β-连环素基因在乳腺增生及癌组织中表达和突变的研究

目的检测β-连环素基因在乳腺增生及癌组织中的表达和突变情况,探讨其在乳腺癌发生中的作用。方法应用免疫组织化学染色法和PCR-SSCP检测42例乳腺癌组织、15例乳腺单纯性增生组织及15例乳腺非典型增生组织中β-连环素基因的表达及突变情况。结果乳腺单纯性增生组织中β-连环素表达正常,异常表达率为0。乳腺非典型增生组织和乳腺癌组织中β-连环素表达出现异质性,异常表达率分别为26.7%(4/15)和59.5%(25/42),明显高于单纯性增生组织(P<0.05),且前两者间差异亦有统计学意义(P<0.05)。乳腺单纯性增生、非典型增生和癌组织中均未发现β-连环素基因外显子3的突变。结论β-连环素异常表达在人乳腺癌发生过程中起到重要作用,但β-连环素基因突变并不是该蛋白异常表达的原因,需要进一步研究该蛋白异常表达的机理。     

内毒素调节肝脏β-葡萄糖苷酸酶mRNA的表达

目的研究内毒素对小鼠肝脏细胞β-葡萄糖苷酸酶(GUSB)mRNA表达及其血清活性的影响.方法选择23只BALB/c小鼠分为2组,对照组5只,腹腔注射不含内毒素的生理盐水;其余小鼠为实验组,腹腔注射LPS,并于注射后的1/2、2、4、24 h采用酶促动力学方法检测内源性β-葡萄糖苷酸酶(β-GD)活性;取肝脏,采用半定量RT-PCR方法检测GUSB mRNA的表达.结果小鼠腹腔注射内毒素1/2、2和4 h后,血清β-GD活性(3.96±0.88,4.40±0.55,5.65±0.58)显著高于对照组(2.14±1.46,P＜0.05),而LPS 24 h组与对照组无显著性差异;内毒素刺激BALB/c小鼠2 h和LPS 4 h,其肝脏细胞GUSB mRNA表达(1.10±0.23,1.81±0.04)显著高于对照组(0.57±0.36,P＜0.05),LPS 1/2 h和LPS 24 h的GUSB mRNA表达与对照组相比无显著性差异.结论BALB/c小鼠经过腹腔注射LPS后,其血清中β-GD的酶活性具有显著性增加.LPS还可以增加小鼠肝脏细胞GUSB mRNA的表达.LPS可能通过增加组织β-GD活性的途径,参与了胆色素结石的发病.     

乳腺癌APC/β-catenin信号通路变化的研究

目的:研究乳腺癌发生、发展过程中APC/β-catenin信号通路的变化.方法:应用PCR-SSCP、微卫星标记、甲基化特异性PCR方法检测乳腺癌和癌旁正常乳腺组织中β-catenin基因外显子3和APC基因突变密集区突变、APC基因杂合缺失(LOH)和启动子1A区甲基化状态,用RT-PCR检测APC基因mRNA表达 ;并用免疫组织化学法检测APC和β-catenin蛋白表达.结果:乳腺癌中β-catenin异常表达率为53.9%,β-catenin异常表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期及腋淋巴结转移呈正相关,未发现β-catenin基因突变.乳腺癌中APC蛋白表达阴性率为47.6%,APC蛋白表达阴性同TNM分期和β-catenin异常表达呈正相关,未发现APC基因突变.APC基因启动子1A区甲基化率为36.8%,甲基化与mRNA表达减少、蛋白表达缺失及TNM分期呈正相关.APC基因LOH发生率达32.6%,LOH和甲基化呈正相关.结论:在乳腺癌发生、发展过程中APC/β-catenin通路出现异常改变.β-catenin蛋白异常表达不是该基因突变所致,而是由于APC蛋白表达缺失导致破坏复合体功能障碍所致.乳腺癌中APC基因突变非常罕见,该基因LOH和启动子1A区甲基化是该基因失活的主要机制,是蛋白表达缺失的原因.     

内毒素调节血细胞释放β-葡萄糖苷酸酶的实验研究

目的研究内毒素可否增加小鼠血清β-葡萄糖苷酸酶(β-GD)的活性,以及内毒素对正常人外周血单核细胞(PBMC)产生β-葡萄糖苷酸酶的影响。方法按每公斤体重5mg内毒素(实验组)和生理盐水(对照组)腹腔注射BALB/c小鼠,并于注射后的1/2、2、4和24h取血液抗凝离心,上清液冻存;以1μg/mL内毒素(实验组)和生理盐水(对照组)刺激体外培养的外周血单核细胞,并分别于培养的2、4、8、12和24h取上清液;采用酶促动力学方法于pH值4.5条件下检测上清液β-GD活性。结果与对照组BALB/c小鼠比较,腹腔注射内毒素1/2、2和4小时后,血清β-葡萄糖苷酸酶活性显著增高,依次为(2.14±1.46),(3.96±0.88),(4.40±0.55),(5.65±0.58)Fishman单位,t值分别为2.548、2.896和4.474,P<0.05。正常人PBMC在与LPS共培养的4、8、12和24h,实验组β-GD活性显著高于对照组,分别为(1633.3±65.0)和(1106.7±48.6),(1926.0±147.1)和(1067.7±133.1),(1743.3±66.8)和(1016.7±147.7)...     

下肢静脉曲张的防与治

<正>病例1:几年前,李老师就发现自己的小腿上鼓出了"青筋",一直也没太当回事。现在"青筋"越来越多。腿上皮肤的颜色也深一块浅一块,一天工作下来,小腿又胀又痛。病例2:在商场工作的小张很辛苦,每天都要站五六个小时。每年夏天,小张都不敢穿裙子,因为腿上不知什么时候     

胆管癌中Livin蛋白和血管内皮生长因子的表达及与Caspase-3的相关性研究

目的：探讨凋亡抑制因子Livin蛋白和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在胆管癌组织中的表达及与Caspase-3的相关性.方法：采用免疫组化SP法检测80例胆管癌及30例正常胆管组织（取自其他良性疾病行胆管切除者）中Livin蛋白、VEGF及Caspase-3的表达.结果：胆管癌组织中Livin蛋白和VEGF的表达明显高于正常胆管组织（P=0.00）,Caspase-3的表达低于正常胆管组织（P=0.04）;在胆管癌组织中Livin蛋白、VEGF的表达具有正相关性（r=0.532,P=0.00）,Livin蛋白、VEGF的表达均与Caspase-3的表达呈负相关关系（r=-0.668,P=0.00;r=-0.371,P=0.01）.结论：Livin蛋白、VEGF在胆管癌组织中均高表达及两者呈正相关性,表明两者在胆管癌的发生发展中可能起重要作用并且可能发挥协同作用,二者的表达均与Caspase-3的表达呈负相关关系,提示二者均可能是通过抑制凋亡来参与胆管癌的发生发展.     

Livin蛋白和血管内皮生长因子在肿瘤中的表达

Livin是抑制凋亡蛋白家族（IAP）的新成员,在多数恶性肿瘤组织中高表达,其主要功能是抑制细胞凋亡。细胞凋亡与肿瘤细胞的发生、发展密切相关,肿瘤的生存更有赖于血管的生成。血管内皮生长因子（VEGF）是目前所知作用最强的一种促血管生长因子,几乎在所有的人体肿瘤和肿瘤细胞株中皆有表达。现就Livin和VEGF在肿瘤中的表达作一综述。