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Polymerase chain reaction (PCR) has been applied in diagnosing amebic liver infection by detecting pathogenic Entamoeba histolytica DNA in liver aspirates. Oligonucleotide primers found to he specific for the gene encoding the 30 kDa molecule of this pathogenic ameba were used in the test. Liver aspirates obtained from 23 patients with amebic liver abscess substantiated by typical clinical rnanifastation or with very high titres of anti-E histtolytica antibodies by ELISA were found to he positive by PCR. Fourteen controlsamples (3 cases of bacterial liver abscess, I of liver cancer and 10 of other abscess) were all found to be negative to this reaction. The results suggested PCR to he a specific and sensitive tool for diagnosing amebic liver abscess infections. 相似文献
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用PCR诊断不同虫荷量的大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的价值 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 评价在不同虫荷量条件下用 PCR诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)的价值。 方法 将 PCP大鼠随机分为药物治疗组及未治疗组 ,测定其肺虫荷量 ,收集其支气管灌洗液 (BAL F)和血清标本 ,用 PCR和半套式 (Sn) PCR检测标本中的卡氏肺孢子虫基因 ,比较 PCR和环六亚甲基四胺银 (GMS)染色结果 ,及与病鼠肺虫荷量的关系。 结果 虫荷量高的未治疗组病鼠的 BAL F标本 PCR、Sn PCR及 GMS染色阳性率分别为 10 0 %、10 0 %和 92 .6 % ,差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;而虫荷量低的治疗组的 PCR(88.1% )、Sn PCR(94 .9% )阳性率均显著高于 GMS染色镜检阳性率 (30 .5 % ) (P<0 .0 5 )。肺虫荷量 >5 0 0个 /mg肺的 PCP大鼠 ,血清 PCR阳性率显著高于≤ 5 0 0者 (分别为 4 2 .9%和 1.7% )。 结论 PCR可用于虫株负荷量较低时的 PCP诊断 ,对判断 PCP病情及疗效考核亦有一定的帮助。 相似文献
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安亦军 《国际医学寄生虫病杂志》1999,(1)
用常规方法从粪便中检测溶组织内阿米巴(E.h.)仍是一个难题。本文研究制备了可特异性地识别E.h.包囊的McAbs。 从22例患者粪便标本中分离出的阿米巴虫株,经rRNA-PCR和己糖激酶同工酶测定,5人为E.h.感染,16人为dispar内阿米巴(E.d.)感染,1人为E.h.和E.d.混合感染。用汞醛碘法从E.h.感染者粪便中收集E.h.包囊,经双阶蔗糖梯度离心和纤维素酶消化法纯化包囊。从503号E.h.感染者粪便中分离纯化出的包囊数达2×10~6个,且其 相似文献
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目的 了解非HIV感染临床病例肺孢子菌肺炎(PCP)的流行现状.方法 用六亚甲基四胺银(GMs)染色镜检和PCR对851例非HIV感染肺炎患者进行检测,从患者痰液或支气管肺泡灌洗液中查到肺孢子菌包囊或DNA为确诊PCP的依据.结果 851例肺炎患者中,肺孢子菌GMS阳性123例(14.5%),PCR阳性202例(23.7%);有免疫功能低下表现的肺炎患者肺孢子菌检出率最高,GMS和PCR阳性率分别高达28.2%和39.4%;在高龄慢性病患者和无明确免疫受损史、肺感染原因待查患者中亦检出PCP患者,GMS阳性率分别为8.7%和10.9%,PCR阳性率分别为17.5%和19.6%.结论 非HIV感染临床病例发生PCP的风险较高,临床医师应注意鉴别有无PCP的可能. 相似文献
