大鼠肾脏5/6切除microRN-483-3p的表达变化及机制

【摘要】 目的 探讨慢性肾脏疾病中microRNA-483-3p及其相关靶基因表达情况,明确过表达miR-483-3p的治疗效果。方法 大鼠分为对照组（假手术组,12只）,模型组（5/6肾切除组,12只）,miR-483-3p过表达组（5/6肾切除+ miR 483 3p Agomir,12只）3组。miR-483-3p Agomir给予60mg/kg尾静脉注射,每两周一次。末次术后8周处死大鼠。测定血生化指标,使用ELISA方法测血清中hs-CRP及24小时尿蛋白含量;采用RT-PCR方法进一步筛查出miR-483-3p的下游靶基因;用RT-PCR和Western Blot方法测定三组大鼠肾组织中miR-483-3p及其靶基因表达变化。同时RT-PCR方法测定miR-483-3p宿主基因TGF-2的表达变化。结果 与对照组相比,模型组BUN、Cr明显升高, TC及LDL-C亦显著升高。干预组较模型组BUN、Cr明显降低,血脂水平治疗前后无明显变化。hs-CRP及24小时尿蛋白定量在模型组明显升高,干预组显著降低。RT-PCR结果显示与对照组相比,模型组肾脏组织中CTGF和EGFR/PTEN表达显著升高,而TGF-β、DPC4/Smad4及AANAT无明显变化。干预组较模型组表达显著降低。模型组较对照组肾脏组织中IGF-2的表达明显升高,干预组肾脏组织IGF-2的表达较模型组表达显著降低。结论 慢性肾脏疾病,miR-483-3p表达增加,通过抑制其靶基因CTGF、PTEN的表达,可延缓肾脏纤维化过程。     

真武汤加味治疗糖尿病肾病脾肾气虚证临床研究

目的:观察真武汤加味对糖尿病肾病脾肾气虚证患者血清转化生长因子-β(transforming growth factor beta,TGF-β)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)水平的影响,并观察其治疗该病的临床疗效。方法:将114例患者按随机数字表法分为对照组和观察组各57例。对照组患者给予氯沙坦钾片,每次100 mg,1次·d~(-1),口服。观察组在对照组治疗基础上加用真武汤加味,1剂·d~(-1)。两组疗程均为24周,并进行24周随访。记录治疗期间和随访期间病情进展至Ⅴ期的患者,或肌酐翻倍等终点事件发生情况;检测治疗前后糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbAlc)、尿素氮、血肌酐、24小时尿蛋白定量检测;进行治疗前后脾肾气虚证评分;检测治疗前后TGF-β、GSH-Px水平。结果:观察组临床疗效有效率为84.21%,高于对照组的64.91%,差异有统计学意义(χ~2=5.573,P0.05)。观察组中医证候有效率为91.23%,高于对照组的75.44%,差异有统计学意义(χ~2=5.116,P0.05)。对照组终点事件发生率为43.86%,高于观察组的24.56%,差异有统计学意义(χ~2=4.715,P0.05)。治疗后两组Hb Alc水平均较治疗前下降(P0.01),两组24小时尿蛋白定量、尿素氮和肌酐水平均较治疗前升高(P0.01);治疗后观察组HbAlc、24小时尿蛋白定量、尿素氮和肌酐水平均低于对照组(P0.01)。治疗后观察组TGF-β水平均低于对照组,GSH-Px水平高于对照组(P0.01)。结论:真武汤加味治疗糖尿病肾病脾肾气虚证能改善临床症状、降低蛋白尿、调节血糖,从而降低终点事件的发生率,对DN病情起到延缓作用,其作用机制可能是下调TGF-β、升高GSH-Px等细胞因子来实现的。     

替米沙坦对高浓度葡萄糖引起的内皮细胞间质化的影响

目的探讨替米沙坦对高浓度葡萄糖引起的内皮细胞间质化的影响。方法采用体外分离培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为细胞模型,通过高浓度葡萄糖(30 mmol/L)诱导内皮细胞间质化,TGF-β抑制剂SB-431542或替米沙坦预处理内皮细胞6 h,然后用高浓度葡萄糖(30 mmol/L)孵育脐静脉内皮细胞48 h。RT-PCR和Western blot观察CD31、VE-cadherin、α-SMA和Vimentin表达变化。应用糖尿病小鼠模型验证上述指标的变化。结果高浓度葡萄糖可以促进内皮细胞TGF-β的表达,而替米沙坦可抑制高浓度葡萄糖引起的TGF-β表达增加;高浓度葡萄糖可以降低内皮细胞CD31、VE-cadherin的表达,增加α-SMA及Vimentin的表达。TGF-β抑制剂SB-431542及替米沙坦可以显著逆转高浓度葡萄糖对内皮细胞间质化的影响。结论替米沙坦可以降低TGF-β的表达,抑制高浓度葡萄糖诱导的内皮细胞间质化。     

