PEI增强G250 DNA疫苗和重组肽疫苗的prime-boost免疫策略研究

目的 :探讨PEI作为免疫佐剂对G250抗原肽基因PVAX1/C-G250肽-C免疫保护效果的增强作用及联合应用CAIX蛋白疫苗进行PRIME—BOOST免疫程序免疫增强效果。方法:用Eco R I、Xho I和Eco R I、Sal I分别双酶切PVAX1及既往构建的p ET28a(+)/C-G250肽-C质粒。利用DNA重组技术构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C,酶切分析鉴定。大量提取质粒并分光光度计测质粒含量。将32只雌性昆明小鼠随机分为(A)裸DNA组,(B)DNA-PEI复合物组,(C)DNA-PEI+蛋白疫苗组,(D)空白对照组。按0,10,20,30天程序经股四头肌注射免疫。C组在第20天及第30天进行蛋白冲击。初次免疫前和第40天鼠尾取血,ELISA法检测抗体滴度。流式细胞术测淋巴细胞亚群CD4+和CD8+。结果:酶切及基因测序鉴定证实G250抗原肽c DNA正确插入PVAX1/C-G250肽-C真核表达的重组质粒中。昆明小鼠经4次免疫后,3个实验组都产生了特异性的体液和细胞免疫反应,B组的抗体滴度1:1.28×104及CD4+、CD8+达26.12%和12.60%,明显高于A组的1:3.2×103和CD4+,CD8+占到19.32%和10.74%。而蛋白冲击组的1:5.12×104和CD4+,CD8+占到41.96%和15.14%,明显高于B组(P0.05)。结论:成功构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C。该DNA疫苗与PEI和G250蛋白疫苗联合使用后产生极强的免疫原性,诱导产生了高滴度、高特异性抗体及细胞免疫反应。证实G250DNA疫苗联合PEI使用并进行蛋白疫苗冲击的免疫策略可产生强大的免疫保护作用。为恶性肿瘤的术后辅助治疗提供新的思路和方法。     

多参数MRI和超声造影指导下穿刺活检诊断前列腺癌效果观察

目的观察多参数MRI和超声造影（CEUS）指导下经直肠前列腺穿刺活检诊断前列腺癌的效果。方法30例疑似前列腺癌患者穿刺前先行MRI检查。穿刺时先行经直肠超声（TURS）检查大致定位可疑位点所在前列腺平面和位置,行TURS指导下常规四区十二针法穿刺活检。固定前列腺平面,注射造影剂,行CEUS检查观察可疑位点血流变化情况,结合MRI检查结果明确定位可疑位点,然后对可疑位点行经直肠前列腺靶向穿刺活检。结果手术切除病灶病理检查结果共检出前列腺癌15例,以其为金标准,则TRUS指导下前列腺穿刺活检检出10例,检出率33.33%,灵敏度66.67%,特异度60%;多参数MRI＋CEUS指导下前列腺靶向穿刺活检检出14例,检出率46.67%,灵敏度93.33%,特异度86.67%。多参数MRI＋CEUS指导下前列腺靶向穿刺活检诊断前列腺癌检出率、灵敏度和特异度均明显高于TRUS指导下前列腺穿刺活检,P均〈0.05。结论多参数MRI和CEUS指导下前列腺靶点穿刺活检诊断前列腺癌效果优于单纯TRUS指导下前列腺穿刺活检。