CAAP1抑制肝癌HepG2细胞凋亡而促进其增殖、迁移和侵袭

目的:探讨CAAP1对肝癌HepG2细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:构建CAAP1过表达载体pcDNA3/CAAP1和敲降载体pSilencer 2.l-U6 neo/shR-CAAPl,转染肝癌HepG2细胞后,qPCR和WB实验分别检测CAAP1mRNA和蛋白的表达水平.实验分为过表达对照组(p...     

赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化大鼠Smad2、Smad3表达的影响

目的探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠Smad2、Smad3表达的影响。方法采用胆总管结扎(BDL)的手术方法建立大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,将大鼠随机分为5组:对照组、模型组、赖氨酸组、低剂量RHL组[35mg/(kg·d)]、高剂量RHL组[70mg/(kg·d)]。应用实时荧光定量PCR的方法检测大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3mRNA的相对表达量。Western blot的方法检测Smad2、Smad3蛋白时相对表达量的变化。结果与模型组大鼠比较,经RHL治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3mRNA相对表达量降低,差异有统计学意义(P0.05);与模型组大鼠相比,经RHL治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3蛋白的相对表达量降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 RHL能够抑制肝纤维化的发展,可能是通过抑制Smad2、Smad3mRNA和蛋白的表达,阻断TGF-β1/Smads信号传导通路实现的。     

miR-185对肝癌细胞生长增殖及侵袭迁移的影响

目的 探讨miR-185对人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721生长增殖、侵袭迁移能力的影响.方法 构建miR-185过表达载体、合成miR-185反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO),经脂质体转染肝癌细胞HepG2和SMMC-7721.利用CCK-8和Transwell小室实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力;生物信息学数据库预测结合基因芯片结果确定miR-185的候选靶基因NRl D1;利用实时荧光定量PCR技术和Western blot检测miR-185对细胞中NRlD1基因表达水平的影响;荧光报告载体实验验证miR-185对靶基因的调控作用.结果 miR-185在人肝癌细胞中的mRNA表达水平显著低于正常肝细胞(P＜0.01);过表达miR-185使人肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低,下调肝癌细胞中NRl D1基因的mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.01);荧光报告载体实验证明miR-185可以通过作用于NRlDl mRNA的3’端非翻译区(untranslated region,UTR)下调其表达水平(P＜0.05).结论 miR-185能抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移能力,NRlD1是miR-185的直接靶基因.     

CAAP1对人肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨Caspase活性和凋亡抑制因子1(CAAP1)对人肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移和侵袭的影响.方法 构建CAAP1的过表达载体pcDNA3/CAAP1和敲降载体pSilencer 2.1-U6 neo/shR-CAAP1(shR-CAAP1),并进行鉴定.SMMC-7721分为4组:pcDNA3/CA...     

基于AGREEⅡ工具评价冠心病中西医临床实践指南的质量

目的基于AGREEⅡ工具评价国内冠心病临床实践指南的方法学及质量。方法计算机检索中国知网(CNKI)、维普(VIP)、万方(Wanfang Data)和中国生物医学文献数据库(CBM),收集国内冠心病临床实践指南,检索时间从建库至2019年10月。由4名研究者独立筛选文献、提取资料后,采用AGREEⅡ工具评价纳入指南的方法学质量。结果共纳入7部国内机构制订的指南或专家共识,包括急性心肌梗死中西医结合诊疗指南、冠心病稳定型心绞痛中医诊疗专家共识、冠心病心绞痛介入前后中医诊疗指南、动脉粥样硬化中西医结合诊疗专家共识、急性心肌梗死中西医结合诊疗专家共识、中医内科常见病诊疗指南(西医疾病部分)冠心病心绞痛、胸痹心痛中医诊疗指南。AGREEⅡ评价结果表明,多数指南在“范围和目的”“参与人员”“表达的清晰性”方面较完整,但“制订的严谨性”“应用性”“编辑的独立性”方面欠佳。急性心肌梗死中西医结合诊疗指南和急性心肌梗死中西医结合诊疗专家共识欠缺的两方面得分最高,其中“应用性”平均得分为46.3%,急性心肌梗死中西医结合诊疗专家共识得分最高,为59.4%,其次为急性心肌梗死中西医结合诊疗指南得分为52.1%;“编辑的独立性”方面,平均得分为47.3%,急性心肌梗死中西医诊疗指南得分最高,为75.0%,急性心肌梗死中西医结合诊疗专家共识得分次之,为62.5%。全面评价结果显示,强烈推荐使用的指南包括2个,推荐(补充或改进)的指南包括3个,不能确定是否推荐使用的指南包括2个。结论急性心肌梗死中西医结合诊疗指南和急性心肌梗死中西医结合诊疗专家共识在国内冠心病中西医临床实践指南的方法学质量均较高,可为临床诊疗提供指导性意见。     

miR-1-3p抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移并诱导其凋亡

目的 探讨在肝癌细胞SMMC-7721中微小RNA(miR)-1-3 p的表达变化对其增殖、迁移和凋亡的影响及miR-1-3p的作用机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1-3p和CAAP1的相对表达量;SMMC-7721细胞按miR-1-3p过表达载体(miR-1-3p组)、pcDNA3组、miR-1-3p inhib-itor组和NC inhibitor组(对照组)分别转染,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8实验检测细胞增殖能力,克隆形成实验观察并比较组间克隆形成率,流式细胞术和Western blot检测细胞凋亡及CAAP1蛋白表达,划痕和Transwell实验观察SMMC-7721迁移和侵袭.利用miRDB、TargetScan、miRanda数据库预测miR-1-3 p靶基因,双荧光素酶报告验证miR-1-3和CAAP1靶向性.结果 miR-1-3p在SMMC-7721细胞中的表达明显低于正常肝细胞LO2,差异有统计学意义(P<0.05);miR-1-3p上调,SMMC-7721增殖、迁移和侵袭能力显著下降,凋亡显著增强,而下调miR-1-3p的表达则作用相反;miR-1-3p和CAAP1具有靶向性;miR-1-3p过表达明显抑制CAAP1表达.结论 miR-1-3p上调可能通过与CAAP1的3'-UTR结合抑制SMMC-7721细胞增殖、侵袭、迁移.