单增李斯特菌P60单克隆抗体的制备及初步应用

目的 制备并筛选单增李斯特菌P60特异性单克隆抗体,初步建立其快速检测方法。方法 以体外表达并纯化的李斯特菌P60蛋白为抗原免疫Balb/c 小鼠, 采用杂交瘤技术制备抗李斯特菌P60的McAb,鉴定其抗体亚型,并对单抗的腹水效价、稳定性及亲和力进行分析。用纯化的单克隆抗体包被酶标板,结合生物素化处理的P60多克隆抗体,夹心ELISA筛选单增李斯特菌特异性单抗,并以重组P60为标准品,建立标准曲线。结果 获得了4株可稳定分泌P60单克隆抗体的杂交瘤细胞株。ELISA检测表明,筛选的6C2单克隆抗体株可特异性与单增李斯特菌(4b)P60反应。结论 建立的夹心ELISA方法可对单增李斯特菌进行特异性鉴别和定量检测。