4种有囊膜RNA病毒形态发生的比较观察

目的从形态结构及形态发生角度准确区分和确认流感病毒、犬冠状病毒、狂犬病毒和新城疫病毒。方法将感染4种RNA病毒的体外培养细胞用戊二醛、锇酸固定,制成超薄切片,透射电镜观察。结果4种病毒子代病毒的核衣壳或完整病毒粒子的装配都在胞浆中进行,子代病毒装配的前体物质的形态结构不同。4种病毒子代病毒的完整病毒粒子装配的形式不同,其中流感病毒和新城疫病毒只在细胞膜以向胞外出芽的方式装配成完整病毒粒子;狂犬病毒在细胞浆膜相结构和细胞膜表面以出芽方式装配成完整病毒粒子;冠状病毒在细胞浆膜相结构以出芽方式装配成完整病毒粒子。流感病毒子代病毒装配完即离开细胞膜;新城疫病毒的子代病毒不易离开细胞膜。多数狂犬病毒和冠状病毒的子代病毒要待细胞破碎后才能释放到细胞外。结论利用病毒培养物的超薄切片进行电镜观察,可根据其形态发生准确区分4种RNA病毒。     

蝙蝠呼肠孤病毒感染BHK-21和Vero-E6细胞形态发生的比较观察

目的通过对蝙蝠呼肠孤病毒在BHK-21和Vero-E6细胞形态发生的比较研究,筛选出该病毒的最佳宿主细胞。方法将感染呼肠孤病毒XJV株的BHK-21和Vero-E6细胞用戊二醛、锇酸固定,制成超薄切片,用透射电镜观察。同时测定病毒滴度。结果XJV在2种细胞中的适应程度不同,XJV更适于在BHK-21细胞中增殖。XJV在2种细胞中的形态发生不同,在BHK-21细胞中形成的包涵体呈典型的晶格状排列,在Vero-E6细胞中形成的包涵体呈杂乱的球状。XJV用BHK-21和Vero-E6细胞育传5代,病毒滴度分别为105.5TCID50/ml和104.5TCID50/ml。结论BHK-21细胞是蝙蝠呼肠孤病毒XJV株的最佳宿主细胞。     

22L毒株感染雌性BALB/c小鼠的生物学特征检测

“唯蛋白”假说指出,朊蛋白PrP^C的错误折叠体PrP^Sc是朊病毒病的重要的感染因子。本文中,用22L Scraipe毒株感染BALB/c小鼠,在脑内注射后,130 d左右小鼠出现明显的神经症状,150 d陆续出现濒死症状。对濒死期患病小鼠进行检测,表现出典型的朊病毒病的病理特征:抗PK酶消化,神经纤维网内出现空泡结构,神经元消失,朊蛋白聚集,星形胶质细胞增多等。     

阿魏酸抑制朊病毒复制作用的研究

目的本试验通过已建立的ScN2a细胞模型,探讨阿魏酸对朊病毒复制的影响。方法通过Western blot法检测阿魏酸对朊病毒复制作用的影响。结果0．5、1和5μg／mL的阿魏酸能够极显著的抑制PrPsc的表达水平（P〈0.01）。结论由于中药单体阿魏酸可以抑制ScN2a中PrPsc蛋白的复制,所以中药单体阿魏酸对朊病毒病可能起到一定的治疗作用,这为我们以后对于研究朊病毒的治疗提供了新的思路。     

朊病毒病治疗的研究进展

朊病毒病(Prion diseases)是一种由细胞型朊蛋白(PrP^C)构象发生改变所形成的致病型朊蛋白(PrP^Sc)大量沉积在细胞中而引起的一种致命性神经退行性疾病,致死率高达100%。目前为止,该病还没有一种确切的治疗方法,严重威胁人类和动物的健康。随着对朊病毒病研究深入,科学家们发现细胞自噬,RNA干扰,PrP抗体、核酸疫苗、一些药物及化合物在疾病治疗方面有积极作用。我们将近些年来在治疗朊病毒病方面具有潜在应用价值的方法和理论做具体阐述。     

正压防护头罩消毒效果评价方法研究

目的：通过1%卫可消毒剂对正压防护头罩上犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)的消毒效果试验，确立正压防护头罩的消毒效果评价方法。方法：依照《消毒技术规范》(2002版)，结合1%卫可消毒剂特性选定中和剂，通过测定不同样品接种犬肾细胞后的半数组织培养感染剂量(TCID₅₀)验证中和剂的有效性；在同一环境下，通过测定CIV在正压防护头罩上作用不同时间的TCID₅₀验证病毒载体及环境对病毒活性的影响；通过建立病毒载体模型及病毒浸染与采样方法，结合病毒回收率测定结果(实时定量聚合酶链式反应法和酶联免疫吸附测定法)及病毒滴度测定结果[TCID₅₀及鸡胚半数感染量(EID₅₀)]确定最佳消毒时间。结果：0.1%卵磷脂+2%吐温80+0.5%硫代硫酸钠磷酸缓冲盐溶液可作为1%卫可消毒剂的中和剂；在不同时间节点，实验载体及环境均对CIV活性无影响；接种犬肾细胞样本及鸡胚样本平均回收率分别为96.12%和95.98%,1%卫可消毒剂灭活正压防护头罩上CIV的最佳作用时间为4 min。结论...