人脐静脉血内皮祖细胞的分离扩增和生物学特征

目的:探索人脐静脉血内皮祖细胞的分离和扩增条件,并观测其生物学特性.方法:采集人脐静脉血,应用密度梯度离心法,分离其中单个核细胞,流式细胞术检测CD133 CD34 阳性率;利用差速贴壁法(48 h内贴壁和48 h后贴壁)联合内皮细胞专用培养基EGM-2培养细胞,接种于预先包埋了明胶培养瓶或培养板,倒置显微镜观察细胞生长形态和形成集落能力,免疫细胞化学法检测其免疫表型,摄取Ac-LDL和连接UEA-1功能,在生长因子培养体系中诱导其向成熟内皮细胞分化.结果:所获单个核细胞中CD133 CD34 百分比为1.06%;在EGM-2培养体系下可获得2种亚型的内皮祖细胞,即早期内皮祖细胞和晚期增殖性内皮祖细胞.其中48h后贴壁细胞属于早期内皮祖细胞,增殖能力较弱,免疫荧光检测,显示CD14和CD34KDR胞浆呈阳性表达,Ac-LDL UEA-1 功能特征;而48 h内贴壁细胞在10～17 d时可见由单个细胞增殖形成的克隆,呈铺路石样单层排列,增殖力旺盛形成融合状态,形成次集集落;经免疫荧光检测,显示CD133CD34和CD34KDR细胞质呈阳性表达,Ae-LDL UEA-1 功能特征,传代后vWF,CD31呈强阳性表达,是晚期增殖性内皮祖细胞.结论:经人脐静脉血可分离培养获得2种亚型的内皮祖细胞,在特定的培养体系中细胞可由祖细胞表型向成熟内皮细胞分化.     

立体定向接种胶质瘤细胞系C6形成大鼠脑内原位移植瘤的生长特性

目的通过立体定向技术建立大鼠脑原位移植瘤模型,观察其生长特性.方法在立体定向仪引导下,将体外培养的大鼠C6胶质瘤单细胞悬液(1×106/10 μl)接种于27只Wistar大鼠右尾状核区.以接种C6细胞后大鼠的允许生存期,将大鼠分成2组,观察大鼠生存状态、成瘤情况、肿瘤体积、脏器转移灶、组织学形态、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、血管内皮生长因子(VEGF)、兔抗人因子Ⅷ相关抗原免疫组化染色.结果大鼠成瘤率为100%,无颅外转移.荷瘤大鼠平均生存期为(25.50±5.75)d.肿瘤体积在第3～4周时肿瘤迅速增大.肿瘤呈浸润性生长,甚至侵袭颅骨;瘤细胞病理性核分裂像多见,GFAP蛋白呈散在阳性表达,VEGF蛋白强阳性表达;瘤组织内有典型的栅栏状坏死和丰富的微血管.结论 C6细胞在大鼠脑内原位移植瘤与人脑胶质母细胞形态和生长特性十分相似,具有分化程度低、微血管丰富、生长速度快且高度侵袭等特点.     

诺帝对血管内皮生长因子诱导的人脐血源性内皮祖细胞功能的影响

探讨手性化合物诺帝(Nordy)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的人脐血源性内皮祖细胞(EPCs)功能的影响及其意义。应用密度梯度离心法分离新鲜人脐血的单个核细胞，接种于EGM-2培养液中培养7～10 d获得内皮祖细胞(EPCs)。分别采用MTT法、Millicell-PCF培养小室系统和Matrigel内小管形成试验检测诺帝对VEGF刺激下EPCs增殖活性、迁移能力和体外形成小管样结构能力的影响。结果表明，100 μmol·L^-1诺帝作用24 h明显抑制EPCs增殖活性(P<0.05)，诺帝(25～50 μmol·L^-1)作用48～72 h也明显抑制EPCs增殖活性(P<0.05)。诺帝(25～100 μmol·L^-1)显著抑制VEGF诱导的EPCs迁移活性和体外形成小管样结构的能力(P<0.05)。诺帝能抑制体外VEGF诱导的人脐血源性EPCs增殖、迁移和体外小管形成能力，提示其具有抗EPCs效应。     

中纵隔异位化生性胸腺瘤1例并文献复习

目的探讨罕见的起源于中纵隔异位化生性胸腺瘤(metaplastic thymoma, MT)的临床病理特点。方法回顾性分析1例中纵隔原发异位MT的临床病理学及免疫表型特征等并复习相关文献。结果患者男性,45岁,CT示左侧中纵隔肿块,临床无重症肌无力表现。镜下肿瘤表现为双相分化特征,岛状的上皮细胞区域与束状的梭形细胞区域交错分布并相互移行。上皮细胞为多角形,核空泡状,核仁小而明显,可见核沟和核内假包涵体。上皮细胞有轻度核异型,上皮岛内可见穿插有嗜酸性细支状透明物质。梭形细胞呈束状或席纹状结构排列。两种区域内均有大量泡沫细胞聚集和散在成熟小淋巴细胞、浆细胞浸润。肿瘤内缺乏未成熟T淋巴细胞。免疫表型:上皮细胞区域CKpan、p63强阳性,vimentin阴性。梭形细胞区域vimentin弥漫强阳性,非常少的梭形细胞CKpan弱阳性,p63阴性。间质淋巴细胞CD3、CD5阳性,TdT和CD1a阴性。EBV原位杂交检测结果为阴性。结论中纵隔异位MT是一类临床罕见的低度恶性肿瘤,明确诊断需依靠其独特的临床病理学特征。     

浅谈脱毒新思路

目前全球吸毒人数已经超过2亿人,平均每年有10万人因吸毒死亡、1000万人因吸毒丧失劳动能力.毒品贩运也已涉及全球 170多个国家和地区,130多个国家和地区存在毒品消费问题,全球每年毒品交易额达8000亿至10000亿美元.     

