抗粘附治疗在肿瘤转移中的研究与应用

细胞粘附与抗粘附治疗的研究越来越被人们重视,现综述粘附分子的种类与作用及抗粘附治疗在抗肿瘤侵袭转移中的研究进展.     

TGF-β1小干扰RNA影响人腹膜间皮细胞黏附胃癌细胞株SGC-7901的研究

目的:观察人腹膜间皮细胞转染TGFβ1小干扰RNA后对胃癌细胞株SGC7901黏附的变化,探讨其治疗腹膜转移的作用。方法:使用线性化的pcPURβicassette质粒构建针对TGFβ1基因的siRNA表达载体;采用胰蛋白酶EDTA消化法,从人的腹膜组织中分离腹膜间皮细胞。将TGFβ1siRNA载体转染人腹膜间皮细胞,以半定量RTPCR和Western蛋白印迹方法检测转染后间皮细胞中TGFβ1表达水平的变化,以3HTdR掺入实验测定腹膜间皮细胞和人胃癌细胞株SGC7901之间的黏附变化。结果:电泳、DNA测序证实合成的siRNA基因序列正确并已准确克隆入pcPURβicassette载体。免疫组化染色结果显示腹膜间皮细胞角蛋白、波形蛋白表达阳性,而白细胞共同抗原(CD45)、第Ⅷ因子相关抗原阴性。与对照组比较,TGFβ1siRNA载体能显著下调TGFβ1mRNA(0.779±0.091vs0.503±0.064,P=0.013)和蛋白(77.67±5.69vs29.33±6.03,P=0.001)在腹膜间皮细胞中的表达,间皮细胞黏附胃癌细胞的能力减弱。结论:载体介导的RNAi技术可成功地干扰TGFβ1在腹膜间皮细胞中的表达。同时,降低了间皮细胞黏附肿瘤细胞的能力,有望减少胃癌腹膜转移的发生。     

抑制枯否细胞可以减轻鼠肝在冷保存中的脂质过氧化损伤

目的:研究抑制枯否细胞对冷保存的鼠肝枯否细胞和肝细胞线粒体的影响。方法:实验组连续2 d静注氯化钆,7 mg/kg,对照组静注等量生理盐水。3 d后手术取肝,保存时间分别为1,2,3和4 h。观察各组枯否细胞和肝细胞线粒体的形态变化,测定肝组织和肝细胞线粒体脂质过氧化物(LPO)的含量。结果:对照组枯否细胞表现为细胞膜突起增多,细胞内颗粒物质增多等。肝细胞线粒体普遍肿胀,内膜嵴断裂,空泡形成以及破坏等。实验组肝组织和肝细胞线粒体脂质过氧化程度在冷保存1 h和2 h显著低于对照组(P<0.05)。结论:抑制枯否细胞对鼠肝的冷保存损伤有一定的保护作用。     

抗粘附治疗在肿瘤转移中的研究与应用

细胞粘附与抗粘附治疗的研究越来越被人们重视 ,现综述粘附分子的种类与作用及抗粘附治疗在抗肿瘤侵袭转移中的研究进展     

HGF、c-Met及p-Erk蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的:本研究主要探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)和肝细胞生长因子受体(mesenchymal epithelial transition factor, c-Met)及下游信号通路分子磷酸化的Erk（p-Erk）表达与临床病理参数间的关系及其意义。研究HGF、c-Met、p-Erk表达与胃癌生存期的相关性。方法:应用免疫组化方法检测71例胃癌患者行手术治疗后切除的肿瘤组织及53例癌旁正常组织中HGF、c-Met、p-Erk的三者表达状况。分析它们与胃癌临床病理参数间的关系及三者在胃癌组织中表达的相关性,并分析其与胃癌患者的预后生存间存在的关联。结果:HGF、c-Met、p-Erk在胃癌黏膜组织中相对于癌旁正常组织呈高表达状态,且差异有统计学意义(P＜0.05)。三者与性别、年龄大小及主癌所在部位、分化程度未表现出相关性(P＞0.05)。而它们与肿瘤的大小、浸润深度、淋巴结转移、术后复发转移显著相关(P＜0.05)。在胃癌组织中,HGF 与c-Met的表达呈正相关(r=0.576,P=0.001),p-Erk与 HGF 的表达呈正相关(r=0.666,P=0.003),同时p-Erk与 c-Met 的表达呈正相关(r=0.587,P=0.001)。生存分析提示三者的阳性表达明显缩短了胃癌患者术后5年的生存期。结论:HGF、c-Met、p-Erk在胃癌黏膜组织中的表现为高表达,三者与胃恶性肿瘤的发病及进展过程联系密切,可能参与胃恶性肿瘤的发生及发展。     

