利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位

目的　用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体 (3- 4 7-O)作为分子探针 ,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位 ,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果　经过三轮的亲和筛选 ,得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm6 2和 gm6 8,其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS。竞争ELISA实验表明 ,10 10转导单位噬菌体 gm6 8对肠炎沙门氏菌与 3- 4 7-O结合的抑制率达到 6 5 % ,而噬菌体 gm6 2的抑制率仅为 2 0 % ,且 gm6 8可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体 ,而gm6 2则不能。 结论　实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位。     

直接ELISA和PCR相结合快速检测样品中的沙门氏菌

目的 通过样品试验，得到优化的沙门氏菌检测方法。方法 在单抗直接ELISA和PCR法检测沙门氏菌的基础上，将PCR法和单抗直接ELISA两种快速检测方法进行比较研究。结果 直接ELISA方法结合PCR方法对城区141份水样、2002年春季饮食行业工作人员健康检查的1426份人粪便样品，并与常规国标方法对比，直接ELISA法的敏感性和特异性达100％和97．2％，PCR法的敏感性和特异性均为100％。通过对鲜牛奶样、龙虾、虾仁、熟食制品、水样、人粪样测试，最终确定较优化的沙门氏菌检测程序。结论 PCR法的敏感性优于直接ELISA法。对大量样品采用直接ELISA筛检，除去大量阴性样品，阳性样品用PCR法作进一步鉴定；需要确定血清型时则用国标方法。     

两种简易高效的单克隆抗体提纯方法

本文介绍两种纯化单克隆抗体的方法，即用聚乙二醇（ＰＥＧ，Ｍｒ＝６０００）沉淀法提纯ＩｇＭ和辛酸—硫酸铵沉淀法纯化ＩｇＧ。用这两种方法成功地从小鼠腹水型单克隆抗体中得到了较纯净的、活性损失较少的抗体制剂。经多次使用，证实它们是两种简易、高效的单克隆抗体提纯方法，适于推广应用。     

沙门氏菌单克隆抗体应用研究的进展

本文阐述了针对沙门氏菌O抗原、H抗原等不同抗原成份的单克隆抗体,以及这些单抗在沙门氏菌鉴定、沙门氏菌病诊断、食品沙门氏菌检验和沙门氏菌抗原结构分析等方面的应用研究情况,其结果表明,这些单抗完全可以取代常规抗血清作为诊断和检验试剂,同时,单技研制为沙门氏菌分子生物学方面的研究提供了有力的工具。文中进一步讨论了今后的研究前景。     

抗沙门氏菌O抗原特异单克隆抗体的制备及其免疫生物学特性的鉴定

本研究应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了41株分别针对沙门氏菌O_2、O_3、O_4、O_7、O_8、O_9、O_(11)、O_(19)等O抗原的特异单克隆抗体(下称单抗)。在多种血清学试验中,这组单抗只选择性地与所试52株沙门氏菌中具有相应O抗原的菌株反应,而不与其它沙门氏菌或其它肠道杆菌反应。应用这组单抗对864个现场分离菌株的鉴定和分解结果与常规O血清的试验结果一致,表明这组单抗完全可以取代常规O血清,具有广泛的应用前景。     

单克隆抗体测定沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原表位的分布特性

本研究应用抗沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原的４株羊克隆抗体所建立的直接ＥＬＩＳＡ法，测定了该类抗原表位在沙门氏菌属内外的分布特征。对１８４株覆盖Ａ至Ｏ６７血清群沙门氏菌、９６株其他肠道杆菌和８株革兰氏阳性菌的测定结果显示，该共同抗原表位广泛分布于沙门氏菌全属内，而在属外出现的频率很低。这类表位既存在于Ⅰ相较毛，也存在于Ⅱ相鞭毛。它们的上述分布特性不同于分型抗原Ｏ、Ｈ的分布特征。由此可见，沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原表位具有高度的属特异性，可作为该菌属识别标志，在沙门氏菌快速检验和抗原结构研究方面具有重要应用价值。     

4株沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原组分免疫原性及免疫保护性的研究

采用酸解法、单抗亲和层析提纯了鼠伤寒沙门氏菌（Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）鞭毛蛋白Ｈｉ。经电镜和ＳＤＳＰＡＧＥ鉴定，发现４２ｋＤ的蛋白带，即鞭毛蛋白（Ｆｌａｇｅｌｌｉｎ）。它能够刺激小鼠产生特异性抗体，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、凝集试验（ＤＡ）测定其Ｈｉ抗体效价分别为１：１０４、１：１０３。用其他非Ｈｉ抗原的沙门氏菌包板，ＥＬＩＳＡ效价可达１：１００～１：１０００，ＤＡ阴性。这表明沙门氏菌鞭毛蛋白上存在着属特异共同抗原表位，且免疫原性较好，该类表位免疫性比分型Ｈ抗原弱，提示沙门氏菌分型Ｈ抗原表位是鞭毛蛋白分子上的优势表位。用沙门氏菌鞭毛蛋白属特异共同抗原表位单抗ｄｅ７研究被动保护作用，结果显示该表位被动保护作用很小。本研究为沙门氏菌鞭毛蛋白抗原多样性及特性研究提供了新的认识，并为临床上诊断沙门氏菌感染提供了新的检测对象。     

美国人群中沙门菌感染的流行病学变化趋势

沙门菌(Salmonella)感染是引起人类腹泻性疾病的重要病因,在美国,每年引起140万人发病和600人死亡。流行病学调查结果显示,人类沙门菌感染大多数是摄入受该菌污染的动物性食品所致,其他的一些传播途径包括非动物性食品(如新鲜的水果和蔬菜)、水、爬行动物及人-人之间的直接传播。大多数沙门菌感染不是以大规模爆发的形式发生,而呈散发性。目前已知的沙门菌血清型有2 449个。最近的研究发现,特定的沙门菌感染往往与摄入某些食物或接触某些动物有关,如肠炎沙门菌感染与摄入生鸡蛋或未     

新城疫病毒融合蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

用新城疫病毒(NDV)F48E8株作为包被抗原,建立了检测由鸡痘病毒载体介导表达的NDV融合蛋白(F)抗体的间接ELISA方法。通过对20份阳性血清的P/N值与ELISA抗体效价(ET)的自然对数值(InET)的线性回归分析,获得了回归方程InET=0.201×P/N 4.632。应用该ELISA方法对表达NDVF基因的重组鸡痘病毒免疫鸡群进行了血清抗体检验,结果表明,血清的ELISA抗体效价与相应血清中和试验的抗体效价高度相关。攻毒保护试验结果显示,ELISA抗体效价与机体的保护力表现一定程度的相关性。     

大鼠肺炎克雷伯氏菌感染一例

1986年12月中旬,从某实验动物房购得体重200克左右的SD系大鼠30只,饲养在室温为8℃无调温设施的普通动物房中。5天后,大鼠出现呼吸道症状,共发病14只,死亡8只。经临诊和实验室检查,确诊为肺炎克雷伯氏菌感染。