美沙酮维持治疗对海洛因成瘾者高危行为的影响

目的评价美沙酮维持治疗（Methadone maintenance treatment,MMT）对海洛因成瘾者高危行为的影响,为推广MMT提供依据。方法采用社区MMT评估调查表,对接受MMT的125名海洛因成瘾者进行问卷调查。结果MMT后,受治者静脉注射毒品的高危行为发生率、共用针头发生率均降低,违法行为率降低,高危性行为发生率降低;家庭关系得到改善,关系紧张发生率降低;治疗前后就业率差异无显著性意义。结论MMT能有效的减少高危吸毒行为、违法行为、性行为的发生,能有效改善家庭关系。     

益安回生口服液与香藤胶囊治疗海洛因依赖临床对照分析

目的：了解益安回生口服液与香藤胶囊对强戒所海洛因依赖者早期戒断症状的疗效。方法：将入强戒所符合标准的戒毒人员随机分为两组，分别给予益安回生口服液和香藤胶囊，并做对比观察分析。结果：两组治疗前后各量表均分有明显下降（P〈0．01），益安回生口服液组疗程明显短于香藤胶囊组（P〈0．01），尿液吗啡检查阴转率明显高于香藤胶囊组（P〈0．05），两组各有其不同类型、轻至中度的不良反应。结论：两药用于强制戒毒所海洛因依赖患者的脱毒治疗均有一定疗效，但益安回生口服液优于香藤胶囊，具有见效快，疗程短，安全，不含麻醉成分，无依赖性等优点。     

广州市某医院内成蚊体内病毒监测及控制效果分析

目的 医疗机构人员密度高,有必要建立监测和控制多种蚊媒传染病传播的方案。方法 在广州市某三甲医院部分建筑内以诱蚊灯法监测成蚊种类和密度,提取成蚊核酸,以多重定量PCR检测登革热、乙型脑炎等多种DNA和RNA病毒,根据检测结果以常规措施或额外措施灭蚊。结果 2019年5—11月医院共收治162例登革热患者,未发生院内感染。在30个蚊虫监测点共捕获成蚊14批次共4 881只,其中库蚊3 341只（68.45%）,伊蚊725只（14.85%）及其他815只（16.70%）。发现特定区域成蚊体内Ⅰ型登革热病毒和单纯疱疹病毒各1次阳性,采取额外灭蚊措施,无人员出现感染。结论 通过定期捕蚊和定量PCR检测成蚊体内多种蚊媒病毒,可调整灭蚊措施,防控院内蚊媒传染病的发生。     

SDF-1/CXCR4轴活化诱导内皮祖细胞增殖、迁移及管型形成

目的观察趋化因子SDF-1促内皮祖细胞增殖、迁移和管型形成的作用。方法用免疫细胞化学检测内皮祖细胞SDF-1和CXCR4表达;用MTT法、Millicell趋化法及Matrigel体外三维成型法分别检测不同浓度的趋化因子SDF-1促内皮祖细胞增殖、迁移和管型形成。并应用CXCR4受体抑制剂AMD3100观察上述指标的变化。结果免疫细胞化学显示内皮祖细胞表达SDF-1和CXCR4蛋白。SDF-1可促进内皮祖细胞的增殖、迁移和体外小管样结构的形成。AMD3100可抑制SDF-1的诱导作用。结论SDF-1/CXCR4轴在内皮祖细胞参与血管新生中可能发挥重要作用。     

内皮祖细胞在胶质瘤新生血管中的募集和整合作用

目的 探讨内皮祖细胞(EPCs)在胶质瘤血管新生化过程中的作用.方法 采用密度梯度离心法分离人脐血EPCs.应用人脑胶质瘤细胞系U87细胞建立原位移植动物模型,于瘤细胞接种后第7天将EPCs经尾静脉注入荷瘤鼠,并分别于尾静脉注射后7、14、21d观察EPCs植入后在移植瘤血管新生过程中的募集、整合作用以及对肿瘤生长的影响.结果 胶质瘤原位移植模型成瘤率为100%.在EPCs植入后14、21d被募集和整合到肿瘤血管中的EPCs数量显著多于第7天(P＜0.05),肿瘤微血管密度和移植瘤体积也显著高于对照组(P＜0.05).结论 人脐血EPCs能够被募集并整合到肿瘤血管中促进胶质瘤生长,提示其在胶质瘤血管新生化过程中可能具有重要作用.