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Tet-on基因表达系统调控HIF-1α表达对肝癌细胞凋亡的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨HIF-1α表达在体外对肝癌细胞凋亡的影响。方法利用Tet—on基因表达系统调控HePG2细胞HIF-1α的表达,观察细胞凋亡。结果酶切和DNA测序证实Tet—on基因表达系统反应质粒P^tre-hif-1α构建成功。获得了受强力霉素调控、稳定表达HIF-1α的肝癌细胞。经阿霉素诱导凋亡后,强力霉素终浓度为0μg/ml、0.02μg/ml、0.2μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、5μg/ml时的细胞凋亡率分别为59.6%、50.9%、38.1%、30.5%、23.9%、18.3%;强力霉素0.02μg/ml、0.2μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、5μg/ml处理细胞后,Casepase-3活性分别降低了2.3、5.5、8.7、12.6、18.8倍。RT—PCR检测结果显示,随着强力霉素浓度的增加,HIF-1α表达水平增加,Survivin和Bcl-2基因表达强度逐渐增加,差异有统计学意义(P〈0.001)。结论HIF-1α基因在体外可以抑制肝癌细胞凋亡,而且随着HIF-1α表达水平的增加,对肝癌细胞的凋亡抑制作用进一步加强,可能与HIF-1α诱导survivin和Bcl-2的表达及抑制casepase-3的活性有关。 相似文献
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环氧合酶-2和血管内皮生长因子共表达与肝细胞癌血管形成的关系 总被引:7,自引:6,他引:1
目的 探讨环氧合酶 (COX) 2与肝细胞癌血管形成的关系。方法 利用免疫组织化学、Westernblot方法检测 48例肝癌组织中COX 2和血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白及逆转录 聚合酶链反应法 (RT PCR)检测COX 2和VEGFmRNA的共表达 ,对共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织进行微血管记数。结果 免疫组织化学检测中 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2和VEGF蛋白。类似结果见于蛋白电泳分析。RT PCR显示 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2mRNA和VEGFmRNA。两者之间的表达明显相关 (γ =0 .845 )。共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织中 ,平均微血管数 (5 6.8± 17.5 )个 ,明显高于阴性表达组。结论 COX 2可能与肝细胞癌的血管形成有关 ,且其作用之一可能是通过上调VEGF通道来发挥的 相似文献
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槐耳清膏治疗肝癌的实验研究 总被引:10,自引:0,他引:10
目的 探讨槐耳清膏对人胎脐静脉内皮细胞的作用 ,以及其对裸鼠皮下接种肝癌细胞形成肝癌的抑制作用及其可能机制。方法 用不同浓度的槐耳清膏作用于人胎脐静脉血管内皮细胞 ,观察其对细胞的增殖能力、迁移能力、附壁能力及血管生成的影响 ,同时观察其对裸鼠皮下接种肝癌细胞形成肝癌过程的影响。结果 槐耳清膏≥ 2mg/ml时可显著降低肿瘤组织的血管内皮细胞增殖能力 ,减少血管形成 ,抑制血管内皮细胞的迁移、黏附 ,从而降低微血管密度。槐耳清膏 ( 3g/kg) MMC( 5 0 0 μg/kg)同时作用于裸鼠的肝癌组织 ,其抑瘤作用最强 ,后依次为MMC组 ,槐耳清膏 ( 3g/kg)组。结论 槐耳清膏对肝癌有抑制作用 ,其可能机制是作用于血管内皮细胞 ,影响血管内皮细胞的增殖能力、迁移能力、附壁能力及血管生成 ,从而抑制肝癌组织的血管生成 ,降低肝癌组织的微血管密度而发挥抑制肝癌生长的作用 相似文献
4.
目的研究阿霉素(adriamycin,ADM)诱导肝癌细胞(HepG2)耐药过程中过氧化物酶增殖物激活受体(PPARa)表达的变化及意义。方法通过梯度增加培养液中阿霉素的浓度,长期筛选培养,建立肝癌HepG2/ADM耐药细胞株。Western blot检测耐药细胞中多药耐药基因(MDRl)、PPARa蛋白的表达变化,RT-PCR检测耐药细胞中PPARa和CYP3A mRNA的表达变化。结果HepG2/ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型,在耐药诱导过程中,MDR1表达上调,PPARa mRNA和蛋白的表达下降,CYP3AmRNA的表达也呈下降趋势。结论在耐药诱导过程中,PPARa表达的下降可能与HepG2细胞耐药的发生有关,其机制可能在于PPARa能影响MDR1和CYP3A的表达。 相似文献
5.
