吃涮羊肉暴发旋毛虫病的临床报告

首诊病例男性,47岁。1989年2月23日开始低热、乏力、轻咳。4天后周身肌肉疼痛,腿部肌肉最为显著,并有触痛,眼睑与面部水肿。此后体温渐高,达39.7℃,肌肉疼痛加重,于3月9日入院。体检:     

Cariporide对肿瘤细胞增殖和血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨特异性抑制剂Cariporide通过抑制钠氢离子交换蛋白1(NHE1)功能而阻止肿瘤细胞增殖的机制.方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Cariporide对细胞增殖的抑制率,共聚焦荧光显微镜测算双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)的荧光强度,检验其下调细胞内pH值,ELISA试剂盒测定其对体外培养细胞表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,观测其对动物体内肿瘤细胞增殖的抑制作用.结果随着Cariporide的剂量增加或作用时间延长,HeLa细胞内pH值逐渐降低,肿瘤细胞表达VEGF减少.伴随着细胞内pH值降低,VEGF分泌水平逐渐下降,两者之间呈显著相关性(P＜0.05).另外,Cariporide能抑制动物体内的肿瘤增殖.结论Cariporide能够减少肿瘤细胞表达和分泌VEGF,抑制动物体内肿瘤增殖.     

白血病耐药相关细胞信号转导通路研究进展

白血病是恶性血液病,化疗在治疗中占据着不可替代的地位。化疗可以使多数患者获得缓解,甚至治愈,但最终仍有大部分患者因耐药所致化疗失败而死亡。白血病耐药类型大致可分为内源性和获得性,前者是白血病治疗前就存在对某种或多种化疗药物无反应性,后者则是化疗诱导的耐药性。     

儿童急性淋巴细胞白血病患者中期因子表达与药物外排的关系

本研究检测中期因子（midkine,MK）在儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）中的表达,探讨MK与白血病细胞化疗药物外排的关系。采用实时定量聚合酶链反应（RQ—PCR）检测153例儿童ALL患者骨髓及20例正常儿童外周血的标本中MKmRNA的表达,同时用激光扫描共聚焦显微镜观察30例进展期B—ALL患者和正常儿童的单个核细胞对罗丹明123（Rhodamine123,Rh123）的外排作用,应用流式细胞术测定细胞内平均荧光强度（mean fluorescence intensity,MFI）观察药物累积。结果表明：正常对照、完全缓解期及进展期B—ALL患者的单个核细胞MKmRNA表达水平依次增高,分别为0．795（0．697-1．570）,3．012（0．932—5．076）,12．909（2．385—26．347）,差异具有统计学意义（P〈0．01）。进展期B—ALL细胞中MKmRNA表达水平较进展期T—ALL增高,差异具有统计学意义（P〈0．01）。在罗丹明123的外排实验中发现,进展期淋巴白血病细胞中MFI较正常对照明显减低,差异具有统计学意义（P〈0．01）,进展期淋巴白血病细胞药物累积与患者MKmRNA水平呈明显的负相关（r=-0．869,P〈0．001）。结论：高表达MK的淋巴白血病细胞药物外排能力较强,中期因子可能影响血液肿瘤的化疗耐受。     

细胞酸化对P糖蛋白高表达耐药白血病细胞的影响

察结果也证实酸化增加细胞内阿霉素累积.结论 细胞内酸化能够抑制患者细胞P-gp表达和功能.     

钙调磷酸酶B同源蛋白2核定位对宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响

目的研究钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)在细胞核内定位对人宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响。方法将CHP2核输出信号序列(NES)突变,转染HeLa细胞,从而使CHP2定位在细胞核内,采用MTT法检测HeLa细胞的细胞活力的改变;利用软琼脂集落形成实验观察HeLa细胞集落形成大小和数量的变化;通过体内实验观察HeLa细胞在小鼠体内的成瘤能力。结果荧光共聚焦显微镜显示突变型CHP2(CHP2-NESm)主要定位在HeLa细胞的细胞核内和细胞质,而野生型的CHP2主要定位于细胞质;MTT法结果表明转染CHP2-NESm的HeLa细胞的活力显著强于转染野生型CHP2和空载体的细胞;软琼脂集落形成实验结果表明,转染CHP2-NESm的HeLa细胞的集落数量和集落大小均明显大于转染野生型CHP2和空载体的细胞(P<0.05);体内实验结果显示,转染CHP2-NESm的HeLa细胞较转染野生型CHP2的细胞的成瘤能力增强(P<0.05)。结论 CHP2细胞核内的定位对调控HeLa细胞的增殖能力发挥重要的作用。     

