应用SELDI-TOF-MS技术分析SEB染毒小鼠血清蛋白质组学变化

目的:把蛋白质芯片和SELDI质谱技术应用于金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)染毒小鼠血清蛋白质组研究,分析染毒小鼠血清蛋白质组的变化．方法:采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术和弱阳离子交换蛋白质芯片检测染毒小鼠血清蛋白质的变化,使用PBSⅡ-C 型蛋白质芯片阅读机读取数据,获得的结果采用Ciphergen公司的Biomarker wizard和 Biomarker Patterns System软件进行分析．结果:实验组与对照组血清蛋白质谱相比有 11个蛋白质有显著差异,其中8个蛋白质表达上调,3个表达下调．结论:SEB染毒小鼠血清蛋白质组发生显著变化,可能与SEB的毒理学与病理学作用有密切关系．     

夹心免疫PCR方法检测蓖麻毒素

目的：建立了双抗夹心免疫PCR的检测技术，检测极微量的抗原，方法：以亲和素作为连接分子连接生物素化抗体和生物素化DNA，应用于免疫PCR中，检测极微量的抗原。结果：建立了双抗夹心免疫PCR的检测技术，检测蓖麻毒素的灵敏度达0．1pg/ml，与夹心ELISA方法比较灵敏度高10^3倍。结论：建立的免疫PCR系统灵敏度高，可用于各种微量抗原的检测。     

肠毒素性大肠杆菌菌毛抗原CS6和霍乱毒素B亚基在人伤寒沙门菌中的共表达及其免疫学效果观察

目的：构建表达肠毒素性大肠杆菌菌毛抗原基因CS6和霍乱毒素B亚基（CTB）基因的细菌性腹泻基因工程多价疫苗。方法：以基因工程减毒的人伤寒沙门菌为抗原载体，利用基于asd基因功能互补的宿主染色体－质粒平衡致死表达系统，实现了在没有抗生素选择压力的条件下，CS6和CTB在人伤寒沙门菌中的稳定表达。结果与结论：检测结果表达，CS6和CTB的表达虽对宿主菌的生长有一定影响。但经过一段时间的培养，重组菌株仍可达到高密度生长，动物免疫结果显示，重组菌株在家兔体内均可诱生相应抗体，但从诱生的抗体效价，抗体持续时间方面评价，单独表达CS6与CTB的重组菌株的免疫学效果均好于两者共表达的重组菌株，提示在以后的疫苗研究实践中，可以考虑将分别表达CS6和CTB的重组菌株按一定比例混合，组成联合疫苗，用于细菌性腹泻的的免疫预防，本研究结果对于细菌性腹泻基因工程多价疫苗的构建有指导意义。     

肠毒素性大肠杆菌疫苗的研制进展

细菌性腹泻是常见的肠道传染病 ,广泛流行于世界各地。据统计 ,全球年腹泻病人达 30亿左右 ,我国年发病约 8亿多人次 ,死亡率达 0 .0 2‰ ,其中最常见的是由肠毒素性大肠杆菌 (Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ,ＥＴＥＣ)引起的腹泻[1] 。由于是经口传播 ,所以常因食品或水源污染导致爆发性流行 ,特别是在自然灾害和战争时期更不易避免和控制 ,同时由于滥用抗菌药物而导致有耐药性细菌的大量增长 ,所以研制有效的疫苗加强免疫预防是迫切需要解决的公共卫生问题 ,但是目前还没有一种行之有效的ＥＴＥＣ疫苗[2 …