侧群细胞与消化系恶性肿瘤干细胞研究

侧群(side population,SP)细胞是利用Hoechst33342染料和流式细胞术进行造血干/祖细胞分离时发现的一群特殊细胞,既有干细胞样自我更新和多向分化潜能,而且具有独特的SP表型标志,为干细胞研究提供了新的方向。侧群细胞在正常组织和恶性肿瘤细胞中均有表达,且其有与肿瘤干细胞相似的生物学特性。近年来在消化系肿瘤干细胞的研究中发现侧群细胞对于分选鉴定肿瘤干细胞意义重大。本文就侧群细胞与消化系肿瘤干细胞的关系进行研究。     

EGFR抑制剂对人结肠癌细胞株HT29中CD44+细胞及侧群细胞作用的研究

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）抑制剂对人结肠癌细胞株HT29中CD44+细胞及侧群（SP）细胞的作用机制。方法应用Hoechst33342染色、流式细胞仪检测HT29中CD44+细胞以及SP细胞比例和成瘤性,并对不同浓度EGFR抑制剂吉非替尼作用后球囊形成及SP细胞比例、不同化疗药物处理后CD44+细胞比例进行分析与比较。结果空白对照组HT29中SP细胞比例为（3.82±0.08）%,经维拉帕米阻断后降为（0.34±0.03）%,吉非替尼10、15滋mol/L作用48h后HT29中SP细胞比例明显降低（均P＜0.01）,5-氟尿嘧啶（5-FU）作用48h后SP细胞比例变化不大（P＞0.05）。与空白对照组比较,吉非替尼7.5、10、15滋mol/L作用24、48h后CD44+细胞比例均明显降低（均P＜0.05）;且随着吉非替尼的浓度增大,CD44+细胞比例逐渐降低（P＜0.05）。与空白对照组比较,多烯紫杉醇、顺铂作用24、48h后CD44+比例均明显增大（均P＜0.05）。随着时间延长,加入不同浓度的吉非替尼对球囊形成均具有抑制作用。结论EGFR抑制剂对人结肠癌细胞株HT29中CD44+细胞及SP细胞具有生长抑制作用,且可抑制球囊形成。     

无血清悬浮法培养结肠癌HT29细胞系及肿瘤干细胞样亚群筛选

目的:研究无血清培养基悬浮培养人结肠癌细胞系HT29,筛选并鉴定HT29结肠癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群。方法:通过无血清培养基筛选结肠癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群。应用克隆形成实验、表面标志检测、双苯酰亚胺(Hoechst)33342染色检测来确定培养细胞中肿瘤干细胞比例及其培养后的肿瘤干细胞含量变化。结果:结肠癌细胞系HT29中约50%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活、增殖,形成自由飘浮的细胞球。细胞球可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,分化后细胞与培养储存的HT29细胞形态无明显差异。流式细胞仪检测表面标志,HT29细胞系中CD44+细胞含量为(44.18±2.18)%,而细胞球中CD44+细胞含量为(83.41±11.21)%;双苯酰亚胺33342染色检测提示HT29中侧群(sidepopulation,SP)细胞含量为(3.82±0.08)%,而细胞球中含量明显增高。结论:结肠癌细胞系HT29可在含生长因子的无血清培养基中悬浮生长,并维持细胞系。该细胞系中含有一定比例的具有增殖和自我更新能力的结肠癌干细胞样细胞亚群。表面标志以及双苯酰亚胺33342检测差异提示细胞球中仅部分细胞具有干细胞的功能。     

胰腺癌免疫治疗研究现状

胰腺癌是目前消化系统恶性肿瘤中恶性程度较高的一种,生存率极低,外科手术是目前唯一比较理想的治疗方法。但据统计,只有约10%的患者可行手术治疗,即使是行根治性胰十二指肠切除术的患者术后复发也很常见．且胰腺癌对放射治疗（放疗）、化学治疗（化疗）敏感性均低。据报道根治术后再辅以化疗患者的5年生存率〈5％。因此,研究胰腺癌手术治疗之外的治疗方法十分重要．包括免疫治疗、基因治疗、抗血管生成治疗等。近年来针对胰腺癌免疫治疗方面有大量报道,我们总结了相关研究成果,就其作一综述。