Clinical characteristics of patients infected with 2019-nCoV Omicron variants BA2 and BA5 in Xi'an city,China

<正>Objective To analyze the epidemiological and clinical characteristics of patients infected with different subtype of2019-nCoV Omicron variants BA.2 and BA.5in Xi’an city.Methods A retrospective observational study was conducted to collect data of 168 patients infected with Omicron variant admitted to the designated hospital for COVID-19 charged by Xi’an Chest Hospital during 2022.Data were collected includingepidemiological,clinical features,     

血清PCSK9在2型糖尿病患者中的作用机制及临床意义

目的 探讨2型糖尿病患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)水平检测的临床意义以及PCSK9的作用机制.方法 选取体检者中的2型糖尿病患者74例作为糖尿病组;同时选取与其年龄性别相匹配的体检健康者76例作为对照组.检测纳入研究者血清PCSK9水平及临床相关指标:空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP).分析血清PCSK9水平与LDL-C、hs-CRP的相关性.以不同水平葡萄糖(高水平:30 mmol/L;低水平:5 mmol/L)孵育HepG2细胞,实时荧光定量PCR(qPCR)及Western Blot检测固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)及PCSK9的表达.采用Betulin和SREBP2 siRNA抑制SREBP2,检测SREBP2抑制对PCSK9表达水平的影响.结果 糖尿病组血清PCSK9水平高于对照组(P<0.05),糖尿病组TC、TG、LDL-C、FPG、HbA1c、hs-CRP均高于对照组(P<0.05).糖尿病患者血清PCSK9水平与LDL-C、hs-CRP水平呈正相关(r=0.593、0.424,P<0.05).高水平葡萄糖孵育的HepG2细胞,SREBP2及PCSK9表达水平高于低水平葡萄糖孵育的细胞(P<0.05);SREBP2受到抑制后,PCSK9的表达水平降低(P<0.05).结论 糖尿病患者血清PCSK9水平升高,高水平血糖可能通过诱导转录因子SREBP2的表达来提高PCSK9的表达水平.     

曲美他嗪片对冠心病伴心力衰竭合并房颤患者的临床疗效及安全性

目的探讨曲美他嗪片对冠心病伴心力衰竭合并房颤患者的临床疗效及安全性。方法将76例冠心病伴心力衰竭合并房颤患者随机分为对照组(常规治疗)和观察组(在对照组常规治疗的基础上使用曲美他嗪片)各38例。观察比较两组患者的治疗效果,心功能指标情况,以及不良心血管事件与再住院情况。结果观察组的治疗有效率明显高于对照组(P<0.05);观察组的心功能指标,LVEF、SBP、HR、LVESD、LVEDD明显优于对照组(P<0.05);观察组的再住院率明显低于对照组,不良心血管事件发生率明显低于对照组(P均<0.05)。结论曲美他嗪片治疗冠心病伴心力衰竭合并房颤疗效确切,有利于提升患者的治疗效果,改善患者的心功能,安全性良好。     

血清PCSK9水平与PCI后冠状动脉病变再进展的关系研究

目的 探讨冠状动脉支架植入术后病变再进展与血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)水平的相关性。方法 收集2016年1月—2021年1月西安市第一医院和西安市高新医院收治的冠心病患者并行经皮冠状动脉介入治疗,于术后3～5年因胸痛行冠状动脉造影的患者为研究对象。根据造影结果将患者分为对照组(36例)和观察组(38例),比较两组基线资料,测定两组患者血清中的PCSK9水平,分析经皮冠状动脉介入治疗后冠状动脉病变再进展与PCSK9的相关性。测定患者血清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,并分析其与PCSK9的相关性。人主动脉平滑肌细胞(SMC)给予PCSK9刺激,观察SMC表型变化及凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的表达。结果 对照组与观察组的血清PCSK9水平分别为(15.02±6.65)ng/mL和(26.94±11.41)ng/mL(P<0.001),IL-6水平分别为(10.43±2.14)pg/mL和(13.71±2.29)pg/mL(P<0.001),TNF-ɑ水平分别为(40.94±5...     