随着肝癌系统治疗的快速发展,靶向治疗、免疫治疗等系统治疗已广泛应用于不可切除肝癌或交界可切除肝癌的转化治疗.肿瘤的超进展是一种肿瘤加速生长的现象,在接受系统治疗的肝癌等实体瘤病人中均有发生,主要与免疫治疗相关.目前,临床上对肝癌中肿瘤超进展的认识不足,缺乏相关的临床研究,尚无法正确评估肿瘤超进展是否发生及严重程度. 相似文献
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目的探讨腹腔镜在腹部外科病人诊断和治疗中的应用价值。方法回顾性分析自2013年3月至2014年5月共1 15例腹部外科病人行腹腔镜探查的临床资料。结果所有病人经腹腔镜探查及术后病理得以明确诊断,其中94例(81.7%)在腹腔镜下完成手术,44例肿瘤性病变在腹腔镜探查下明确,其中4例(9.1%)发现肿瘤已广泛转移或无法切除则选择关腹,所有病人术后都恢复良好。结论腹腔镜在腹部外科病人诊治中具有重要作用,值得在临床上推广应用。 相似文献
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目的评价肝硬化背景下经腹腔镜超声引导微波消融治疗肝细胞性肝癌的安全性和有效性。方法选取经腹腔镜超声引导下微波消融治疗伴有肝硬化的肝细胞性肝癌患者71例,定期对患者行血清甲胎蛋白(AFP)及影像学检查以评估治疗效果。结果术中腹腔镜超声检查,发现7个术前影像学未检出的肝内病灶(6.9%)。共计101个肝肿瘤病灶,均在腹腔镜超声引导下成功完成肿瘤微波消融治疗,患者血清AFP水平明显降低,与术前比较差异有统计学意义(P0.01)。术后仅1例患者出现术后严重并发症(1.4%),无死亡情况。术后1个月后复查,超声造影及增强CT均显示肝病灶完全消融,未见残留。术后随访(11.5±10.1)个月,4个病灶发现局部复发,6个病灶出现远处转移,3个病灶同时发生局部复发和远处转移。结论腹腔镜超声引导下的肝癌微波消融治疗具有安全、有效、恢复期短及并发症发生率低等优点。 相似文献
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目的通过检测Pin1在肝硬化组织和肝癌原发灶及门静脉癌栓中的表达,了解Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段的表达情况,同时验证其与乙型肝炎病毒X蛋白的关系。方法用免疫组织化学染色法检测20例肝硬化组织,21例肝癌原发灶及门静脉中Pin1的表达,同时检测21例肝癌原发灶中乙型肝炎病毒X蛋白的表达情况,并用SPSS10.0软件进行相关性分析。结果肝硬化组织和大部分门静脉癌栓中Pin1的表达较肝癌原发灶中Pin1的表达强(P<0.05)。在肝癌组织中Pin1的表达与HBx的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段表达不同,同时Pin1可以通过直接或间接作用稳定HBx的表达,为阐明其在肝癌发生、发展中的作用提供了新的思路。 相似文献
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缺氧诱导因子-1αsiRNA增强耐药肝癌细胞的化疗敏感性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)特异性小分子干扰RNA(siRNA)对肝癌化疗的增敏作用。方法 构建HIF-1αsiRNA真核表达质粒,经脂质体稳定转染于耐药的C28肝癌细胞。研究分为实验组、阴性对照组和空白对照组。荧光定量PCR和Western blot技术分别检测3组细胞中多药耐药相关基因MDR1、LRP、MRP1在mRNA和蛋白水平的表达,PI法流式细胞术分析3组细胞在受到5-Fu作用后的凋亡指数。每组细胞分别随机注入10只裸鼠皮下,比较3组细胞成瘤后对ADM治疗的反应性。结果 HIF-1αsiRNA能有效抑制HIF-1α基因的表达,并能使C28耐药肝癌细胞内MDR1、MRP1、LRP基因在mRNA和蛋白水平表达明显下降。在5-Fu作用后第24、48、72小时,实验组细胞的凋亡指数分别是阴性对照组的2.88、3.56和3.87倍,实验组对化疗药物5-Fu的敏感性显著增强(P〈0.01)。注射阿霉素后,实验组裸鼠皮下的耐药肝癌瘤体明显缩小,肿瘤抑制率为41.35%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 成功构建了HIF-1α—siRNA的真核表达质粒。HIF—1α靶序列特异性的siRNA可增强肝癌细胞对化疗药物的敏感性,它与传统化疗药物的联合应用可望实现对肝癌的有效治疗。 相似文献