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用福尔马林固定粪便标本,从中抽提DNA。采用两对可区别溶组织内阿米巴致病与非致病的引物进行PCR扩增。32例经镜检证实的溶组织内阿米巴带囊者均呈PCR阳性反应,其中6例(18.8%)仅对致病性引物、25例(78.1%)仅对非致病性引物显示阳性反应,1例(3.1%)则对致病及非致病引物均呈阳性反应。致病性PCR阳性者与受试者的临床表现(腹泻或痢疾粪便)密切相关(OR=31.5)。所有对照者(粪便中无溶组织内阿米巴)均呈PCR阴性反应。用PCR,镜检及ELISA方法对一组人(40例)进行阿米巴流行病学检测。粪检阳性率7.6%、PCR阳性率20%、ELISA阳性率25%,由于ELISA阳性者尚包括既往感染,故在3种方法中PCR是确定现症感染最敏感和特异的方法。PCR技术也是鉴别溶组织内阿米巴致病性、诊断阿米巴病和进行流行病学研究的有效工具。 相似文献
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目的 探讨干燥综合症合并肺孢子菌肺炎(PCP)的早期诊断方法。方法 对1例干燥综合症合并肺孢子菌肺炎患者的临床资料进行回顾性分析。结果 患者因干燥综合症接受免疫抑制剂治疗两月后出现不明原因发热、干咳,活动憋气。依据患者临床表现、胸部X线和CT征像、痰肺孢子菌六胺银染色镜检和多聚酶链反应(PCR)监测结果而确诊PCP。予克林霉素(患者磺胺过敏)、卡泊芬静治疗6 d后痰液肺孢子菌DNA载量由104/ml减为102/ml,12 d后进一步降至101/ml,经卡泊芬静治疗21 d后痊愈出院。结论 痰液标本肺孢子菌六胺银染色镜检具有高度特异性,但敏感性较低。高敏感性的PCR方法不仅可以用于PCP筛查,还可用于疗效监测。 相似文献
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用两对引物扩增(PCR)溶组织内阿米巴带囊者粪便中的DNA,以鉴别感染虫株的致病性,致病和非致病性PCR均为阳性者1人(3.1%),仅一项阳性者分别为6人(18.8%)和25人(78.1%)。7例致病性PCR阳性者中,6人有腹泻症状(OR=31.5)。各种对照标本均呈PCR阴性反应。以PCR法对一小样本人群进行阿米巴病调查,致病和非致病虫株的感染率均为10%。结果表明,在阿米巴病流行病学调查中,可 相似文献
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目的 建立卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii, P.c)纯培养株。 方法 从肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠模型离体肺脏的灌洗液中分离P.c,用改良IMDM培养基进行体外培养;以四胺银染色计数法观察虫体增殖情况;用PCR扩增培养物中P.c线粒体大亚基rRNA基因,进行基因鉴定;用透射电镜观察培养虫体的超微结构。 结果 用添加s-腺苷甲硫氨酸(SAM)等辅助剂的IMDM培养基从8只PCP大鼠的肺灌洗液中分离出5个P.c纯培养株(P.c Rat1~5)。分离培养的P.c可进行冷冻保存和复苏培养。培养72 h的P.c包囊可增殖19~22倍。形态、超微结构及基因序列分析证实从大鼠肺灌洗液中分离出的培养物是大鼠源性肺孢子虫。 结论 从大鼠肺灌洗液中分离培养出5株大鼠源卡氏肺孢子虫。 相似文献
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大蒜素治疗大鼠肺孢子虫肺炎的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的观察大蒜素对大鼠肺孢子虫肺炎(PCP)的治疗效果。方法采用皮下注射醋酸泼泥松龙的方法建立PCP大鼠模型。将受试大鼠随机分为正常对照组(A)、未治疗对照组(B)、TMP-SMZ治疗对照组(C)、大蒜素治疗组(D)和青蒿素治疗组(E)。各组从第7周开始灌服相应药物5d,停药后观察1周,用肺重/体重比和肺虫荷量考核疗效。结果PCP大鼠6周内的病死率为16.7%,满6周时抽样进行病原、病理检查,证实均已成功诱导PCP。5组受试大鼠的平均肺重/体重比分别为0.75±0.090、1.05±0.174、0.77±0.091、0.79±0.114和0.85±0.188。B~E组受试大鼠肺虫荷量分别为1490、74、296和219个包囊/mg肺。统计学分析显示,经大蒜素治疗的大鼠平均肺重/体重比、肺虫荷量均显著低于未治疗对照组(P<0.05),与TMP-SMZ治疗对照组和青蒿素治疗组比较差异无显著性(P>0.05)。结论大蒜素对大鼠PCP有显著疗效,效果与TMP-SMZ和青蒿素接近。 相似文献
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应用ELISA法检测阿米巴肝脓肿患者脓液和血清标本中的阿米巴抗原,结果42例患者中有41例检出脓抗原检出率为97.6%,其中包括8例镜检阿米巴滋养体阳性和33例镜检阴性者;有39例检出循环抗原,检出率为92.9%,脓抗原阳性反应强度高于循环抗原者(P〈0.05),各种对照标本的阿米巴抗原检出的率为0,提示可用ELISA抗原检测法替代镜检和培养法进行阿米巴肝脓肿的病原学诊断。 相似文献