一株牛源约翰逊不动杆菌的分离鉴定

目的分离并鉴定1株致2018年7月四川省某肉牛场肉牛患呼吸道疾病并死亡的约翰逊不动杆菌。方法采集发病牛鼻腔拭子并从中分离得到一株优势菌株,对其进行形态学鉴定、生化鉴定、测定16s rRNA基因序列,用MEGA-X软件进行同源性分析、构建进化树,并进行药敏检测。结果分离菌为革兰染色阴性短杆菌,生化特性与约翰逊不动杆菌相符合,16S rRNA序列与GenBank中约翰逊不动杆菌株的同源性均达99%,因此将分离菌确定为约翰逊不动杆菌,并命名为ZZCNC-7B。8只SPF级昆明小鼠用1.4×10⁸ CFU/ml的ZZCNC-7B菌液腹腔注射(0.2 ml/只)后出现精神沉郁、腹式呼吸、眼部出现黏性分泌物、眼睑粘连、畏寒抱团等症状,有6只小鼠在16~36 h内死亡,另2只小鼠出现相同的症状但仍存活。剖检死亡小鼠,大体观察肺、肾充血肿大;肝、脾淤血肿大,肠道积气积液;组织学观察肺充血、出血,肝淤血,脾淤血、出血,肾小管坏死等病变。药敏试验显示,分离菌对四环素类药物四环素和磺胺类药物磺胺异恶唑耐药,对氨苄西林、亚胺培南、左氧氟沙星以及庆大霉素等药物均敏感。结论病牛分离菌为约翰逊不动杆菌,对小鼠具有较强的致病性和致死性,可引起肉牛呼吸道感染,甚至导致肉牛死亡,应引起高度重视。     

滴鼻大肠杆菌对高脂诱导肥胖小鼠糖脂代谢的影响

目的:探讨滴鼻大肠杆菌对高脂诱导肥胖小鼠糖脂代谢的影响。方法:选取48只高脂诱导的肥胖小鼠作为肥胖组,48只非肥胖小鼠作为对照组,滴鼻40μL含4×10~9 CFUs大肠杆菌菌液,于感染前及感染后1、2、3、4 d检测2组小鼠血清糖脂代谢相关指标及肝脏脂质沉积情况。结果:与感染前比较,肥胖小鼠体质量、附睾脂肪组织质量及指数在感染后1~4d显著降低(P0.05);血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平以及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)在2~4d显著升高(P0.05);血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)和极低密度脂蛋白(VLDL)水平在1~4 d显著升高总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平在1~3d显著降低(P0.05);肝脏质量、指数及TG含量在1~4d显著升高(P0.05),肝细胞脂滴蓄积在感染后2和4d明显增多。与对照组比较肥胖组小鼠血清TC、LDL-C和HDL-C水平在感染后显著降低,其余指标均明显升高(P0.05)。结论:滴鼻大肠杆菌可加剧肥胖小鼠糖脂代谢紊乱程度,促进其胰岛素抵抗及肝脏脂肪化的发生、发展。     

紫茎泽兰精油化学分离物抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎性反应

目的探究紫茎泽兰精油化学分离物对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞抗炎活性和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达的影响。方法将巨噬细胞分为空白对照组、 LPS组、 LPS联合紫茎泽兰精油化学分离物组。CCK-8法检测紫茎泽兰精油化学分离物的细胞毒性,实时定量PCR检测RAW264.7细胞白细胞介素6(IL-6)、 IL-10的mRNA水平, ELISA检测IL-6、 IL-10的蛋白水平, Western blot法检测RAW264.7细胞TLR4蛋白水平。结果剂量20 mg/mL的紫茎泽兰精油化学分离物对RAW264.7细胞无细胞毒性。LPS处理可引起RAW264.7细胞TLR4蛋白水平升高、 IL-6 mRNA和蛋白水平增加、 IL-10水平降低,分离产物可逆转以上作用。结论紫茎泽兰精油化学分离物抑制RAW264.7细胞TLR4蛋白表达和IL-6的分泌,促进IL-10表达,发挥抗炎作用。     

肥胖对非致死性肺炎模型小鼠脾脏、外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨肥胖在感染肺炎时对机体免疫功能的调节是否与脾脏和外周血中T淋巴细胞亚群的变化有关。方法将常规非肥胖小鼠分为Ⅰ、Ⅱ组,将高脂诱导小鼠分为Ⅲ、Ⅳ组,Ⅰ、Ⅲ组滴鼻40μl PBS溶液,Ⅱ、Ⅳ组滴鼻40μl含5.9×10~(10)CFU大肠杆菌的菌液,于感染前(0 h)和感染后12 h、24 h、72 h检测各小组脾脏和外周血中的T淋巴细胞亚群。结果在感染后12 h、72 h,Ⅳ组脾脏的CD3~+细胞比例较Ⅲ组显著下降(P0.05),Ⅱ组CD4+细胞比例较Ⅰ组显著升高(P0.05);在感染后24 h、72 h,Ⅳ组CD4~+细胞比例较Ⅲ组显著下降(P0.05)。在感染后24 h、72 h,Ⅱ组CD8~+细胞比例组较Ⅰ组显著下降(P0.05);在感染后12 h、24 h、72 h,Ⅳ组CD8~+细胞比例较Ⅲ组显著下降(P0.05)。在感染后12 h、24 h、72 h,Ⅱ组CD4~+/CD8~+比值较Ⅰ组显著升高(P0.05)。各组外周血中的CD3~+细胞比例,在感染后12 h、72 h,Ⅳ组显著高于Ⅱ组(P0.05);各组外周血中的CD4+细胞比例,在感染前(0 h),Ⅲ组显著高于Ⅰ组,Ⅳ组显著高于Ⅱ组(P0.05)。结论感染非致死性肺炎后,肥胖机体能动员脾脏更多的T淋巴细胞释放入血,加强了机体的细胞免疫功能,有利于抵抗外来病原体的入侵。     

以GDNF为核心的哺乳动物精原干细胞调控网络

睾丸中的胶质细胞源神经营养因子由支持细胞、管周细胞、精母细胞和球形精子合成和分泌,是调节精原干细胞自我更新和分化的关键因子;GDNF通过与SSCs膜上受体GFRα1结合形成GDNF-GFRα1复合物,再结合并活化RET,最后激活MAPK、SFK和PI3K-AKT信号通路并达到调控SSCs自我更新和分化的目的。