肝脏肿瘤细胞诱导T淋巴细胞PD-1表达及功能研究

目的研究肝脏肿瘤细胞系细胞HepG2细胞与HepG2．2．15细胞对T淋巴细胞程序性死亡分子1（PD-1）表达的影响及PD-1的作用。方法HepG2细胞、HepG2．2．15细胞分别和Jurkat细胞共同培养后,标记流式抗体,流式细胞检测仪检测Jurkat细胞PD-1的表达,ELISA检测并比较阻断组与对照组培养上清中细胞因子含量,单核细胞直接细胞毒性测定法检测并比较阻断组与对照组T淋巴细胞杀伤能力即OD值的改变。结果肝脏肿瘤细胞能诱导T淋巴细胞PD-1的表达,共培养2d时表达率分别为16．17％±2．5％（HepG2细胞）和17．43％±2．2％（HepG2．2．15细胞）;阻断组培养上清中IL-2、IFN-γ、IL-10浓度分别为202．9±53．0pg/ml、88．6±4．6pg/ml和63．7±13．4pg／ml,均明显高于对照组（102．9±53．0pg/ml、39．3±4．2pg/ml和34．6±13．7pg/m1）,P〈0．05;阻断组Jurkat细胞对HepG2．2．15细胞杀伤的OD值为0．29±0．06,明显高于对照组（0．19±0．09）,P〈0．05。结论肝脏肿瘤细胞能诱导T淋巴细胞PD-1的表达;阻断PD-1／PD—L1能提高T淋巴细胞分泌细胞因子的量和杀伤能力。     

用恶性疟原虫红内期体外培养技术筛选人疟动物模型

血传感染动物是人疟动物模型实验的传统方法之一,对寻找敏感动物起了很好的作用.由于疟疾流行有一定的季节性,高密度的原虫血症病例很少,致使筛选动物实验受到限制.为了广泛地筛选敏感动物,对实验方法有进一步探索的必要.实验动物对人疟是否     

7种中草药抑制HBV复制的体外实验研究

７种中草药抑制ＨＢＶ复制的体外实验研究张耀新，傅希贤，张乃临，张国庆，刘丹（北京医科大学第一医院感染疾病科１０００３４）目前尚无理想的抗病毒治疗药物，因此寻找、研制高效低毒的抗ＨＢＶ药物是急待解决的问题。我们用２．２．１５细胞株［１］做为体外实验模型...     

3种中草药对乙型肝炎病毒复制抑制效果的体外实验研究

用２、２、１５细胞株作为慢性乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染的体外实验模型，检测雪莲注射液、复方一枝蒿和复方沙棘在体外对ＨＢＶ复制的抑制效果。结果显示，雪莲注射液有较强的抑制ＨＢＶ复制的作用，用治疗指数评价显示此制剂有良好的临床应用前景。复方一枝蒿虽有抑制ＨＢｅＡｇ的作用，但对ＨＢＶ复制无抑制作用。复方沙棘在实验浓度范围内无抑制ＨＢＶ复制的作用。     

乙型肝炎病人外周血单个核细胞共价闭合环状DNA的检测

乙型肝炎病毒(HBV)感染的靶器官主要是肝脏，但是很多肝外器官，如骨髓、淋巴结、脾、肾、皮肤、结肠、胃、睾丸、精子及肾上腺旁神经节及外周血单个核细胞(PBMC)等均能被HBV感染。目前认为PBMC存在HBV的感染，但有无HBV的复制，仍存在争议。共价闭合环状DNA(cccDNA)是HBV复制的模板，如果能够发现外周血单个核细胞存在cccDNA，不     

苦参素对HBsAg转基因小鼠血清Th1和Th2细胞因子水平的影响

目的　探讨苦参素对HBsAg转基因小鼠外周血Th1 Th2细胞因子水平的影响。方法　HBsAg转基因小鼠分成苦参素组和对照组 ,分别每天腹腔注射苦参素注射液 2 0 0mg kg 0 2ml和生理盐水 0 2ml,共 30d。处理前后 ,检测外周血清细胞因子水平。结果　对照组处理前后γ 干扰素(IFN γ)与白细胞介素 4 (IL 4 )水平差异无显著意义 ;苦参素组处理前后IFN γ分别为 (3 10 8± 3 172 )pg ml和 (11 0 5 9± 6 971)pg ml,IL 4分别为 (2 9 0 4 5± 13 2 35 )pg ml和 (13 0 2 4± 9 0 0 2 )pg ml(均P <0 0 0 1)。处理后对照组与苦参素组IL 2分别为 (1 0 70± 0 4 4 7)pg ml和 (5 5 37± 2 887)pg ml(P <0 0 0 0 1) ;IL 10分别为 (97 2 2 6± 73 30 6 )pg ml和 (33 6 0 7± 2 3 15 4 )pg ml(P <0 0 1)。结论　在苦参素作用后 ,HBsAg转基因小鼠体内的Th1型细胞因子明显升高 ,Th2型细胞因子明显降低。这将有助于研究苦参素临床治疗乙型肝炎的机制。     

