我国恶性疟原虫Pfcrt和Pfmdr1基因多态性及与氯喹敏感性关系的研究

目的了解我国恶性疟原虫分离株Pfcrt基因K76T及Pf mdr1基因N86Y和D1246Y的点突变特征及发生率,并分析上述分子标志与恶性疟原虫对氯喹敏感性的关系。方法从我国恶性疟流行区云南和海南省采集恶性疟现症患者血样,根据恶性疟原虫Pfcrt基因和Pf mdr1基因序列设计巢式PCR引物,以血样中的恶性疟原虫DNA为模板,进行巢式PCR-RFLP分析,并对部分PCR产物进行测序验证。采用世界卫生组织制定的体外微量法测定同一批血样中恶性疟原虫对氯喹的敏感性。结果云南、海南省恶性疟原虫Pfcrt基因K76T的突变发生率分别为86.7%和64.3%;云南、海南省恶性疟原虫Pf mdr1 N86Y突变发生率分别为46.5%和3.4%。未发现云南、海南省恶性疟原虫分离株存在Pf mdr1 D1246Y突变。体外微量测定法显示Pfcrt 76T突变发生率氯喹抗性株与敏感株间差异有统计学意义（χ^2=24.70,P〈0.01）。Pf mdr1 86Y突变发生率氯喹抗性株与敏感株间差异无统计学意义（χ^2=0.20,P=0.65）。结论在云南省和海南省现场未发现恶性疟原虫Pf mdr1 D1246Y点突变,抗氯喹恶性疟原虫的Pf mdr1 N86Y突变发生率与敏感株间无显著差异。Pfcrt K76T作为分子标志在我国恶性疟原虫氯喹抗性监测中具有应用价值。     

抗咯萘啶的伯氏疟原虫感染红细胞多胺量的测定

目的：了解疟原虫的多胺代谢与咯萘啶（ＰＮＤ）抗药性的关系。方法：感染伯氏疟原虫ＡＮＫＡ株（ＰＳ）和由该株培育的中抗ＰＮＤ品系（ＰＲＡ）及高抗ＰＮＤ品系（ＰＲＢ）的昆明株小鼠于腹腔接种（ｉｐ）后ｄ７取血，经薄层层析后用荧光分光光度法测定正常ＲＢＣ、ＰＳ、ＰＲＡ和ＰＲＢ感染ＲＢＣ的丁二胺（ＰＴＣ）、精脒（ＳＰＤ）和精胺（ＳＰＭ）量。另有感染ＰＳ和ＰＲＢ的小鼠于ｉｐ后ｄ６分别１次灌胃（ｉｇ）ＰＮＤ５ｍｇ／ｋｇ和１０ｍｇ／ｋｇ，ｄ７取血，按上述方法测定给药后感染ＲＢＣ的多胺量，并与不给药组比较。结果：ＰＳ感染ＲＢＣ的多胺量均明显高于未感染疟原虫的正常ＲＢＣ，而感染ＰＲＡ和ＰＲＢ的ＲＢＣ多胺量又显著高于ＰＳ感染ＲＢＣ，且多胺量的增高与抗性程度有关。经ＰＮＤ治疗后ＰＳ感染ＲＢＣ的ＳＰＤ和ＳＰＭ较未治疗组显著下降，而ＰＲＢ感染ＲＢＣ则未见明显变化。结论：伯氏疟原虫对ＰＮＤ的抗药性与其多胺代谢有关。     

蒿甲醚早期治疗实验小鼠弓形虫病的初步观察

弓形虫病是近年来广泛关注的一种人兽共患寄生虫病 ,可引起孕妇流产、胎儿畸形或死胎 ,也是艾滋病等免疫缺陷病患者常见的并发症和致死原因。目前治疗弓形虫病主要采用磺胺类与乙胺嘧啶的联合疗法 ,但该复方的不良反应大、复发率高 ,因此研究寻找高效低毒的新药有重要意义。文献报道 ,青蒿素类对弓形虫有一定的抑制作用[1 3 ] ,本文初步观察了蒿甲醚早期治疗小鼠弓形虫病的效果。1　材料与方法1 .1　虫株　刚地弓形虫RH株 (强毒株 )引自上海市寄生虫病防治研究所 ,小鼠腹腔接种常规传代。1 .2　药物与试剂　蒿甲醚由昆明制药股份有限公司赠…     

