肽释放酶7基因的前列腺癌单克隆细胞株的构建

目的：建立稳定高表达重组人组织激肽释放酶7基因（ KLK7）的前列腺癌细胞株DU145,为前列腺癌发生机制的研究奠定基础。方法 PCR法扩增KLK7 cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3．1上;经过限制性内切酶酶切、DNA测序验证正确后,以脂质体法转染人前列腺癌DU145细胞;通过G418筛选,每个单克隆细胞扩大培养,建立稳定转染KLK7的DU145单克隆细胞株。采用Western blot 法检测DU145细胞株KLK7表达。结果酶切鉴定及DNA 测序分析显示 pcDNA3．1-KLK7真核表达载体成功构建;转染后,成功获得稳定高表达KLK7的DU145单克隆细胞株。 Western blot 结果显示,pcDNA3．1-KLK7转染的DU145细胞KLK7表达量明显高于转染空载体组细胞（P＜0．01）。结论 pcDNA3．1-KLK7真核表达载体的建立及稳定高表达KLK7的前列腺癌单克隆细胞株的建立,为研究KLK7在前列腺癌发生发展中的作用提供了条件。     

沈阳市铁西区900名3～6岁儿童屈光状态分析

为了解儿童的屈光情况,沈阳市铁西区妇幼保健所眼科2003-2006年对辖区部分幼儿园的900名3～6岁儿童进行了连续数年的屈光状态调查,结果报道如下. 1 对象与方法     

术前中性粒细胞与淋巴细胞比值预测高级别脑胶质瘤患者预后的价值分析

目的:探讨术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio, NLR)对脑胶质瘤患者临床预后的预测价值。方法:回顾性分析2011年02月至2016年11月在临沂市人民医院经术后病理确诊为胶质瘤的247例患者的病历资料。采用Cox回归模型分析影响患者预后的临床病理因素,并确定影响其预后的独立危险因素。针对独立危险因素,采用基于最小P值法的X-tile软件确定其预后危险分层的最佳截断值。结果:多因素分析显示NLR(P=0.048,HR=1.12,95%CI:1.00～1.26)、年龄(P=0.001,HR=1.04,95%CI:1.01～1.06)、病理诊断(P=0.001,HR=2.23,95%CI:1.51～3.31)、IDH1(P=0.040,HR=0.37,95%CI:0.14～0.95)是影响胶质瘤患者总生存期(overall survival, OS)的独立影响因素。术前NLR<2.21组预后最好,NLR>3.15组预后最差,NLR≥2.21并且≤3.15预后中等。Kaplan-Meier生存分析显示高NLR组生存时间明显短...     

结核分枝杆菌rmlA基因的生物信息学分析

目的:分析结核分枝杆菌rmlA基因及其编码的蛋白质结构和特征,获得其生物学信息。方法:从GenBank中获取rmlA基因的核酸序列,应用DNAMAN、Geneious Pro等软件及生物信息学在线分析工具,预测rmlA基因及其编码的蛋白质基本理化特征、亚细胞定位、二级结构、抗原表位等;建立蛋白质三级空间结构模型;进行多序列同源比对并构建分子进化树。结果:rmlA基因编码α-D-葡萄糖-1-磷酸胸苷转移酶。其具有288个氨基酸残基,理论分子量为31 492.0Da。该蛋白无信号肽,位于细胞质,无明显跨膜结构,存在14个潜在抗原表位。二级结构以α螺旋为主,蛋白序列、结构保守,为分枝杆菌所特有。结论:rmlA基因及其编码的蛋白质可作为研发新型免疫诊断方法、结核疫苗、新药的理想侯选分子靶标。     

水溶性金属卟啉的合成、表征及其清除有毒活性氧的研究

目的合成并结构表征了4种水溶性金属卟啉配合物［5，10，15，20-四［4-(4′-吡啶-1)丁氧基苯基］金属卟啉溴化盐［锌卟啉(I)、铜卟啉(II)、锰卟啉(III)和钴卟啉(IV)］，作为抗活性氧(O^-₂，H₂O₂，HO·)模拟酶。方法 核黄素-蛋氨酸光照测其清除O^-₂作用，H₂O₂氧化Vit C法测其催化H₂O₂的分解，Fenton-苯甲酸钠荧光法测其对HO·清除作用，小鼠肝匀浆法测其抗脂质过氧化作用。结果1.0×10^-5~1.0×10^-6 mol·L^-1均具有良好的清除O^-₂作用；1.5×10^-6~1.0×10^-6 mol·L^-1均具有分解H₂O₂作用；2.0×10^-8~1.0×10^-8 mol·L^-1均具有清除HO·的功能；1.0×10^-7 mol·L^-1均可使脂质过氧化产物明显减少。结论合成4种水溶性金属卟啉配合物可作为抗多种活性氧(O^-₂，H₂O₂，HO·)模拟酶。