高密度脂蛋白胆固醇在代谢综合征中的诊断价值

目的探讨高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在代谢综合征(MS)患者中的诊断价值及检测方法。方法选取245例MS患者(MS组)及85例健康体检者(对照组)为研究对象,测定各研究对象的空腹血糖(FPG)、血脂水平。其中采用选择性抑制法(PPD)和过氧化氢酶清除法(CAT)检测MS患者的HDL-C水平。结果采用PPD法与CAT法检验MS患者HDL-C的水平分别为(1.00±0.25)、(1.01±0.23)mmol/L,差异无统计学意义(P0.05),两种方法之间Kappa值为0.976。MS组的FPG、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、LDL-C/HDL-C分别为(7.22±1.89)mmol/L、(4.43±0.98)mmol/L、(2.31±0.98)mmol/L、(2.99±0.82)mmol/L、3.21±1.05,显高于对照组的(4.73±0.56)mmol/L、(4.05±0.57)mmol/L、(0.94±0.28)mmol/L、(2.52±0.65)mmol/L、0.93±0.64,MS组HDL-C为(1.00±0.25)mmol/L,低于对照组的(1.35±0.28)mmol/L,差异均有统计学意义(P0.05)。在MS组中,FPG≥6.1 mmol/L的患者HDL-C水平[(0.99±0.15)mmol/L]低于FPG6.1mmol/L的[(1.10±0.21)]mmol/L,TG≥2.25 mmol/L的患者HDL-C的水平[(0.98±0.24)mmol/L]低于TG2.25mmol/L的患者,差异有统计学意义(P0.05)。相关性检验显示,HDL-C与FPG、TG呈负相关(r分别为-0.162、-0.373,P0.05)。结论 HDL-C在MS患者中显著降低,且随着FPG、TG的上升有下降趋势,应加强对MS患者HDL-C的监测,PPD法与CAT法均是检测HDL-C的有效方法。     

HBV表面抗原大蛋白与人胰腺CDK5RAP3蛋白的亚细胞定位研究

目的 运用激光共聚焦显微技术对CDK5RAP3与LHBs进行亚细胞定位研究,为进一步研究HBV影响糖、脂类代谢的分子生物学机制提供一定的思路和方向.方法 应用酵母双杂交系统筛选人胰腺cDNA文库中的LHBs结合蛋白基因,构建真核表达质粒pDsRed1-N1-CDK5RAP3,应用激光共聚焦显微技术对CDK5RAP3与LHBs进行亚细胞定位研究.结果 成功构建真核表达质粒pDsRed1-N1-CDK5RAP3,转染了pDsRed1-N1-CDK5RAP3质粒的细胞,红色荧光信号较集中分布于细胞浆中,与经DAPI染色的细胞核无重叠.结论 证实LHBs基因和CDK5RAP3基因在体内可以表达蛋白,并提示LHBs蛋白和CDK5RAP3蛋白均主要定位在细胞浆内.     