利福平治疗间日疟现症患者的初步观察

鉴于疟原虫对不少抗疟药产生抗性,迫使人们进一步寻求新的抗疟药物。N—甲基环叔胺基团的化合物有一定的抗疟作用,具有类似结构的利福平对小鼠约氏疟原虫、伯氏疟原虫高度抗氯喹株、食蟹猴疟原虫以及体外培养的恶性疟原虫均有一定的杀灭作用。据此,我们于1989年9～10月在安徽省六安县对间日疟患者用利福平进行了治疗,并用传统的氯喹/伯氨喹(氯一伯)疗法作对照。一、材料与方法1.治疗对象:具有间日疟临床症状、血检间日疟原虫阳性、半月内未用过抗疟药及病程在5d 以内的患者。利福平治疗组共21例,男13例、女8例;氯—伯组54     

蒿甲醚治疗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的初步观察

目的：观察蒿甲醚治疗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的效果。方法：给予SD大鼠皮质激素后肌肉注射或灌胃蒿甲醚，剖杀大鼠后取肺组织制肺印片观察包囊数。结果：不同给药方式的给药组包囊密度与不给药对照组比较有显差异。而阳性对照组则有显减虫作用。结论：大剂量蒿甲醚对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎无预防和治疗作用。     

中国恶性疟原虫氯喹抗药性相关基因Pfcrt 72-76位点基因型分析

目的了解我国云南和海南恶性疟原虫分离株Pfcrt基因72-76位点基因型,并分析该位置不同基因型与恶性疟原虫对氯喹敏感性的关系。方法从我国恶性疟流行区云南和海南省采集恶性疟现症患者血样,根据恶性疟原虫Pfcrt基因序列设计引物,进行巢式PCR扩增和测序。采用WHO制定的体外微量法测定同批血样中恶性疟原虫对氯喹的敏感性。结果云南、海南省恶性疟原虫Pfcrt基因第72-76位编码的氨基酸单元型在氯喹敏感株均为CVMNK。其中海南的氯喹抗性株Pfcrt基因第72-76位编码的氨基酸为单一的CVIET单元型,云南氯喹抗性株中除一株为CVIKT,另1株为SVMNT外,均为CVIET单元型。结论我国云南、海南省恶性疟原虫氯喹敏感株Pfcrt基因第72-76位编码的氨基酸基因型为CVMNK。抗性株主要为CVIET型,Pfcrt基因第72-76位编码氨基酸基因型可作为氯喹抗性分子标志。     

日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒的现场应用评价及质控分析

目的评价日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒在血吸虫病流行区的应用效果。方法在云南省洱源县2个血吸虫病流行村选择505例常住居民作为检测对象,采用尼龙绢集卵孵化法进行血吸虫病病原法检测。采用Levey-Jennings(L-J)质控图法对整个试验过程进行质量控制。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对调查对象进行日本血吸虫IgG抗体检测,并对检测结果进行分析。结果505名检测对象中,ELISA法查出IgG抗体阳性者290例,阳性率为57.43%;质控血清A和质控血清B检测结果均在L J质控图可控范围内,ELISA检测结果可信。尼龙绢集卵孵化法查出虫卵阳性者20例,阳性率为3.96%。ELISA与粪检的阳性符合率为90.00%。结论日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒有较好的稳定性、可靠性,适于现场血吸虫病人的筛查。     