急性髓系白血病患者骨髓间充质干细胞衰老相关基因的生物信息学分析及验证

目的:通过生物信息学方法筛选急性髓系白血病(AML)患者骨髓间充质干细胞(BM-MSC)衰老相关的差异表达基因并予以验证,为AML的科研和临床提供新的分子标志物。方法:应用血液病医院AML患者BMMSC制作基因表达谱芯片并参考从NCBI数据库GEO中选取的芯片GSE84881,综合地进行数据分析并筛选差异表达基因。运用DAVID分析软件进行基因本体论(GO)富集分析和KEGG通路富集分析,筛选出与AML患者BM-MSC衰老相关的差异表达基因。收集病人及健康供者的骨髓样本,体外扩增MSC并应用RT-PCR技术检测衰老相关基因表达水平与芯片的一致性,辅以衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验和MTT细胞增殖实验对AML患者BM-MSC表型和功能进行验证。结果:筛选出247个差异表达基因,其中有132个基因表达上调,115个基因表达下调。侧重分析6个衰老相关基因,包括表达上调基因COL3A1(P=0.025)、CRYAB(P=0.0003)、DCN(P=0.0368)以及表达下调基因CCL2(P=0.0256)、CTSC(P=0.0001)、IL6(P=0.0482)。RT-PCR实验结果提示,上述基因的表达差异与AML患者BM-MSC的衰老具有相关性。衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验证实,AML患者BM-MSC的染色阳性率与健康供者相比显著增高(P0.0001);MTT实验表明,与健康供者相比,AML患者BM-MSC的增殖能力降低(P0.0001)。结论:运用生物信息学方法对AML患者BM-MSC的芯片数据进行探索研究,筛选并验证了6个与衰老相关的差异表达基因,分别是COL3A1,CRYAB,DCN,CCL2,CTSC和IL6,这为AML的科学研究和临床治疗提供了新线索。     

Cariporide降低K562/DOX细胞株表达P-糖蛋白而逆转耐药的影响

 目的 探讨cariporide对耐药细胞株K562/DOX中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）的影响,为抗白血病多药耐药（multidrug resistance, MDR）提供新方法。方法 应用cariporide对细胞进行酸化,应用激光共聚焦显微镜测定野生型细胞系K562及耐药细胞株K562/DOX细胞内pH值及细胞酸化对K562和K562/DOX细胞内阿霉素累积的影响。采用MTT法观察细胞酸化对细胞活力的影响。应用流式细胞术检测细胞酸化对K562/DOX细胞中P-gp功能的影响。采用实时定量RT-PCR技术检测MDR1基因在mRNA表达水平的变化。结果 Cariporide处理3 h对K562及K562/DOX细胞的活力影响较小。在K562/DOX细胞中,P-gp的外排药物能力随细胞内pH值的降低而减弱,cariporide明显增加了细胞对罗丹明123（rhodaminel 123,Rh123）和阿霉素的累积。细胞酸化还在mRNA水平抑制了K562/DOX细胞中P-gp的表达。结论 Cariporide能够抑制K562/DOX耐药细胞株中MDR1基因表达和P-gp的功能。     

RHBDD1基因在慢性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达及临床意义

本研究旨在检测RHBDD1（Rhomboid domain containing 1）基因在慢性髓系白血病（CML）患者骨髓细胞中的表达水平并初步探讨其临床意义。采用实时定量PCR的方法检测RHBDD1在正常人和CML患者骨髓单个核细胞中的相对表达水平。结果表明,CML患者RHBDD1的表达水平明显高于正常人;BCR／ABL p210表达阴性的患者RHBDD1的表达水平显著高于BCR／ABLp210阳性的患者;≥50岁的患者RHBDD1表达水平低于〈50岁的患者;RHBDD1的表达水平与患者的性别无明显相关性。结论：RHBDD1基因可能参与了CML的发生与发展,尤其在BCR／ABL p210阴性患者的发病中可能发挥重要作用。     

沉默DOT1L基因对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响。针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素(Dox)诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率;采用改良MTT法检测干扰DOT1L基因后对THP-1细胞增殖能力的影响;用细胞集落形成实验观察干扰后细胞集落形成的能力;用流式细胞术分析细胞周期的变化。结果表明:THP-1细胞干扰后DOT1L基因的表达显著降低;DOT1L基因的表达下调抑制了细胞的增殖能力、集落形成能力并将细胞周期阻滞在G0/G1期。结论:利用shRNA靶向干扰DOT1L基因的表达,可以有效抑制人急性单核细胞白血病细胞THP-1的增殖。