利用双扩增聚合酶链反应检测非甲非乙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒RNA

利用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’－端序列合成两对引物，建立了灵敏、特异的ＨＣＶＲＮＡ双扩增聚合酶链反应检测方法。用此方法及第二代Ａｂｂｏｔｔ酶联抗－ＨＣＶ检测试剂盒，检测了４４例非甲非乙型肝炎患者血清及１０名抗－ＨＣＶ阴性健康人。在４４例患者中，４１例（９３％）ＨＣＶＲＮＡ阳性，３６例（８２％）抗－ＨＣＶ阳性，３３例（７５％）ＨＣＶＲＮＡ、抗－ＨＣＶ全部阳性。３例ＨＣＶＲＮＡ阴性，但抗－ＨＣＶ阳性，另外，有８例抗－ＨＣＶ阴性，ＨＣＶＲＮＡ阳性。１０名健康人ＨＣＶＲＮＡ均为阴性。结果表明，大部分（９２％）抗－ＨＣＶ阳性患者带有ＨＣＶ，但为了检测所有病毒血症患者，抗－ＨＣＶ检测是不够的，利用双扩增ＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ对于抗－ＨＣＶ阴性患者的诊断是非常有用的。     

戊型肝炎病毒结构区基因的克隆表达及其在诊断中的 …

目的 研制戊型肝炎病毒诊断试剂。方法 利用融合蛋白表达载体ＰＧＥＸ－３Ｘ表达了戊型肝炎病毒第二读码框区（ＯＲＦ２４０２－６６０）优势怕表位，表达抗原溶于水，可利用商品化的谷胱甘肽Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ亲合层析柱得到纯化的抗原。结果 经应用发现，此基因重组抗原作为酶联免疫试剂的抗原，用于检测血清中戊型肝炎病毒抗体，与新加坡进口试剂盒有高度的一致性。和血清中的抗体反应性更强。结论 预示该基因抗原可能     

抗乙肝病毒核心抗体抗独特型抗体的研究 Ⅱ.制备抗人HBcAb的抗独特型抗体的探讨

为了研究抗独特型抗体对乙型肝炎免疫反应的调节作用,我们用人的多克隆抗HBc作为免疫原,制备单克隆抗独特型抗体(抗-Id)。将人HBcAb用亲和层析纯化,并经SPA-Sepharose 4B柱提取Fac片段。用4株抗正常人IgG的单克隆抗体与人HBcAb复合,制成免疫复合物,再用作免疫原,采用3种不同的免疫方案,除了采用国内外公认的抗原-抗体结合抑制试验检测外,还做     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,其脾细胞与Sp 2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞株(HE_(20)IB_8、HE_(21)IIG_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2～6.4×10~6。因相捕捉HBeAg、HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂中的包被抗体配合人抗HBe-HRP与Abbott试剂结果非常一致。     

家兔冠状动脉左室枝结扎后心肌微循环的改变

为了研究梗塞后心肌微循环的改变,我们利用家兔开胸冠状动脉左室枝结扎为心肌梗塞模型,采用TTC染色确定梗死区,用放射性生物微球、碱性磷酸酶染色、放射免疫分析、透射电镜观察、比重梯度等方法观察了     

抗HBV PreS2单链噬菌体抗体基因在噬菌体载体中的克隆及初步表达

本文利用基因工程技术,在成功构建抗HBV PreS2 3B9mAb单链可变区抗体(ScFV)基因的基础上,在389 ScFv基因中引入限制性内切酶位点,克隆的噬菌体表达载体pCANTAB5噬菌粒中。经转染TG1     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,取该鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞系(HE_(20)1B_8,HE_(21)2C_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2×6.4×10~6。因相捕捉HBeAg,HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验均证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂包被抗体,配合人抗HBe-HRP,结果与Abbott试剂非常一致。     

抗乙肝病毒核心抗体的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

用单克隆抗体HBc免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选到1C12、2G12两株分泌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株,经鉴定属于IgG2a亚类。经ELISA独特型结合试验,抗原—抗体结合抑制试验进行鉴定,证实为抗乙肝病毒核心     

以合成肽作抗原的酶联免疫吸附法诊断戊型肝炎病毒感染

建立了用合成多肽抗原测定戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）抗体的酶联免疫吸附法。合成多肽Ｅ３３（ｃ）（２μｇ／ｍｌ）、Ｅ１５（Ｍ）（１μｇ／ｍｌ）混合包被，测定了４８份ＨＥＶ抗体阳性血清，阳性符合率为９５．８％。４１份阴性血清均为阴性。此方法灵敏度高、特异性强、简便快速，适合临床应用。