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂对糖尿病肾脏疾病大鼠降糖作用及肾脏保护机制的研究

目的探讨钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT-2)抑制剂药物卡格列净对DKD大鼠的肾脏保护作用和可能机制。方法 DKD大鼠随机分为模型组(Mod)、格列美脲组(Glim)、吡格列酮组(Pio)和卡格列净组(Can),每组10只,给药4周。正常大鼠10只为空白对照组(NC)。行OGTT检测FBG,以及尿蛋白总量(UTP)、尿尿素(UUN)、尿肌酐(Ucr)、BUN和Scr含量,计算Ccr。HE染色检测大鼠肾脏组织病理,免疫组织化学法(SP)、Western blot和RT-PCR测定大鼠肾脏中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂1 (TIMP-1)和转化生长因子β(TGF-β)表达。结果 1～4周不同时间点比较,Glim、Pio和Can组血糖水平降低(P0.05)。给药1次,与Mod组比较,Glim、Pio和Can组血糖在0.5、1、2和4h降低(P0.01)。OGTT显示,各药物治疗组较Mod组血糖及曲线下面积(AUC)均降低(P0.01);Can组AUC低于Glim组和Pio组(P0.05)。与Mod组比较,Glim、Pio和Can组UTP、UUN、BUN和Ccr均不同程度降低(P0.05),Can组UTP、Scr和Ccr降低(P0.05)。Mod组肾小球系膜基质增多,Glim、Pio和Can组无明显改变。与NC组比较,DKD各组Col-Ⅳ、MMP-9、TIMP-1和TGF-β蛋白及mRNA的表达均较高(P0.05),Mod组Col-Ⅳ和TIMP-1蛋白及mRNA呈高表达(P0.05),MMP-9蛋白及mRNA的表达较低(P0.05);Glim组、Pio组Col-Ⅳ、MMP-9、TIMP-1和TGF-β蛋白及mRNA的表达与Mod组比较,差异无统计学意义(P0.05);而Can组MMP-9蛋白及mRNA的表达高于Mod组(P0.05),TIMP-1、TGF-β和Col-Ⅳ蛋白及mRNA的表达低于Mod组(P0.05),Can组Col-Ⅳ、TGF-β和TIMP-1蛋白及mRNA的表达均低于Glim组和Pio组(P0.05)。结论卡格列净能改善DKD大鼠的血糖水平,降低肾脏病理评分,其肾脏保护作用机制可能与下调TIMP-1、TGF-β和Col-Ⅳ的表达、上调MMP-9的表达相关。     

血小板反应素Ⅰ在糖尿病大鼠心肌组织中的表达及意义

目的：研究血小板反应素Ⅰ（TSP-Ⅰ）在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型心肌组织中的表达，探讨TSP-Ⅰ在糖尿病性心肌病发病机制中的作用。方法：成年Sprague-Dawley雄性大鼠20只，随机分为糖尿病组（DM组）和正常对照组（NC组），DM组用链脲佐菌素诱导产生糖尿病模型，NC组大鼠尾静脉注射pH4．6、0．1mmol／L枸橼酸钠缓冲液。饲养4周后，麻醉处死，取出心脏，制做连续冰冻切片，对2组大鼠心肌组织进行免疫组织化学染色，观察2组TSP—Ⅰ在左心室心肌细胞中的表达差异。结果：DM组大鼠心肌间质纤维增生，心肌间微血管管壁增厚，TSP-Ⅰ表达阳性心肌细胞的数目及其光密度均较NC组明显增加（P〈0．01）。结论：TSP-Ⅰ可能参与了心肌细胞肥大和纤维化以及心肌微血管病变等糖尿病心肌病的特征性病理改变。     

新医科背景下病理生理学课程教学改革的探索与实践

新医科背景下的医学人才培养要求是全面的、多元化的,不仅需要扎实的医学知识,更需要跨学科的知识整合、临床实践能力、科技创新精神、全球视野与交流能力等多方面的综合素养。病理生理学是临床医学、麻醉医学、医学影像学等专业必修课,着力阐明疾病本质的课程,是临床医学学生的专业必修课,在传统教学中存在思政教育不足;学生临床思维能力弱,岗位胜任力不足;学生学习动力不足等方面的“痛点”问题。鉴于此,基于立德树人、以学为中心、成果导向、持续改进的理念,充分发挥课程思政的感染力、价值力和吸引力,探索了教学创新路径。在教学全过程中将思政育人与知识传授相融合,重塑多维一体的教学价值目标;以学生医学逻辑思维培养为主线,重构课程体系,实现对疾病的认识从整体到局部的转变;向临床拓展教学内容的广度和深度;优化教学资源,构建以疾病为基础的全方位整合实验,进行多元化过程性考核评价,旨在为新医科背景下培养高素质综合型医学人才提供有益参考。     