伯氨喹和三氟乙酰伯氨喹对家兔溶血毒性的比较

健康家兔分别灌胃伯氨喹（ＰＱ）和三氟乙酰伯氨喹（Ｍ８５０６）４０ｍｇ／ｋｇ·ｄ×４ｄ，给药前（ｄｏ）和给药后ｄ３、ｄ５、ｄ７、ｄ１０、ｄ１４和ｄ２１分别经兔耳静脉取血测定高铁血红蛋白（ｍｅｔＨｂ）、网织红细胞（ｒｅｔ）和亨氏小体（Ｈｂｄ）。ＰＱ组ｍｅｔＨｂ、ｒｅｔ和Ｈｂｄ于给药后ｄ３－ｄ５均开始升高，ｄ７－ｄ１０达高峰，ｄ１０以后逐渐下降。Ｍ８５０６组仅Ｈｂｄ升高较为显著，ｍｅｔＨｂ和ｒｅｔ的变化与对照组相仿，未见显著增高，提示在等剂量条件下Ｍ８５０６的溶血毒性并不高于ＰＱ。     

Levey-Jennings氏质控图法在囊尾蚴病IgG抗体检测试剂盒质量控制中的应用

目的 以Levey-Jennings(L-J)氏质控图法评价囊尾蚴病IgG抗体检测试剂盒的稳定性.方法 以试剂盒内提供的阳性对照血清作为内部对照阳性质控血清,经临床确诊的囊尾蚴病患者血清作为外部对照阳性质控血清,对囊尾蚴病IgG抗体检测试剂盒进行质控检测,每天一次,连续20次,制作L_J氏质量控制图进行分析评价.结果 内部、外部对照阳性质控血清经过20次检测得到的吸光度值(A值)分别在1.203～1.672和1.536～1.987之内,均在-x±2s,即1.410±0.310和1.775±0.278警告限内.结论 市售囊尾蚴病IgG抗体检测试剂盒质量稳定,可以用于囊尾蚴病的免疫学检测.     

25%吡螺脲硫酸盐可湿性粉剂杀灭湖北钉螺 滇川亚种的效果评价

目的　评价吡螺脲在云南大山区的杀螺效果和对鱼类的急性毒性,为该药在云南省血吸虫病流行区推广应用提供科学依据。方法　在云南省大理州实验室和有螺现场,采用浸杀法和喷洒法开展25%吡螺脲硫酸盐可湿性粉剂（25% PBU）对湖北钉螺滇川亚种的杀灭试验,并观察对鲤鱼的急性毒性。以50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂（50% WPNES）为药物对照组。结果　25% PBU室内浸杀钉螺1、2 、3 d的半数致死浓度（LC50）分别为0.47、0.25、0.23 mg/L,90%致死浓度（LC90）分别为1.54、0.61、0.49 mg/L; 1.0 mg/L 25% PBU浸杀1 d的杀螺效果与1.0 mg/L 50% WPNES对照组相当。4.0 g/m2 25% PBU室内喷洒 1、3、7 d的钉螺死亡率分别为64.23%、96.67%和100.00%,与1.0 g/m2 50% WPNES杀螺效果差异无统计学意义（P均 > 0.05）。1、2、4 g/m3 25% PBU现场浸杀1 d后钉螺死亡率分别为90.00%、93.33%和100.00%,与1.0 g/m3 50% WPNES浸杀效果差异均无统计学意义（P均 > 0.05）。2.0 g/m2和4.0 g/m2 25% PBU现场喷洒3 d后钉螺死亡率分别为86.36%和87.72%,与1.0 g/m2 50% WPNES灭螺效果差异均无统计学意义（P均 > 0.05）。25% PBU对鲤鱼苗24、48、72 h的LC50值分别为29.38、24.62、23.38 mg/L;72 h观察期内, 17.5 mg/L及以下浓度组未发现鱼苗死亡现象。 结论　25% PBU是一种可应用于鱼塘等环境灭螺的生态保护型新型杀螺剂,其在云南省血吸虫病流行区现场浸杀灭螺的建议剂量为1 g/m3,喷洒灭螺建议剂量为2 g/m2。