一株牛源约翰逊不动杆菌的分离鉴定

目的分离并鉴定1株致2018年7月四川省某肉牛场肉牛患呼吸道疾病并死亡的约翰逊不动杆菌。方法采集发病牛鼻腔拭子并从中分离得到一株优势菌株,对其进行形态学鉴定、生化鉴定、测定16s rRNA基因序列,用MEGA-X软件进行同源性分析、构建进化树,并进行药敏检测。结果分离菌为革兰染色阴性短杆菌,生化特性与约翰逊不动杆菌相符合,16S rRNA序列与GenBank中约翰逊不动杆菌株的同源性均达99%,因此将分离菌确定为约翰逊不动杆菌,并命名为ZZCNC-7B。8只SPF级昆明小鼠用1.4×10⁸ CFU/ml的ZZCNC-7B菌液腹腔注射(0.2 ml/只)后出现精神沉郁、腹式呼吸、眼部出现黏性分泌物、眼睑粘连、畏寒抱团等症状,有6只小鼠在16~36 h内死亡,另2只小鼠出现相同的症状但仍存活。剖检死亡小鼠,大体观察肺、肾充血肿大;肝、脾淤血肿大,肠道积气积液;组织学观察肺充血、出血,肝淤血,脾淤血、出血,肾小管坏死等病变。药敏试验显示,分离菌对四环素类药物四环素和磺胺类药物磺胺异恶唑耐药,对氨苄西林、亚胺培南、左氧氟沙星以及庆大霉素等药物均敏感。结论病牛分离菌为约翰逊不动杆菌,对小鼠具有较强的致病性和致死性,可引起肉牛呼吸道感染,甚至导致肉牛死亡,应引起高度重视。