9型腺相关病毒介导RNA干扰抑制p65基因表达对血管紧张素Ⅱ诱导H9c2细胞凋亡的影响

目的:以9型腺相关病毒(AAV9)介导的RNA干扰抑制大鼠心室肌H9c2细胞中p65基因表达,研究其在血管紧张素II(Ang II)诱导下对H9c2细胞凋亡的影响,并阐明其可能机制。方法:分别将r AAV9-eGFP及r AAV9-eGFP-NF-κB p65-siRNA按转染复数(MOI)=4×106vg/cell转染至H9c2细胞,在荧光倒置显微镜下观察e GFP的阳性表达情况,采用流式细胞术检测其转染效率,并用Western blot法分析p65的表达情况。CCK-8法检测病毒对H9c2细胞活力的影响。流式细胞术分析各组细胞的凋亡情况。结果:病毒转染48 h后e GFP开始有表达,并且表达强度随着时间延长而增加,第5天达最高值,此时流式细胞术检测转染率为(52. 7±1. 9)%。与空白组相比,转染病毒后H9c2细胞的活力无明显变化。静息状态下H9c2细胞的NF-κB p65有一定活性,给予Ang II刺激后NF-κB p65的活性明显增高,而转染r AAV9-eGFP-NF-κB p65-siRNA可有效抑制NF-κB p65的活性。流式细胞术检测发现Ang II刺激组的凋亡程度明显高于空白组,而r AAV9-eGFP-NF-κB p65-siRNA组的细胞凋亡明显受到抑制。结论:通过r AAV9介导的RNA干扰能有效抑制H9c2细胞NF-κB p65基因的表达;抑制p65基因表达对H9c2细胞活力无明显抑制,但能减少Ang II诱导下的细胞凋亡。     

乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白结合蛋白基因的筛选及其与人胰腺CDK5RAP3的相互作用

我们通过细胞内的免疫共沉淀(CO-IP)技术验证乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白(LHBs)LHBs与人胰腺CDK5RAP3之间的相互作用,为进一步研究HBV影响代谢的分子生物学机制提供一定的思路和研究方向.     

慢性丙型肝炎患者伴发代谢综合征的危险因素

目的对慢性丙型肝炎(CHC)患者伴发代谢综合征(MS)的因素进行分析,并探讨其发生的危险因素。方法根据MS诊断标准将未接受过抗病毒治疗的40例CHC患者分为MS组(14例)和非MS组(26例)。比较两组间一般情况、HCV基因型、病毒载量、肝脏脂肪变性及严重程度、肝脏酶学指标、糖代谢相关指标、脂代谢相关指标等因素。结果两组人群在性别、年龄、BMI、腰臀比、CHO、FFA、瘦素、肝脏脂肪变性程度、HCV病毒载量及基因型等方面无显著性差异(P0.05)。MS组FPG、TG的水平明显高于非MS组(P0.05),而ALT、AST、FINS、HOMA-IR、HOMA-β、ADI则明显低于非MS组(P0.05)。结论 CHC患者伴发MS与胰岛素抵抗及糖类、脂类代谢因素密切相关,与病毒本身无明确相关性。胰岛素抵抗可能是CHC患者伴发MS发病机制的中心环节。     

留学生生理学教学探索

对外国留学生实行全英文教学是我校教学实践中新的尝试，为了提高外国留学生生理学课程的教学效果，本文根据几年来实施生理学全英文教学的经验，就学生特点和教师教学方法等方面对留学生教学进行了探讨，以供其他基础课及临床课的教师参考。     

哺乳动物双杂交技术验证HBV表面抗原大蛋白与人胰腺CDK5RAP3蛋白间的相互作用

目的 验证HBV表面抗原大蛋白(LHBs)与人胰腺CDK5RAP3蛋白在细胞内是否存在相互作用关系,为进一步研究HBV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础.方法 构建真核表达质粒pACT-CDK5RAP3,哺乳动物双杂交技术验证LHBs与人胰腺CDK5RAP3蛋白之间的相互作用.结果 实验组和各阴性对照组差别均有统计学意义(P<0.05).结论 LHBs与人胰腺CDK5RAP3蛋白在细胞内存在相互作用关系,且单独转染后没有自身激活作用.