山楂多糖提取物上调 miR-146a-5p抑制 Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞增殖和凋亡

目的 探讨山楂多糖提取物对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 用浓度分别为200、400、800μg/mL的山楂多糖提取物处理AGS细胞,作为不同浓度山楂多糖提取物组;正常培养的细胞作为对照(NC)组;用800μg/mL的甘露醇处理作等渗对照,记为800μg/mL甘露醇组.将miR-NC、miR-146a-5p转染至AGS细胞中记为miR-NC组、miR-146a-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-146a-5p转染至AGS细胞中再用浓度为800μg/mL的山楂多糖提取物处理,记为anti-miR-NC+山楂多糖提取物组、anti-miR-146a-5p+山楂多糖提取物组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-146a-5p表达水平.结果 与对照组(100.10±10.02)％相比,200、400、800μg/mL山楂多糖提取物组胃癌细胞AGS的增殖率(85.12±8.51)％、(68.22±6.82)％和(42.11±4.21)％降低(F=31.314,P<0.05).不同浓度山楂多糖提取物处理的胃癌细胞AGS中细胞增殖率降低,细胞凋亡率升高,miR-146a-5p表达水平升高(P<0.05).高表达miR-146a-5p,细胞增殖率降低,细胞凋亡率升高(P<0.05).低表达miR-146a-5p部分逆转了山楂多糖提取物对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响.山楂多糖提取物处理的胃癌细胞AGS中β-catenin表达水平降低,低表达miR-146a-5p逆转了山楂多糖提取物对β-catenin表达的抑制作用.结论 山楂多糖提取物可抑制胃癌细胞AGS增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与miR-146a-5p和Wnt/β-catenin信号通路有关.     

白芍总苷体外抗非酒精性脂肪肝的作用机制研究

目的 在细胞模型中研究白芍总苷抗非酒精脂肪肝的作用机制。方法 采用油酸干预HepG2细胞构建脂肪肝细胞模型，油红O染色观察细胞内脂肪滴。采用CCK-8检测白芍总苷对细胞增殖能力的影响，并筛选出最佳的作用浓度和作用时间。将细胞分为4组：对照组、模型组、白芍总苷预处理组和治疗组。生化实验检测细胞总胆固醇（total cholesterol， TC）、甘油三酯（triglyceride， TG）、丙二醛（malondialdehyde， MDA）含量及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase， ALP）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase， GSH-Px）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase， ALT）活性。透射电子显微镜观察细胞线粒体的超微结构。Real-time PCR检测细胞酰基辅酶A氧化酶1（acyl coenzyme A oxidase1， ACOX1）基因表达水平。Western blot检测细胞线粒体融合蛋白1（Mitofusin 1， Mfn1）、线粒体融合蛋白2（Mitofusin 2， Mfn2）、视神经萎缩蛋白1（Optic atrophy 1， Opa1）和发动蛋白相关蛋白1（Dynamin-related protein 1， Drp1）表达水平。结果 成功构建脂肪肝细胞模型，筛选出白芍总苷的最佳的作用浓度为80 μg/mL，作用时间为24 h。与对照组比较，模型组TC、TG、MDA浓度及ALP和ALT活性均显著升高（P<0.05），GSH-Px活性显著降低（P<0.05），线粒体肿胀，嵴稀疏、断裂、溶解，逐渐空泡化，ACOX1 mRNA和Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达水平显著降低（P<0.05），Drp1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。与模型组比较，白芍总苷预处理组和治疗组细胞TC、TG、MDA浓度及ALP和ALT活性均显著降低（P<0.05），GSH-Px活性显著升高（P<0.05），大部分线粒体膜结构较为完整，嵴结构清晰且紧密排列，ACOX1 mRNA和Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达水平显著升高（P<0.05），Drp1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论 白芍总苷对脂肪肝具有较好的防治作用，其作用机制与改善线粒体损伤，保护线粒体功能有关。     

CT联合血清AFP、TSGF、GP73水平检测对原发性肝癌诊断效能的影响

目的探讨电子计算机断层扫描(CT)联合血清甲胎蛋白(AFP)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)、高尔基体蛋白73(GP73)水平检测对原发性肝癌(PHC)诊断效能,明确其在PHC诊断中的应用价值。方法 46例PHC患者、56例肝硬化(LC)患者、40例慢性肝炎患者,另选54例同期健康体检者作为对照。均行常规CT扫描,统计4组血清AFP、TSGF、GP73水平,比较单独检测与CT联合血清AFP、TSGF、GP73水平检测结果。结果 4组血清AFP、TSGF、GP73水平差异有统计学意义(P0.05);血清AFP、TSGF、GP73水平在健康组、慢性肝炎组、LC组、PHC组中依次升高。联合检测诊断效能高于CT、血清AFP、TSGF、GP73水平检测(P0.05)。结论血清AFP、TSGF、GP73水平是检测PHC重要指标,联合CT扫描可提高PHC诊断敏感度、特异度、准确度。