丙型肝炎病毒非结构区5个细胞毒性T细胞表位的鉴定

目的 采用T细胞表位预测软件结合体外实验鉴定丙型肝炎病毒(HCV)特异性细胞毒性T细胞(CTL)表位.方法 采用T表位预测软件Rankpep预测HCV特异性CTL表位,选择候选CTL表位加以合成;用候选CTL表位肽分别刺激HCV感染者以及健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC),采用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测PBMC中肽特异性分泌IFN-γ的斑点形成细胞(spots forming cells,SFC)的水平,采用细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)检测PBMC中肽特异性IFN-γ+CD8+T细胞的水平.结果 用5条候选CTL表位肽[NS3 450(TVPQDAVSR)、NS3 594(GPTPLLYRL)、NS4b 78(SMMAFSAAL)、NS5a 416(SEENVSVVF)和NS5a 367(TVSSALAEL)]分别刺激10个HCV感染者和2个健康者的PBMC后,健康者的PBMC不产生IFN-γ而7个HCV感染者的PBMC产生IFN-γ;HCV感染者的PBMC中肽特异性分泌IFN-γ的细胞的频率为(5-36)SFC/105 PBMC,肽特异性IFN-γ+CD8+T细胞占总CD8+T细胞的百分比为0.02%～0.25%.结论 ELISPOT结果和ICS结果证实5条肽NS3 450、NS3 594、NS4b 78、NSSa 416和NS5a 367为全新的HCV特异性CTL表位.     

温州地区62例HCV感染者的基因型特征研究

目的：探讨温州地区丙型肝炎病毒（HCV）感染者的HCV的基因型特征。方法：采用RT巢式-PCR法,对62例HCV-IgG阳性者进行HCV-RNA的检测及基因分型。结果：62例研究者中,HCV基因型1b单阳性率为35．48％,基因型2a单阳性率为3．23％,1b和2a双阳性率为61．29％,1b总阳性率为96．77％,2a总阳性率为50％。结论：温州地区HCV的基因型以1b型占优势,并且基因型1b和2a混合感染率较高。     

登革病毒抗原肽免疫小鼠诱导特异性CD4^＋ T细胞反应

目的:探讨4条登革病毒抗原肽在不同遗传背景小鼠中的免疫原性.方法:4条登革病毒抗原肽(C45-57KLVMAFIAFLRFL,E396-408SSIGKMFEATARG,NS323-35YRILQRGLLGRSQ 和 NS3141-155NREGKIVGLYGNGVV) 中每条肽分别免疫BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠;3周后,处死小鼠并制备脾细胞悬液;不刺激或同样抗原肽刺激脾细胞后,采用细胞内细胞因子染色流式细胞术(ICS) 检测小鼠脾细胞CD4+ T细胞中肽特异性产生IFN-γ或IL-4的CD4+ T 细胞的百分比.结果:肽C45-57可诱导BALB/c小鼠产生特异性的IFN-γ+ CD4+ T细胞(0.72%±0.04% vs 0.04%±0.02%,P＜0.05)而肽E396-408 则诱导产生特异性的IL-4+ CD4+ T细胞(0.09%±0.01% vs 0.01%±0.01%,P＜0.05);肽E396-408、NS323-35和NS3141-155均可诱导C57BL/6小鼠产生特异性的IFN-γ+ CD4+ T细胞(分别为0.31%±0.03% vs 0.02%±0.01%,P＜0.05;0.21%±0.03% vs 0.04%±0.01%,P＜0.05;0.44%±0.04% vs 0.02%±0.01%,P＜0.05),而肽C45-57可诱导产生特异性的IL-4+ CD4+ T细胞(0.45%±0.05% vs 0.02%±0.02%,P＜0.05).结论:肽C45-57和E396-408在BALB/c小鼠中具有免疫原性而肽C45-57、E396-408、NS323-35和NS3141-155在C57BL/6小鼠中具有免疫原性.