冠心病患者糖代谢状况及其血管病变特点分析

目的 观察空腹血糖(FPG)正常的冠心病患者糖代谢状况及其对冠状动脉病变程度的影响.方法 选择入院时FPG正常的冠心病患者269例,根据FPG水平分为三组:A组(FPG<3.9mmol/L,64例),B组(3.9mmol/L≤FPG≤5.0mmol/L,106例),C组(FPG>5.0mmol/L,99例).行简易的口服葡萄糖耐量试验(OGTT),分析其餐后2 h血糖(2hPG)分布情况.其中167例行冠状动脉造影检查,比较不同血糖水平患者的冠状动脉造影结果.结果 C组2hPG≥11.1 mmol/L的比率(38.4%,38/99)与A组(12.5%,8/64)和B组(9.4%,10/106)比较,差异有统计学意义(P<0.01).149例冠状动脉造影阳性患者中,糖耐量正常27例,单纯糖耐量受损75例,单纯餐后血糖升高47例.三者冠状动脉病变部位比较差异无统计学意义(P>0.05),而单纯糖耐量受损与单纯餐后血糖升高者冠状动脉Gensini评分显著高于对照组[(30.4±1.7)分、(32.6±2.2)分比(24.8±2.4)分,P<0.01].结论 FPG正常的冠心病患者已有很大一部分出现餐后血糖异常,并且冠状动脉血管病变严重,应及早关注冠心病患者的血糖问题,早期干预、早期预防.     

血液透析治疗对血中microRNA-92a的影响

目的探讨血液透析治疗对血清中microRNA-92a的去除效果及其损伤内皮细胞功能的机制。方法收集西安高新医院长期透析治疗的慢性肾病患者,分别收集透析前、透析后6 h左右血清,测定其中miR-92a含量变化,同时测定BUN、Scr及hsCRP水平变化。培养的内皮细胞给予慢性肾脏病患者透析前后血清刺激,观察miR-92a及其靶基因eNOS表达变化。结果透析前后血清中miR-92a含量(1.48±0.24 vs 1.20±0.18,P=0.356)及hsCRP(7.6±2.4 vs 7.5±3.1,P=0.862)水平无显著差异。而透析治疗可显著降低血清中BUN(26.4±8.8 vs 8.3±2.3,P0.01)、Scr(926.3±178.1 vs 312.3±141.2,P0.01)水平。进一步体外细胞实验RT-PCR检测证实与健康人血清相比,慢性肾脏病患者透析前后血清均可促使培养的脐静脉内皮细胞miR-92a表达增加(P0.01),RT-PCR及Western Blot检测证实其靶基因eNOS表达均显著降低(P0.01),内皮细胞功能受损。结论血液透析治疗前后血清中miR-92a下降不明显,miR-92a可致内皮细胞eNOS表达减少,这可能是透析治疗虽然能维持肾脏功能但是无法避免其心血管并发症发生的部分原因。     

高血压患者血清microRNA-92a水平与大动脉僵硬度的关系

目的观察高血压患者血清micro RNA-92a(mi R-92a)水平及其与大动脉僵硬度的关系。方法入选113例高血压患者与54例健康体检者,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR)技术检测血清中mi R-92a水平,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清中血清内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平,采用硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,采用动脉硬化自动测量仪测量肱踝动脉脉搏波传导速度(brachial-ankle pulse wave velocity,ba PWV)。18-20周的SHR大鼠(WKY做对照组),适应环境1周后测定鼠尾动脉血压,采用Western Blot、Real time–PCR分析及测定主动脉内皮细胞mi R-92a、ET-1水平及e NOS含量。取大鼠主动脉组织行石蜡包埋、切片、HE染色及Masson染色,观察动脉中层结构改变及胶原纤维含量的变化。结果高血压患者血清mi R-92a、ET-1水平显著升高,血清NO含量明显降低,ba PWV明显增加(P值均0.001)。采用Spearman相关性分析发现mi R-92a与血清ET-1水平(相关系数0.74)及ba PWV(相关系数0.68)呈显著正相关,而与血清NO含量呈显著负相关(相关系数0.77)。SHR大鼠血压明显升高,与WKY相比有显著性差异(P值均0.0001)。Real time-PCR结果提示SHR大鼠主动脉内皮细胞mi R-92a及ET-1表达明显增加;e NOS的表达明显减少(P值均0.05);Western Blot分析SHR大鼠主动脉组织中ET-1表达增加,而phospho-e NOS(S1177)表达减少(P值均0.05)。主动脉HE染色及Masson染色可见SHR大鼠动脉平滑肌细胞增殖,中层增厚,胶原纤维含量明显增加。结论高血压患者血清mi R-92a水平升高,影响ET-1及e NOS的表达,导致动脉中层纤维含量大量增加,大动脉僵硬度显著增加。