ECi/ECiQ和AxSYM全自动免疫系统的性能比较

目的:比较ECi/ECiQ和AxSYM系统对样品检测的重复性、气泡检出率及线性范围,讨论其对临床检测结果的影响.方法:HBsAg/抗-HCV强阳性样品各20份,正常人血清标本中分别加入一定比例的上述样品至S/Co比值在阈值(Cut-Off)并重复检测40次作重复性实验;气泡检出试验是在样品中加入50μL气体并重复检测20次;正常人血清连续系列稀释HBsAg强阳性标本并检测线性范围试验.结果:ECi/ECiQ和AxSYM系统HBsAg重复性(CV%)各为3.57%和3.87%;ECi/ECiQ和AxSYM系统抗-HCV各为5.05%和17.01%.ECi/ECiQ和AxSYM系统HBsAg气泡检出率各为100%和55%;ECi/ECiO和AxSYM系统抗-HCV各为35%和15%.ECi/ECiQ系统和AxSYM系统HBsAg均未出现假阴性;ECi/ ECiO系统抗-HCV未出现假阴性,而AxSYM系统为70.6%.ECi/ECiQ在稀释1:40000时仍阳性,其线性相关系数为0.9957,而AxSYM系统在稀释1:10000时阳性,其线性相关系数为0.9384.结论:ECi/ECiO和AxSYM两系统均适用于临床检测,但ECi/ECiQ系统对整个检测流程质量控制要求高,而AxSYM系统对样品的质量要求相对较低,在低值标本检测中容易造成假阴性,ECi/ECiO系统的敏感性和重复性比AxSYM系统好.     

应用2215细胞对四种消毒剂进行抗乙肝病毒效果的比较

应用2215细胞对临床四种消毒剂进行了抗乙肝病毒效果的比较,结果表明:“88”洗消净(50mg/L)的效果最佳,其次是“84”消毒液(100mg/L),再次是清洗消毒剂(100mg/L)。2215细胞可以做为评价抗乙肝病毒消毒剂效果的试验模型。     

不同修饰的左氧氟沙星体外抗乙型肝炎病毒的作用及其作用机理的研究

目的本文用2.2.15细胞研究不同修饰的左氧氟沙星(磺酸左氧氟沙星、左氧氟沙星、乳酸左氧氟沙星)体外抗乙型肝炎病毒的作用及其作用机理。方法以HBsAg、HBeAg及细胞存活率为观察指标,综合评价不同修饰的左氧氟沙星体外抗HBV效果,进一步用荧光定量PCR方法测细胞内HBV DNA、HBV RNA及细胞上清HBV DNA的拷贝数,推测药物体外抗乙型肝炎病毒的作用机理。结果结果提示磺酸左氧氟沙星对HBsAg和HBeAg的ID_(50)分别为63.1μg/ml及81.3μg/ml,CD_(50)为182.0μg/ml,TI>2。磺酸左氧氟沙星对细胞内、外HBVDNA及细胞内HBV RNA均有明显的剂量依赖型抑制作用(P<0.05)。结论磺酸左氧氟沙星有明显的抗HBV作用,对HBV抑制位点可能在HBV DNA水平。     

不同盐的左氧氟沙星体外抗乙型肝炎病毒的作用及机理的研究

目的：研究不同盐的左氧氟沙星抗外抗HBV的作用及其机理。方法：以HBsAg,HBeAg及细胞存活率为指标,评价药物体外抗HBV效果;检测HBV DNA、RNA的拷贝数,结合Southern杂交,推测其体外抗HBV的作用机理。结果：磺酸左氧氟沙星对HBsAg和HBeAg的ID50分别为63．1μg/ml及81．3μg/ml,CD50为182．0μg/ml,TI＞2;对细胞内,外HBV DNA及细胞内HBV RNA均有剂量依赖性抑制作用（P＜0．05）;Southern杂交显示,其对细胞内HBV DNA及复制中间体有抑制作用,对scDNA有部分抑制作用,结论：磺酸左氧氟沙星有抗HBV作用,作用位点在HBV DNA及scDNA水平。