胃癌MKN45细胞培养液上清对腹膜间皮细胞损伤的实验研究

目的:建立胃癌腹膜转移早期间皮细胞的损伤模型,探讨胃癌腹膜转移早期癌细胞对间皮细胞的损伤与细胞凋亡的联系,以及凋亡程度与相关蛋白表达。方法:将人胃癌细胞培养液上清,与人腹膜间皮细胞系HMrSV5共培养。观察间皮细胞形态、增殖改变,透射电镜观察细胞凋亡,流式细胞仪和荧光染色判断凋亡比例。免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达情况。结果:接触胃癌培养液上清24h后,间皮细胞大片脱落并出现典型凋亡表现。胃癌细胞的分泌物明显抑制间皮细胞的生长。胃癌细胞培养液上清可诱导间皮细胞凋亡、抑制细胞增殖,呈程度-时间依赖性地抑制间皮细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;并能增加促凋亡蛋白Bax表达。结论:胃癌细胞在腹膜转移早期可以通过其分泌物诱导间皮细胞损伤、凋亡,凋亡机制与Bcl-2和Bax的失调有关。提示保护间皮细胞,抗间皮细胞凋亡在胃癌腹膜转移治疗中可能有一定应用价值。     

肺癌术后心律失常的相关危险因素分析

 目的 探讨肺癌术后发生心律失常的危险因素,为肺癌术后心律失常的防治提供科学依据。方法 回顾分析459例肺癌手术患者的临床资料,其中肺叶楔形切除术14例,肺叶切除术387例,全肺切除术30例,探查术28例。术后发生心律失常的143例。应用Logistic回归分析影响术后发生心律失常可能的危险因素。结果 心律失常总发生率为31.2%。单因素分析显示,心律失常的发生与术前心电图情况、术中心包有损伤、术中出血量、FEV1/FVC、术后发生电解质紊乱相关（P＜0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术前心电图异常、术中心包有损伤、FEV1/FVC、术后发生电解质紊乱是术后心律失常的主要危险因素（P＜0.05）。结论 术中减少对心包和肺组织的损伤,术前采取一些预防措施,术后纠正电解质紊乱,可以减少术后心律失常的发生率。     

进展期结肠肝曲肿瘤常规清扫幽门下区淋巴结意义与争议

结肠肝曲癌在结肠癌中虽然所占比例较小，由于其解剖位置及病理特征的关系，却有着较高的复发率，多见幽门下淋巴结转移。在行结肠癌D3根治术时是否行幽门下淋巴结清扫以及其适应证是困扰众多普外科医生的一个重要的临床问题。目前，在右半结肠切除中，D3根治术和完整结肠系膜切除（CME）是被广泛接受的两大理念，也均能取得较为可观的预后。结肠肝曲癌有时需要在行扩大右半结肠癌根治术的同时，行幽门下淋巴结清扫。由于其周围解剖结构比较复杂，手术难度进一步加大。不同术者对结肠肝曲癌可能有着不同的处理方式。目前对结肠肝曲癌幽门下淋巴结清扫的报道相对较少，其具体获益情况仍缺乏针对性评估。     

腹腔中由游离癌细胞分泌的TGF-β1影响腹膜间皮形态与功能进而促进癌转移的研究

目的:研究胃癌分泌的转化生长因子-β1(TGF-β1)对腹膜的破坏机制及TGF-β1抑制剂对腹膜的保护.方法:ELISA法检测胃癌分泌上清中的相关细胞因子含量及在胃癌-腹膜相互作用中TGF-β-Smad信号通路蛋白的水平.观察TGF-β1抑制剂SB431542对腹膜癌转移的抑制作用.结果:5种胃癌细胞系均能分泌大量TGF-β1,TGF-β1的分泌量明显多于其他细胞因子.Western证实了TGF-β1及其信号通路TGF-β1/Smad2、3参与胃癌对间皮的损伤.胃癌上清能破坏间皮层,致损伤脱落,与TGF-β1共培养能明显影响间皮细胞生长.TGF-β1抑制剂SB431542可阻止胃癌上清对间皮的损伤.结论:胃癌上清中TGF-β1高表达,影响腹膜间皮形态与功能进而促进了癌转移,机制可能与Smad信号通路有关.TGF-β1抑制剂能减轻胃癌上清对间皮的损伤.     

转化生长因子-β1小干扰RNA对胃癌细胞生物学行为的影响

目的探讨载体介导的转化生长因子(TGF)-β1小干扰RNA(siRNA)对人胃癌细胞株SGC-7901生物学行为的影响。方法构建TGF-β1特异性siRNA真核表达载体。转染胃癌细胞72 h后,以半定量逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测细胞中TGF-β1的mRNA和蛋白表达的变化；以噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术、细胞附壁试验和Miliicell小室测定细胞增殖、周期、体外黏附和侵袭力,并观察裸鼠体内成瘤性。结果与未处理组比较,TGF-β1-siRNA载体能明显下调TGF-β1 mRNA[(0．910±0．066)与(0．617±0．025)比较,P＜0．01]和蛋白[(120．00±8．72)与(41．00±5．57)比较,P＜0．01]。在胃癌细胞中的表达；细胞抑制率达30．18%,体外黏附、侵袭力下降,裸鼠体内成瘤性受到抑制。结论载体介导的TGF-β1 siRNA可显著下调TGF-β1在胃癌细胞中的表达,在一定程度上抑制其恶性生物学行为。